摘要：目的：考查芒種花不同提取物對CCl致肝損傷模型小鼠的保肝作用。方法：小鼠隨機(jī)分為正常對照組、模型對照組、芒種花醇提取物大、小劑量組，水提取物大、小劑量組和醇提物加胡黃連醇提物組，分別連續(xù)7天灌胃給予相應(yīng)的受試藥物，末次給藥后造模小鼠一次性腹腔注射5％CCL花生油10ml／kg染毒，12h后取血檢測AST、ALT、LDH。結(jié)果：與正常對照組比較，模型組小鼠AST、ALT升高；與模型對照組比較，給藥組AST、ALT值均有降低，LDH值部分降低或改變。結(jié)論：芒種花不同提取物對CCl所致肝損傷小鼠模型有一定保護(hù)作用。
　　關(guān)鍵詞：芒種花；四氯化碳；肝損傷；保護(hù)
　　中圖分類號：R285.5　文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A
　　文章編號：1007－2349(2007)11－0035－02
　　
　　芒種花為金絲桃科西南金絲桃(Hypericun heny；Levl.etvan)的干燥地上部分，又名栽秧花、土連翹。其性味苦、辛、寒。有清熱解毒、利尿解痙之功效。民間用于肝炎、利膽、感冒、痢疾等疾病。筆者用芒種花兩種不同溶媒提取物對四氯化碳所致肝損傷小鼠模型進(jìn)行血清學(xué)改變的實(shí)驗(yàn)觀察，以探索發(fā)現(xiàn)和評價芒種花提取物的保肝作用。
　　
　　1 材料與方法
　　
　　1．1 芒種花與胡黃連的藥材，購自云南省藥材公司，云南中醫(yī)中藥研究所新藥中心提供提取物。
　　1．1．1 芒種花的醇提取 稱取生藥材1400g，加90％9000ml乙醇浸泡12h后，回流提取1h，過濾，濾液另器保存，再向藥渣中加入70％8000ml乙醇回流提取1h，過濾。合并兩次濾液，濃縮至流浸膏(800m1)。并將其置于60℃烘箱中恒溫烘至于浸膏(1g干浸膏相當(dāng)于4.6g生藥)。
　　1．1．2 芒種花的水提取 稱取生藥材1400g，加9000ml水浸泡12h后，加熱煮沸1h，過濾，濾液另器保存，再向藥渣中加入9000ml水煮沸1h，過濾。合并兩次濾液，濃縮至流浸膏(400m1)，并將其置于60℃烘箱中恒溫烘至于浸膏(1g干浸膏相當(dāng)于5.4g生藥)。1．1．3 胡黃連的提取　稱取生藥材1000g，加90％8000ml乙醇浸泡12h，過濾，濾液另器保存，再向藥渣中加入70％8000ml乙醇回流提取1h，過濾。合并兩次濾液，濃縮至流浸膏(980m1)，并將其置于60℃烘箱中恒溫烘至于浸膏(1g干浸膏相當(dāng)于4.9g生藥)。
　　1．2 試驗(yàn)動物 清潔級ICR種小鼠，體重(20±2)g，雌雄各半，合格證號：滇實(shí)動證第2004009號，動物及飼料由云南省昆明醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供。
　　1．3 試驗(yàn)器材 小鼠灌胃器，常用手術(shù)剪刀，鑷子，試管，(ALCYON300)全自動生化儀，離心機(jī)，恒溫水浴。
　　1．4 藥物與試劑 芒種花醇提液，芒種花水提液，胡黃連醇提液。6.14％花生油CCl4(批號：4870903－6)。AST檢測試劑盒(批號字2004第3060165號)，ALT檢測試劑盒(批號字2004第3060162)，LDH檢測試劑盒(批號字2004第3060212)。以上試劑盒均由四川省邁克科技有限公司提供。
　　1．5 試驗(yàn)方法　取小鼠70只，雌雄各半，將小鼠隨機(jī)分為正常對照組，造模組，芒種花醇提取物大、小劑量組，芒種花水提取物大、小劑量組，芒種花醇提取物+胡黃連醇提取物組。每組10只小鼠。正常對照組給予基礎(chǔ)飼料和滅菌飲用水不用CCL染毒；造模對照組給予基礎(chǔ)飼料和滅菌飲用水喂養(yǎng)7天后，一次性給腹腔注射5％CCl花油10ml／k8染毒；芒種花醇提取物大劑量組(2.55g提取物／kg.d)、小劑量組(0.85g提取物／y/jG/gb7vYmfopRSxbxz2A==kg.d)，芒種花水提取物大劑量組(2.16g提取物／kg.d)、小劑量組(0.72g提取物／kg.d)，芒種花醇提取物(2.55g提取物／kg.d)+胡黃連醇提取物組(0.93g提取物／kg.d)，造模前各受試組小鼠口服灌胃每日1次，灌胃體積10ml／ks連續(xù)灌胃給藥7天，第7天灌胃各受試組動物均以1次性腹腔注射5％CCl花生油染毒，12h后，將各組小鼠稱重后，受試各組再行口服灌胃給藥1次。30min后，受試給藥組與染毒12h后造模組，正常對照組，同時經(jīng)股動脈取血，取血清測定各組動物AST、ALT、LDH值。所得數(shù)據(jù)均用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，用t檢驗(yàn)處理數(shù)據(jù)。
　　
　　2 結(jié)果
　　
　　2．1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 見表1。
　　結(jié)果表明，芒種花醇提物大、小劑量組，水提物大、小劑量組和醇提物加胡黃連醇提物組與造模組相比較，谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)指標(biāo)均有所明顯降低(P＜0.01)，乳酸脫氫酶(LDH)指標(biāo)，除醇提物大劑量組和水提物小劑量組外，實(shí)驗(yàn)給藥組與造模組相比較有所降低(P＜0.01)，門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)指標(biāo)。與造模組比較，均有降低(P＜０.01)，差異有顯著意義。模型組與空白對照組比較AL了、AST指標(biāo)有明顯增高。表明實(shí)驗(yàn)給藥組對因CCL所至的肝損傷小鼠模型血清學(xué)AS了、ALT、LDH指標(biāo)均有所降低和改變。
　　
　　
　　3 討論
　　
　　CCL為選擇性肝臟毒物，主要用于動物肝損傷模型建立。目前認(rèn)為與CCL自身和其自由基代謝產(chǎn)物有關(guān)，可使細(xì)胞膜系統(tǒng)發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整性，干擾細(xì)胞代謝，引起細(xì)胞損傷，小鼠CC乙染毒12h后，出現(xiàn)動物血清中AS丁、ALT、LDH活性增高，CCl染毒致肝損傷小鼠模型是一種經(jīng)典造模方法。一次性染毒多用于動物實(shí)驗(yàn)性急性肝損傷的研究，本實(shí)驗(yàn)用芒種花提取物以預(yù)防口服給藥對一次性CCl染毒致肝損傷小鼠的動物模型的影響進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)觀察。結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)各組動物血清ALT指標(biāo)與模型組比較均為降低；實(shí)驗(yàn)組除醇提取物大劑量組和水提取物小劑量組外，其它實(shí)驗(yàn)組血清LDH指標(biāo)與模型組比較均有降低；同時實(shí)驗(yàn)組血清AS7指標(biāo)與模型組比較均有降低趨向。模型組與空白對照比較，和AST、ALT值高于空白組，表明CCl染毒后，小鼠已造成一定的肝損傷。對于LDH指標(biāo)數(shù)據(jù)值情況，初步分析?？赡芘c血清量少和溶血有關(guān)，但從數(shù)值分析看有一定的改變趨向關(guān)聯(lián)性，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果所示表明，芒種花水提取物、醇提取物、醇提取物+胡黃連醇提取物均對因CCl致急性肝損傷小鼠模型血清學(xué)指標(biāo)有影響或不同程度降低，提示有一定的保肝作用，其機(jī)理有待進(jìn)一步研