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      黏蟲體內(nèi)兩種微管蛋白基因cDNA序列的克隆與序列分析

      2008-04-29 13:14:03秦松柏樸冬花許艷麗
      植物保護(hù) 2008年4期
      關(guān)鍵詞:序列分析黏蟲克隆

      樊 東 秦松柏 樸冬花 許艷麗

      摘要以黏蟲4齡幼蟲為材料提取總RNA,利用RT—PCR和eDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)(RACE),分別擴(kuò)增得到該蟲的α和β微管蛋白基因的cDNA序列各1條。其中α微管蛋白基因的eDNA序列1443個堿基,包括一個1353個堿基的開放閱讀框,編碼一個含450個氨基酸的蛋白,分子量約為50.0ku。氨基酸的142~148位存在一個微管蛋白標(biāo)志信號片段GGGTGSG,在氨基酸序列的C-端有一個酪氨酸殘基,N-端存在一個對轉(zhuǎn)錄后調(diào)控非常重要的保守區(qū)MRECI序列,以上特點與其他昆蟲α微管蛋白氨基酸序列相同。黏蟲β微管蛋白基因cDNA序列含1906個堿基,開放讀碼框1 344個堿基,編碼氨基酸447個,分子量約為50.2ku,等電點4.75。1~4個氨基酸MREI為β微管蛋白轉(zhuǎn)錄后調(diào)控信號,140~146GGGTGSG位同樣存在一個微管蛋白標(biāo)志信號片段。序列比對表明,克隆的α和β微管蛋白基因與其他昆蟲的a和p微管蛋白基因在核苷酸和氨基酸水平上都是高度同源的,黏蟲與家蠶(Bombyx morti)α微管蛋白的氨基酸序列同源性達(dá)到99.3%,與其他3種夜蛾科昆蟲α微管蛋白的氨基酸序列同源性更是達(dá)到100%。黏蟲與家蠶β微管蛋白的氨基酸序列同源性達(dá)到98.7%,與煙草天蛾p微管蛋白的氨基酸序列同源性達(dá)到99.6%。兩個基因的cDNA序列已經(jīng)登錄GenBank并獲得登錄號分別為EUlOOOl6和EU234504。

      關(guān)鍵詞黏蟲;α微管蛋白;β微管蛋白;克?。恍蛄蟹治?/p>

      中圖分類號Q 785,S 433.4

      注:“本文中所涉及到的圖表、注解、公式等內(nèi)容請以pdf格式閱讀原文。”

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