李旭強(qiáng)，王 慧，鄭紀(jì)寧

(承德醫(yī)學(xué)院，河北承德 067000）

P-gp在大腸癌中的表達(dá)及臨床意義

李旭強(qiáng)，王 慧，鄭紀(jì)寧△

(承德醫(yī)學(xué)院，河北承德 067000）

目的:探討大腸癌組織多藥耐藥基因(MDR-1）產(chǎn)物P-糖蛋白(P-gp）表達(dá)與大腸癌臨床病理特征的關(guān)系。方法:采用免疫組織化學(xué)染色法檢測80例大腸癌組織P-gp的表達(dá)情況，對其臨床病理學(xué)因素進(jìn)行分析。結(jié)果:80例大腸癌患者中，P-gp陽性表達(dá)率為43.75%(35/80）。P-gp表達(dá)與大腸癌的分化程度、浸潤深度、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)(P＞0.05）;與年齡有關(guān)，≥60歲者P-gp的陽性表達(dá)率明顯低于60歲以下者(P＜0.01）。結(jié)論:大腸癌組織P-gp的表達(dá)率較高，并且與年齡相關(guān)，臨床檢測P-gp對選擇個體化化療方案具有重要意義。

大腸癌;P-gp;免疫組織化學(xué);多藥耐藥基因

大腸癌是我國常見的消化道惡性腫瘤，發(fā)病率逐年上升，僅次于胃癌、食管癌。但大腸癌早期癥狀不明顯，且病情發(fā)展緩慢，發(fā)現(xiàn)時多為晚期，治療多采用手術(shù)與化療相結(jié)合的方法，然而臨床療效不十分滿意。近年的研究證實，多藥耐藥基因(MDR-1）是造成大腸癌化療失敗或早期復(fù)發(fā)的主要原因，其表達(dá)產(chǎn)物P-糖蛋白(P-gp）是造成耐藥性的物質(zhì)基礎(chǔ)[1]。本研究采用免疫組化染色方法檢測80例大腸癌組織P-gp的表達(dá)情況，并結(jié)合病人的臨床資料進(jìn)行綜合分析，以期為臨床制定個體化治療方案提供資料。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本選擇 2009年7月-2009年12月承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院病理科大腸癌手術(shù)切除標(biāo)本80例，男46例、女34例，年齡25-80歲，所有患者均為首次發(fā)現(xiàn)大腸癌，術(shù)前均未接受化療、放療等治療。大腸癌病理學(xué)分級按組織分化程度分為高分化腺癌(31例）、中分化腺癌(38例）和低分化腺癌(11例）。所有標(biāo)本均經(jīng)10%福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，5μm連續(xù)切片。

1.2 主要試劑 即用型鼠抗人P-gp單克隆抗體(產(chǎn)品編號:R-0432，K-0432;克隆號:JSB-1）、SP免疫組化試劑盒及DAB顯色試劑盒，上海長島生物技術(shù)有限公司。

1.3 方法 實驗操作嚴(yán)格按照SP免疫組化試劑盒說明書進(jìn)行，以PBS代替一抗作為陰性對照，用已知陽性片作為陽性對照。P-gp定位于細(xì)胞膜，陽性染色為均勻一致的棕黃色。每張切片觀察5個400倍視野，記錄每個視野腫瘤細(xì)胞的染色情況，計算陽性細(xì)胞百分率，取平均值，根據(jù)陽性細(xì)胞百分率對表達(dá)程度進(jìn)行評估，＜10%定為陰性(-），＞10%定為陽性(+）[2]。

1.4 統(tǒng)計分析 采用SPSS 11.5統(tǒng)計軟件行卡方檢驗和Fisher精確概率法檢驗，P＜0.05為差異顯著性的標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

80例大腸癌標(biāo)本，檢出P-gp陽性表達(dá)35例，陽性率為43.75%。P-gp表達(dá)與大腸癌病理特征的關(guān)系:大腸癌組織P-gp的表達(dá)與分化程度、浸潤深度、臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)(P＞0.05）;大腸癌組織P-gp的表達(dá)與年齡有關(guān)，年齡≥60歲者大腸癌組織P-gp的陽性表達(dá)率明顯低于年齡＜60歲者(P＜0.01）。見附表。

附表 大腸癌組織P-gp表達(dá)與大腸癌臨床病理特征的關(guān)系

3 討論

早在1970年，國外學(xué)者Beilder等最先報道了多藥耐藥現(xiàn)象。多藥耐藥是指某些癌細(xì)胞株對一種抗腫瘤藥物產(chǎn)生抗藥性，同時對其它非同類型的藥物亦產(chǎn)生抗藥性，這種現(xiàn)象被稱為多藥抗藥性，即多藥耐藥現(xiàn)象[3]。近年的研究證實，MDR1及其產(chǎn)物P-gp過度表達(dá)是造成大腸癌化療失敗、影響生存率的重要因素，而化療又是治療大腸癌的重要手段，尤其是中晚期大腸癌[3-4]。吳瑾等[5]的研究證實，MDR-1基因的表達(dá)與大腸癌化療療效呈負(fù)相關(guān)，MDR-1基因陽性表達(dá)者化療療效明顯低于陰性表達(dá)者。因此，通過檢測大腸癌組織P-gp的表達(dá)情況可以預(yù)測患者的化療敏感性，對P-gp表達(dá)陽性的患者可選用某些與MDR非相關(guān)的化療藥物，進(jìn)行有針對性的個體化化療，制訂個體化治療方案，從而提高大腸癌的化療敏感性。

本研究發(fā)現(xiàn)，大腸癌組織P-gp的陽性表達(dá)率為43.75%，與文獻(xiàn)報道的38%-85%一致;大腸癌組織P-gp的表達(dá)與大腸癌分化程度、浸潤深度、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無明顯相關(guān)性(P＞0.05），與Chen[6]等的研究相符。本研究在分析P-gp的表達(dá)與大腸癌臨床資料的關(guān)系時還發(fā)現(xiàn)，年齡≥60歲者大腸癌組織P-gp的陽性表達(dá)率明顯低于年齡＜60歲者(P＜0.01）。前人的研究成果尚未揭示大腸癌組織P-gp表達(dá)與年齡的相關(guān)性，考慮原因可能如下:年齡跨度范圍小，本研究為隨機(jī)抽取、比例適中;病例數(shù)較少。另外，Chen等[6-7］的大量研究證實，60歲以上P-gp表達(dá)率低可能和老年人細(xì)胞新陳代謝功能降低、細(xì)胞凋亡增多等因素有關(guān)。

本研究結(jié)果表明，大腸癌患者的化療應(yīng)根據(jù)P-gp的表達(dá)情況，選擇合理的個體化化療方案，避免無效化療導(dǎo)致的副作用;另外，60歲以上的大腸癌患者化療可能會更敏感，但也要重視相關(guān)副作用。然而，單純依據(jù)P-gp對大腸癌化療療效作出早期預(yù)測還不夠，關(guān)鍵是克服MDR現(xiàn)象，因此對MDR現(xiàn)象產(chǎn)生的機(jī)制還需進(jìn)一步深入研究，以期待聯(lián)合逆轉(zhuǎn)劑以克服MDR現(xiàn)象，為進(jìn)一步提高大腸癌化療療效提供可能。

[1]Pérez-Tomás R.Multidrug resistence: retrospect and prospects in anti-cancer drug treatment[J].Curr Med Chem,2006,13(16):1859-1876.

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EXPRESSION AND CLINICAL SIGNIFICANCE OF P-GP IN COLORECTAL CARCINOMA

LI Xu-qiang, WANG Hui, ZHENG Ji-ning
(Chengde Medical College, Hebei Chengde 067000, China)

Objective:To investigate the relationships between multidrug resistance gene product P-gp expression and the clinical pathological characteristics in human colorectal carcinoma.Methods:P-gp expression in 80 cases of colorectal carcinoma tissue were determined by SP immunohistochemical staining.Results:The positive rate of P-gp expression in colorectal carcinoma was 43.75% (35/80). The P-gp expression had no relations with differentiation degree, clinical stage, infi ltration depth and lymph node metastasis (P＞0.05); But had relations with age, the positive rate of P-gp expression in colorectal carcinoma of patients≥60-year old was obviously lower than patients under 60 (P＜0.01).Conclusions:The P-gp expression in colorectal carcinoma is fairly high and has relations with age. It is very important to detect P-gp expression when determine individualization treatment.

Colorectal carcinoma; P-gp; Immunohistochemistry; Multidrug resistance gene

R735.3

A

1004-6879(2010）04-0356-02

2010-04-29）

△ 通訊作者