何志交 曹俊明 陳 冰 藍(lán)漢冰 黃燕華 朱 選 陳曉瑛, 潘 慶

（1.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所,廣州510640;2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,廣州510642; 3.茂名市水產(chǎn)技術(shù)推廣中心站,茂名 525000）

維生素B1（thiam ine）,又名硫胺素或抗神經(jīng)炎素,由嘧啶環(huán)和噻唑環(huán)結(jié)合而成的一種B族維生素,是動(dòng)物機(jī)體維持正常生長(zhǎng)所必需的水溶性維生素之一。在體內(nèi)經(jīng)硫胺素焦磷酸激酶催化后轉(zhuǎn)變成為焦磷酸硫胺素（thiam in pyrophosphate,TPP）,是維持動(dòng)物機(jī)體正常代謝和健康所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。TPP主要作為α-酮酸氧化脫羧酶（丙酮酸脫氫酶、α-酮戊二酸脫氫酶）和支鏈脫氫酶的輔酶,參與三羧酸循環(huán)以及糖代謝過(guò)程。另外,TPP作為轉(zhuǎn)酮醇酶的輔酶,參與到磷酸戊糖代謝途徑中,為核苷酸的合成提供磷酸戊糖以及為脂肪酸的合成提供NADPH[1]。

到目前為止,國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的維生素B1的需要量開(kāi)展了不少的研究工作。多種魚(yú)類(lèi)及軟體類(lèi)的維生素B1需要量已有報(bào)道,包括皺紋盤(pán)鮑[2]、草魚(yú)[3]、鱸魚(yú)[4]、牙鲆[5]、虹鱒[6]、斑點(diǎn)叉尾鮰[7]、大菱鲆[8]以及鯉魚(yú)[9]。以上報(bào)道中,魚(yú)類(lèi)的維生素B1需要量在0.5～25.0m g/kg日糧之間,而軟體類(lèi)皺紋盤(pán)鮑的維生素B1需要量相對(duì)較高,為51 mg/kg日糧。但甲殼類(lèi)的維生素B1需要量的研究報(bào)道相對(duì)較少。Deshim aru等[10]研究表明日本對(duì)蝦對(duì)維生素B1的需要量為60 mg/kg日糧。徐志昌等[11]報(bào)道,日糧中含60 mg/kg的維生素B1時(shí),中國(guó)對(duì)蝦的增長(zhǎng)率和存活率最高,維生素B1過(guò)量或者缺乏均會(huì)阻礙對(duì)蝦的生長(zhǎng)和代謝。Chen等[12]以生長(zhǎng)和存活率以及血淋巴的硫胺素和TPP含量為評(píng)價(jià)指標(biāo),得到草蝦對(duì)維生素B1的需要量為13～14m g/kg日糧。目前,有關(guān)凡納濱對(duì)蝦維生素B1需要量的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本文以凡納濱對(duì)蝦作為研究對(duì)象,在半純化日糧中添加不同含量的維生素B1,觀察維生素B1對(duì)其生長(zhǎng)性能和生理生化指標(biāo)的影響,確定凡納濱對(duì)蝦對(duì)維生素B1的需要量,為凡納濱對(duì)蝦配合飼料維生素預(yù)混料的配制提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)日糧

以酪蛋白（不含維生素）、明膠、魚(yú)粉作為蛋白源,玉米淀粉作為糖源,魚(yú)油及大豆油作為脂肪源,并補(bǔ)充無(wú)機(jī)鹽、維生素（不含維生素B1）等配制成基礎(chǔ)日糧（表1）。在基礎(chǔ)日糧中分別添加0、20、40、60、80、120、200和400 m g/kg鹽酸硫胺素（購(gòu)自上海伯奧生物科技有限公司）。經(jīng)實(shí)際測(cè)定,8種試驗(yàn)日糧中維生素B1的含量分別為:0.83、19.70、37.40、50.80、65.30、94.20、163.00和323.00 mg/kg。另外,在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上,配制1組不含有魚(yú)粉和維生素的馴養(yǎng)日糧（表1）。原料經(jīng)粉碎過(guò)60目篩,按配方標(biāo)準(zhǔn)稱(chēng)重,均勻混合后,用小型雙螺桿機(jī)擠壓成直徑為1.0 mm的顆粒,于-20℃冰箱中保存,備用。

1.2 試驗(yàn)對(duì)蝦及飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)對(duì)蝦取自廣州蝦苗廠,蝦苗運(yùn)回后,先在養(yǎng)殖系統(tǒng)中培育至0.50 g左右。試驗(yàn)前先在室內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)鹽度為6‰的海水中用不含維生素的馴養(yǎng)日糧馴化暫養(yǎng)1周。試驗(yàn)開(kāi)始時(shí),取體重（0.55± 0.03）g的健康活潑的凡納濱對(duì)蝦蝦苗960尾,隨機(jī)分為8組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)40尾,分別投喂8種不同的試驗(yàn)日糧（分別記作G0.83、G19.7、G37.4、G50.8、G65.3、G94.2、G163、G323）。試驗(yàn)期間每天分別在08:30、14:30和20:00各投喂1次,投喂率為6%～17%（根據(jù)蝦的攝食情況來(lái)調(diào)節(jié)投喂率,并及時(shí)撈出剩餌）。采用循環(huán)過(guò)濾水系統(tǒng),養(yǎng)殖水源為經(jīng)過(guò)活性炭過(guò)濾、消毒、稀釋后的海水,鹽度控制在5.0‰～6.5‰。養(yǎng)殖過(guò)程中不間斷充氧曝氣,溶解氧高于6.0 mg/L,pH保持在7.8～8.2,水溫26.0～31.0℃。每日觀察對(duì)蝦的攝食、游動(dòng)、蛻皮及死亡情況,及時(shí)撈出死蝦。生長(zhǎng)試驗(yàn)的飼養(yǎng)周期為6周。

表1 基礎(chǔ)日糧和馴養(yǎng)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 1 Com position and nutrient leve ls o f basal diet and conditioning diet（air-d ry basis,%）

1.3 樣品采集及前處理

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束時(shí),對(duì)蝦空腹24 h,稱(chēng)終末體重,統(tǒng)計(jì)死亡率。隨機(jī)取5尾蝦,檢測(cè)蝦體水分、粗灰分、粗脂肪和粗蛋白質(zhì)。隨機(jī)取10尾蝦采血并剝離肝胰臟,采血用1m L無(wú)菌注射器自對(duì)蝦頭胸甲后緣圍心竇入針取血,注入Eppendor f管中置于4℃冰箱,24 h后10 000 r/m in離心10m in,取上清液于-80℃冰箱中保存?zhèn)溆?。肝胰臟取出后放入Eppendorf管中置于-80℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 樣品分析

1.4.1 常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分分析

日糧及對(duì)蝦的水分、粗灰分、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量按照國(guó)標(biāo)方法進(jìn)行測(cè)定[13]。

1.4.2 生長(zhǎng)性能計(jì)算

成活率（survival rate,SR,%）=（終末蝦尾數(shù)/初始蝦尾數(shù)）×100;

特定生長(zhǎng)率（specific grow th rate,SGR,%/d）= [（Ln終末平均體重-Ln初始平均體重）/飼養(yǎng)天數(shù)]×100;

飼料效率（feed efficiency,FE,%）=（總體重增加量/總?cè)占Z投喂量）×100。

1.4.3 血清轉(zhuǎn)酮醇酶活性（transketo lase activity, TKA）測(cè)定

血清TKA的測(cè)定采用比色法,參照Warnock等[14]和Brin等[15-16]的方法,略有改動(dòng)。取50μL血清,加入等量0.1 mol/L磷酸緩沖液（pH 7.2）,充分混合后靜置,再加入100μLD-5磷酸核糖（0.012 mol/L）,渦旋充分混合1 m in。然后在37℃下反應(yīng)1 h,再加入100μL 15%三氯乙酸終止反應(yīng)。在4℃下,6 000×g離心10 min,取上清液加入預(yù)先備好的氯化鐵-苔黑酚試劑,在100℃下水浴40 min,然后用UV/V IS可見(jiàn)光分光度計(jì),在580和670 nm處測(cè)定其吸光度。TKA通過(guò)Horeker[17]的方法計(jì)算,血清酶活性單位為μmo l/（h?m L）景天庚酮糖。

1.4.4 日糧中維生素B1測(cè)定

根據(jù)GB/T 5009.197—2003,于中國(guó)廣州分析測(cè)試中心采用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定。稱(chēng)取粉碎過(guò)的日糧樣品2 g左右,精確至0.001 g,加入5m L 0.01mo l/L HCl,再加入20m L蒸餾水,搖勻后,于121℃加壓水解30 m in,冷卻后用蒸餾水定容至50 m L,用0.45μm濾膜過(guò)濾后上機(jī)檢測(cè)。色譜條件,高效液相色譜儀:Agilent H p 1100,紫外檢測(cè)器;色譜柱:U ltim ate column（XB-C18,5μm, 4.6 nm×250 nm）;流動(dòng)相:磷酸鹽溶液（1%）+乙腈（15%）+含離子對(duì)試劑的水溶液（1.776 mg/m L）;流速:1.0m L/m in;檢測(cè)器:紫外波長(zhǎng)280 nm;柱溫: 35℃。

1.4.5 肝胰臟中淀粉酶活性和肝胰臟勻漿上清液總蛋白測(cè)定

肝胰臟中的淀粉酶活性采用碘-淀粉比色法測(cè)定,肝胰臟勻漿上清液總蛋白采用考馬斯亮蘭法測(cè)定,方法均參照南京建成生物工程研究所試劑盒測(cè)定說(shuō)明書(shū)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（mean±SE）表示。數(shù)據(jù)分析采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件,經(jīng)方差分析有顯著差異后再做組間Duncan氏多重比較,顯著水平P為0.05。通過(guò)折線模型[18]確定維生素B1的最適需要量。模型的方程為Y=L+U（R-XLR）,其中Y是用于估計(jì)需要量的指標(biāo),R、L為折點(diǎn)的坐標(biāo)（R,L）,R為要計(jì)算的需要量,XLR是小于R的自變量（X）值,U是直線的斜率;當(dāng)X＞R時(shí),定義（R-XLR）=0。

2 結(jié) 果

2.1 日糧中不同維生素B1含量對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能、飼料效率和存活率的影響

各組凡納濱對(duì)蝦的終末平均體重、特定生長(zhǎng)率、飼料效率和存活率見(jiàn)表2。凡納濱對(duì)蝦的終末平均體重、特定生長(zhǎng)率、飼料效率在未添加組（0.83 mg/kg）最低,顯著低于其他各維生素B1添加組（P＜0.05）,而其他各組間差異不顯著（P＞0.05）。未添加組（0.83 mg/kg）的存活率最低,顯著低于19.70、37.40、50.80和323.00 mg/kg添加組（P＜0.05）,與其他組間差異不顯著（P＞0.05）。以凡納濱對(duì)蝦特定生長(zhǎng)率為評(píng)價(jià)指標(biāo),通過(guò)折線模型分析了凡納濱對(duì)蝦的維生素B1需要量（圖1）。結(jié)果顯示,特定生長(zhǎng)率（Y）與日糧維生素B1含量（X）回歸方程為:Y=3.73-0.028 1×（23.9-X）（R2=0.81）,得到凡納濱對(duì)蝦維生素B1需要量為23.90 m g/kg日糧。

2.2 日糧中不同維生素B1含量對(duì)凡納濱對(duì)蝦體成分的影響

飼養(yǎng)42 d后,凡納濱對(duì)蝦的體成分見(jiàn)表3。各組凡納濱對(duì)蝦的體水分含量之間差異不顯著（P＞ 0.05）;粗蛋白質(zhì)、粗灰分和粗脂肪含量以未添加組（0.83mg/kg）最低,各添加組有不同程度的提高,但各組間差異未達(dá)到顯著水平（P＞0.05）。

表2 日糧中維生素B1含量對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能、存活率及飼料效率的影響Table 2 Ef fec ts of dietary thiam in content on grow th performance,survival rate and feed efficiency of the Litopenaeus vannamei（n=3）

表3 日糧中維生素B1含量對(duì)凡納濱對(duì)蝦體成分的影響Tab le 3 Ef fects o f dietary thiam in content on body composition of the Litopenaeus vannamei（n=3,%）

2.3 日糧中不同維生素B1含量對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清TKA和肝胰臟淀粉酶活性的影響

由表4可見(jiàn),半純化日糧中添加50.80 m g/kg維生素B1組的血清TKA最高,顯著高于未添加（0.83m g/kg）組（P＜0.05）,與其他添加組間差異不顯著（P＞0.05）。凡納濱對(duì)蝦肝胰臟淀粉酶活性在未添加組（0.83m g/kg）最低,65.30 mg/kg添加組最高,比未添加組高14.24%,但各組間差異不顯著（P＞0.05）。以凡納濱對(duì)蝦血清TKA為評(píng)價(jià)指標(biāo),通過(guò)折線模型分析了凡納濱對(duì)蝦的維生素B1需要量（圖2）。結(jié)果顯示,血清的TKA（Y）與日糧維生素B1含量（X）回歸方程為:Y=30.75-0.682 6 （23.7-X）（R2=0.97）,得到凡納濱對(duì)蝦維生素B1需要量為23.70mg/kg日糧。

通過(guò)6周的飼養(yǎng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)日糧中維生素B1的缺乏導(dǎo)致了凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能的下降。除此之外,沒(méi)有發(fā)現(xiàn)其他明顯的缺乏癥狀。

3 討 論

3.1 凡納濱對(duì)蝦維生素B1需要量的確定與分析

維生素B1是水生動(dòng)物機(jī)體維持正常生長(zhǎng)和健康所必需的水溶性維生素之一。到目前為止,國(guó)內(nèi)外關(guān)于水生動(dòng)物的維生素B1需要量已有不少報(bào)道。在魚(yú)類(lèi)方面,Morito等[6]以生長(zhǎng)、存活以及組織的TKA為指標(biāo),得到虹鱒對(duì)維生素B1的需要量為1mg/kg日糧。M urai等[7]研究發(fā)現(xiàn)斑點(diǎn)叉尾鮰獲得最佳生長(zhǎng)和預(yù)防缺乏癥的維生素B1需要量為1mg/kg日糧。Cowey等[8]研究表明大菱鲆獲得最佳生長(zhǎng)的維生素B1需要量為0.6～2.6 mg/kg。Aoe等[9]認(rèn)為鯉魚(yú)的維生素B1需要量為0.5m g/kg。趙智勇[3]以生長(zhǎng)、餌料系數(shù)以及肝臟維生素B1含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)得到草魚(yú)維生素B1需要量分別為1.19、1.16和4.49 mg/kg日糧。李?lèi)?ài)杰等[5]指出牙鲆的維生素B1需要量為18.2 mg/kg日糧。在軟體類(lèi)方面,Zhu等[2]以生長(zhǎng)、肝臟TPP含量以及TPP效應(yīng)為評(píng)價(jià)指標(biāo),得到皺紋盤(pán)鮑的維生素B1需要量分別為51、61和58 m g/kg日糧。在甲殼類(lèi)方面, Deshimaru等[10]以生長(zhǎng)性能和蝦體維生素B1含量為評(píng)價(jià)指標(biāo),得到日本對(duì)蝦維生素B1的適宜添加量分別為60和120 mg/kg日糧。徐志昌等[11]研究發(fā)現(xiàn),日糧中含60 mg/kg的維生素B1時(shí),中國(guó)對(duì)蝦的增長(zhǎng)率、存活率、淀粉酶活力以及組織中的維生素B1含量最高,維生素B1過(guò)量或者缺乏均會(huì)降低組織維生素B1含量,阻礙對(duì)蝦的生長(zhǎng)和代謝。Chen等[12]以生長(zhǎng)、存活率以及血淋巴的維生素B1含量為評(píng)價(jià)指標(biāo),得到斑節(jié)對(duì)蝦維生素B1需要量為13～14 m g/kg日糧。由以上報(bào)道可見(jiàn),魚(yú)類(lèi)的維生素B1需要量在0.5～20.0m g/kg之間,軟體類(lèi)鮑魚(yú)的維生素B1需要量在51～61 mg/kg之間,蝦類(lèi)的維生素B1需要量在13～120m g/kg之間。

表4 日糧中維生素B1含量對(duì)凡納濱對(duì)蝦的血清TKA和肝胰臟淀粉酶活性的影響Table 4 Ef fec ts o f dietary thiam in content on serum TKA and ac tivity of hepatopancreatic amy lase o f the Litopenaeus vannamei（n=3）

本試驗(yàn)中添加維生素B1能顯著提高凡納濱對(duì)蝦的特定生長(zhǎng)率和飼料效率,這與Chen等[12]在斑節(jié)對(duì)蝦的研究中所得結(jié)果相似,表明日糧中添加適量的維生素B1能顯著促進(jìn)凡納濱對(duì)蝦的生長(zhǎng)。而未添加組,可能是由于缺乏維生素B1而導(dǎo)致凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)糖代謝受阻,抑制了糖類(lèi)正常的氧化供能以及體內(nèi)脂肪的合成,導(dǎo)致體內(nèi)蛋白質(zhì)的消耗供能,從而最終導(dǎo)致對(duì)蝦的生長(zhǎng)緩慢。本試驗(yàn)中以特定生長(zhǎng)率為評(píng)價(jià)指標(biāo),通過(guò)折線回歸分析得到維生素B1的需要量為23.90mg/kg日糧。這一結(jié)果比已報(bào)道的魚(yú)類(lèi)維生素B1需要量（0.5～20.0 mg/kg日糧）要高,比皺紋盤(pán)鮑的維生素B1需要量（51～61mg/kg日糧）要低,在已報(bào)道的蝦類(lèi)維生素B1需要量（13～120mg/kg日糧）范圍之內(nèi)。不同種類(lèi)的水生動(dòng)物維生素B1需要量明顯不同,與魚(yú)類(lèi)不同,水生甲殼綱動(dòng)物由于其抱食、采食緩慢的攝食食性,日糧從投喂到完全采食,在水中浸泡的時(shí)間比較長(zhǎng),飼喂期間蝦對(duì)日糧顆粒的選擇將進(jìn)一步加劇養(yǎng)分的溶失,包括水溶性維生素如維生素B1,因此甲殼綱動(dòng)物維生素B1的需要量比魚(yú)類(lèi)高[12]。在甲殼類(lèi)中,維生素B1與糖代謝有密切的關(guān)系,因此,蝦類(lèi)對(duì)維生素B1的需要量會(huì)因日糧中的碳水化合物的水平而變化[10]。Goldsm ith[19]認(rèn)為,維生素B1作為碳水化合物代謝中丙酮酸氧化脫羧和戊糖磷酸途徑的轉(zhuǎn)羥乙醛酶反應(yīng)中的一種輔酶,當(dāng)飼喂高碳水化合物時(shí)陸生動(dòng)物的維生素B1需要量升高。本試驗(yàn)中所用碳水化合物水平為23%,較斑節(jié)對(duì)蝦的20%[12]和日本對(duì)蝦的5%[10]要高,但是本試驗(yàn)得到凡納濱對(duì)蝦的維生素B1需要量（23.90 mg/kg日糧）,卻比斑節(jié)對(duì)蝦的（13～14 mg/kg日糧）[12]要高,比日本對(duì)蝦的（60和120 mg/kg日糧）[10]要低。另外,試驗(yàn)種苗、試驗(yàn)日糧的組成、試驗(yàn)條件以及評(píng)定指標(biāo)的不同都會(huì)造成所測(cè)營(yíng)養(yǎng)需要量的差異。

在以往有關(guān)人類(lèi)和老鼠的研究中表明,組織和（或）血清的TKA是發(fā)現(xiàn)維生素B1缺乏和評(píng)價(jià)機(jī)體維生素B1營(yíng)養(yǎng)狀況的敏感指標(biāo)[15-16,20-21]。在魚(yú)類(lèi)及軟體類(lèi)方面,Cowey等[8]用血淋巴的TKA來(lái)評(píng)價(jià)大菱鲆的維生素B1需要量。M orito等[6]以腎臟和肝臟的TKA為指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)虹鱒的維生素B1需要量,并指出伴隨著缺乏癥的出現(xiàn),TKA也出現(xiàn)明顯的變化,因此他認(rèn)為T(mén)KA是虹鱒機(jī)體維生素B1狀況的較敏感指標(biāo)。而在甲殼類(lèi)方面,Chen等[22]以肌肉、血淋巴和肝中TKA來(lái)評(píng)估斑節(jié)對(duì)蝦的維生素B1營(yíng)養(yǎng)狀況。本試驗(yàn)中,半純化日糧中添加適量的維生素B1能顯著提高凡納濱對(duì)蝦血清的TKA。這一結(jié)果與皺紋盤(pán)鮑[2]、斑節(jié)對(duì)蝦[22],虹鱒[6]等研究結(jié)果相似。本試驗(yàn)以血清TKA為指標(biāo)得到凡納濱對(duì)蝦維生素B1需要量（23.70mg/kg日糧）與以生長(zhǎng)性能為指標(biāo)得到的需要量（23.90 mg/kg日糧）相近,因此筆者認(rèn)為生長(zhǎng)性能指標(biāo)和血清TKA是評(píng)價(jià)凡納濱對(duì)蝦維生素B1營(yíng)養(yǎng)需要狀況的合適指標(biāo)。在本試驗(yàn)條件下,滿足凡納濱對(duì)蝦最佳生長(zhǎng)所需要的維生素B1的量為24.00 mg/kg日糧。本試驗(yàn)中,對(duì)蝦血清TKA是根據(jù)Warnock等[14]和Brin等[15-16]方法測(cè)定的,該方法通過(guò)人為添加TPP到缺乏硫胺素的血清中,刺激血清中的轉(zhuǎn)酮醇酶由無(wú)活性變?yōu)橛谢钚?其原理可用來(lái)評(píng)價(jià)機(jī)體硫胺素的營(yíng)養(yǎng)狀況。該方法的靈敏性、可靠性以及測(cè)定過(guò)程中酶的穩(wěn)定性已由始創(chuàng)者反復(fù)驗(yàn)證,并應(yīng)用于臨床研究。該方法也多次應(yīng)用于水產(chǎn)研究, Zhu等[2]關(guān)于皺紋盤(pán)鮑、Cowey等[8]關(guān)于大菱鲆和Masumoto等[23]關(guān)于虹鱒的研究中都應(yīng)用了該法。據(jù)此,說(shuō)明該方法在測(cè)定過(guò)程中酶活穩(wěn)定,可靠性高。

3.2 日糧中不同維生素B1含量對(duì)凡納濱對(duì)蝦體成分和肝胰臟淀粉酶活性的影響

對(duì)蝦攝食維生素B1后,在肝胰臟中將硫胺素磷酸化而轉(zhuǎn)變成為活性的輔酶,即焦磷酸硫胺素（輔羧酶TPP）。從而參與糖代謝過(guò)程中α-酮酸（如丙酮酸、α-酮戊二酸）的氧化脫羧反應(yīng),此反應(yīng)是體內(nèi)代謝的中間步驟,作為輔羧酶促進(jìn)糖類(lèi)代謝,并為糖異生、蛋白質(zhì)合成、三羧酸循環(huán)等代謝途徑提供部分原料,提供維持機(jī)體正常生長(zhǎng)和發(fā)育的能量及物質(zhì)需要[24]。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),半純化日糧中添加維生素B1能提高凡納濱對(duì)蝦肝胰臟淀粉酶活性,在添加量為50.80m g/kg時(shí),淀粉酶活性達(dá)到最大值,但各組間差異不顯著。與此相似,許實(shí)榮等[24]關(guān)于中國(guó)對(duì)蝦的研究發(fā)現(xiàn),日糧中添加60 mg/kg的維生素B1能明顯提高中國(guó)對(duì)蝦肝胰臟的淀粉酶活性,日糧中不足或過(guò)多的維生素B1都會(huì)降低肝胰臟淀粉酶的活性。徐志昌等[11]研究發(fā)現(xiàn),日糧中含有60 mg/kg的維生素B1時(shí),中國(guó)對(duì)蝦肝胰臟的淀粉酶活性最大。這表明,日糧中添加適量的維生素B1能提高凡納濱對(duì)蝦淀粉酶活力,促進(jìn)糖代謝,使對(duì)蝦能更好地利用日糧中的糖源。

本試驗(yàn)中,添加維生素B1對(duì)凡納濱對(duì)蝦體粗蛋白質(zhì)、粗脂肪以及粗灰分含量均無(wú)顯著影響,但有增高趨勢(shì),而且未添加維生素B1組的飼料效率顯著低于添加組,這可能由于維生素B1的缺乏抑制了糖類(lèi)的代謝,減少糖酵解過(guò)程所供給蛋白質(zhì)和脂類(lèi)合成的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),最終降低了凡納濱對(duì)蝦對(duì)體內(nèi)蛋白質(zhì)和脂類(lèi)的吸收利用,同時(shí)也減少了其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如鈣、磷等的沉積[3]。

3.3 凡納濱對(duì)蝦維生素B1缺乏癥

在魚(yú)類(lèi)的研究中發(fā)現(xiàn),維生素B1缺乏會(huì)引起魚(yú)類(lèi)厭食、生長(zhǎng)緩慢、出血、神經(jīng)過(guò)敏、不正常抽搐、體色變暗、肌肉萎縮、失去平衡感和運(yùn)動(dòng)失調(diào)等癥狀[6-7,25-26]。而本試驗(yàn)中,經(jīng)過(guò)6周的養(yǎng)殖,飼喂未添加維生素B1（0.83 m g/kg日糧）組日糧的凡納濱對(duì)蝦除生長(zhǎng)緩慢之外,并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)明顯的缺乏癥狀,這一結(jié)果與大菱鲆[8]、斑節(jié)對(duì)蝦[12]以及皺紋盤(pán)鮑[2]的研究相似。Cowey等[8]和Chen等[12]認(rèn)為底棲生活的魚(yú)類(lèi)和蝦類(lèi)長(zhǎng)時(shí)間靜置水底,不易出現(xiàn)像自由游動(dòng)的魚(yú)類(lèi)所出現(xiàn)的典型缺乏癥狀,這個(gè)解釋也適用于底棲生活的凡納濱對(duì)蝦,而且由于蝦的外殼的包圍,也妨礙了對(duì)蝦缺乏癥狀的觀察。另外,也可能是由于未添加組中含有的0.83 m g/kg維生素B1或?qū)ξr胃腸道合成的維生素B1足以阻止機(jī)體出現(xiàn)明顯的缺乏癥狀。

4 結(jié) 論

①半純化日糧中添加適量的維生素B1能顯著提高凡納濱對(duì)蝦的生長(zhǎng)性能和飼料效率,顯著提高血清的TKA。

②本試驗(yàn)條件下,生長(zhǎng)性能和血清TKA是評(píng)價(jià)凡納濱對(duì)蝦維生素B1營(yíng)養(yǎng)需要狀況的合適指標(biāo),以上述兩者為評(píng)價(jià)指標(biāo),分析得到凡納濱對(duì)蝦維生素B1需要量分別為23.90和23.70mg/kg日糧。

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（編輯 李一航）