復(fù)方七芍降壓片對SHR血壓及GPⅡb/Ⅲa的影響1)

范建民,唐 瑩,譚勝真,譚元生

在高血壓病的發(fā)病、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸過程中,均有不同程度的血瘀表現(xiàn),且隨著病情進展,血瘀的程度越發(fā)嚴重?，F(xiàn)代臨床及基礎(chǔ)研究表明,瘀血是高血壓病患者常見的病理產(chǎn)物和致病因素,血瘀證在高血壓病患者中具有普遍性。通過多年的臨床研究認為:高血壓病患者從中醫(yī)論治,以肝腎虧虛、瘀血痹阻證者尤其多見。復(fù)方七芍降壓片在臨床應(yīng)用中降壓效果明顯,與其補益肝腎、活血化瘀之效密不可分。因此,本研究試圖通過血小板激活在動脈血栓形成機制中的中心作用來進一步探討復(fù)方七芍降壓片的可能作用機制,為原發(fā)性高血壓的預(yù)防、診斷和治療提供客觀、有效的實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 14周齡自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)60只,體重(206.0±17.5)g,健康雄性;14周齡 WKY大鼠12只,體重(213.0±19.4)g,健康雄性;均由上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司提供。

1.1.2 藥物 復(fù)方七芍降壓片,湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥劑科制備;卡托普利片:每片25 mg,湖南湘雅制藥有限公司生產(chǎn),批號:0809106;硫酸氫氯吡格雷片:每片25 mg,深圳信立泰藥業(yè)有限公司生產(chǎn),批號:0810112。

1.2 方法

1.2.1 分組 將60只SHR隨機分為5組,即復(fù)方七芍降壓片高劑量組[42.12 g生藥/(kg?d)]、復(fù)方七芍降壓片中劑量組[21.06 g生藥/(kg?d)]、復(fù)方七芍降壓片低劑量組[10.53 g生藥/(kg?d)]、卡托普利組[13.5 mg/(kg?d)]、硫酸氫氯吡格雷片組[13.5 mg/(kg?d)];12只WKY大鼠為空白組。

1.2.2 給藥方法 灌胃給藥,給藥體積為2 mL/100 g體重,空白組給予相同體積的蒸餾水灌胃。每天灌胃1次,連續(xù)4周。

1.2.3 血壓測定 溫度控制在18℃～22℃;濕度控制在55%～70%;室內(nèi)自然光線。應(yīng)用尾袖法連接小動物血壓儀和MP150十六導(dǎo)生理記錄儀測量大鼠血壓。測量前將大鼠固定在錐形白布袋中,放入37℃±1℃電熱加溫箱內(nèi)預(yù)熱10 min后置于測壓臺上測壓。待MP150十六導(dǎo)生理記錄儀的記錄系統(tǒng)出現(xiàn)規(guī)律的脈搏波后,將血壓儀加壓至圖像上脈搏波振幅為0,再加壓升高30 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),緩慢放氣后再次看到規(guī)律性振幅時血壓計數(shù)既為收縮壓。大鼠安靜狀態(tài)下測量3次,取其均值作為該樣本的血壓。

1.2.4 GPⅡb/Ⅲa測定 用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法測定血小板GPⅡb/Ⅲa的含量[1]:結(jié)果以每個血小板表面結(jié)合的單克隆抗體分子數(shù)表示(104/plt)。藥盒由蘇州大學(xué)血液研究所提供,批號:080601。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 11.5軟件進行統(tǒng)計分析,計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示,采用方差分析和t檢驗。

2 結(jié) 果

2.1 復(fù)方七芍降壓片對SHR血壓的影響 給藥4周后,復(fù)方七芍降壓片低劑量、中劑量、高劑量組及卡托普利組血壓均有不同程度降低(P＜0.05),其中復(fù)方七芍降壓片高劑量組療效顯著;硫酸氫氯吡格雷片組及空白組血壓差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。詳見表1。

表1 各組大鼠給藥前后血壓比較(±s) mmHg

表1 各組大鼠給藥前后血壓比較(±s) mmHg

組別 n 給藥前 給藥后復(fù)方七芍降壓片高劑量組 12 187.6±24.2 140.6±19.41)復(fù)方七芍降壓片中劑量組 12 180.5±27.9 156.1±17.71)復(fù)方七芍降壓片低劑量組 12 190.4±28.3 160.3±22.51)卡托普利組 12 188.8±23.5 157.2±18.41)硫酸氫氯吡格雷片組 12 191.1±18.4 188.6±19.2空白組 12 112.6±10.1 116.6±9.7與同組給藥前比較,1)P＜0.05

2.2 復(fù)方七芍降壓片對 GPⅡb/Ⅲa的影響 給藥 4周后,復(fù)方七芍降壓片低、中、高劑量組及硫酸氫氯吡格雷片組GPⅡb/Ⅲa均有不同程度降低(P＜0.05),其中硫酸氫氯吡格雷片組療效顯著;卡托普利組及空白組GPⅡb/Ⅲa無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。詳見表2。

表2 各組大鼠給藥前后GPⅡb/Ⅲa比較(±s)

表2 各組大鼠給藥前后GPⅡb/Ⅲa比較(±s)

組別 n GPⅡb(104/plt)給藥前 給藥后GPⅢa(104/plt)給藥前 給藥后復(fù)方七芍降壓片高劑量組 12 16.6±5.1 8.4±1.91) 14.4±2.1 6.1±1.11)復(fù)方七芍降壓片中劑量組 12 15.3±4.8 8.7±2.01) 14.3±2.8 5.7±1.51)復(fù)方七芍降壓片低劑量組 12 15.7±3.9 7.9±2.11) 14.9±3.3 6.2±1.61)卡托普利組 12 16.2±4.4 15.7±5.1 15.2±4.0 15.4±4.4硫酸氫氯吡格雷片組 12 15.9±5.1 4.7±1.11) 15.0±3.1 2.7±0.51)空白組 12 15.5±4.6 16.2±4.9 14.5±2.6 13.9±2.7與同組給藥前比較,1)P＜0.05

3 討 論

高血壓病歸屬中醫(yī)“眩暈”“頭痛”“風(fēng)?！狈懂?其病位在絡(luò)脈,陰虛陽亢是其基本病機,瘀血貫穿于高血壓病的整個病程中,因此臨床治療高血壓病時應(yīng)緊扣陰虛、陽亢、瘀血這三個病理環(huán)節(jié)[2]。高血壓病患者若火甚耗氣傷陰,氣陰(血)不足,血脈凝澀或瘀,或痰濕遏阻,氣機失暢,致痰瘀阻絡(luò);若久病體衰,肝腎陰虛,或陰陽俱損,氣血失和,或血行不暢,因虛致瘀。故不論病機屬虛屬實均可導(dǎo)致脈絡(luò)瘀滯,即“久病必虛,久病必瘀”。

復(fù)方七芍降壓片是根據(jù)高血壓病肝腎陰虛、瘀血阻絡(luò)的病理特點,經(jīng)過多年的臨床實踐研制的有效驗方。方中三七活血化瘀,有化瘀而不傷正的特點,白芍斂陰柔肝,兩者共為君藥;桑寄生補肝腎,養(yǎng)血活血,輔白芍補肝腎之虧損,用為臣藥;地龍清熱平肝熄風(fēng)消瘀滯,丹參活血化瘀兼清虛煩,能祛瘀生新不傷正,共輔三七活血化瘀,通絡(luò)除滯,亦為臣藥;天麻息風(fēng)止痙、平抑肝陽,杜仲益肝陰、潤肝燥,羅布麻善清肝熱、平抑肝陽;葛根生津活血,炒香附疏肝解郁、調(diào)暢氣血,共為佐藥;甘草為使,緩和藥性,調(diào)和諸藥。

GPⅡb/Ⅲa是血小板聚集的一個關(guān)鍵因子,是各種血小板激活劑如腎上腺素、凝血酶等所產(chǎn)生的激活信號的最后共同傳導(dǎo)通路[3]。血小板聚集的最后階段是纖維蛋白原與激活的血小板結(jié)合,完全靠GPⅡb/Ⅲa受體調(diào)節(jié)[4]。血小板活化是許多疾病的發(fā)病機制之一[5]。GPⅡb/Ⅲa在血小板的黏附聚集和釋放反應(yīng)中起到重要的作用,其與纖維蛋白原結(jié)合是多種因素引起血小板聚集的最終途徑[6]。GPⅡb/Ⅲa升高是其黏附和聚集功能增強的重要標志,是形成血栓的最關(guān)鍵因素之一,同時可直接反映血小板活化狀態(tài)[7]。研究表明[8]糖尿病患者存在血小板活化、GPⅡb/Ⅲa表達增高,且其在糖尿病血管病變的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。

因此,認為復(fù)方七芍降壓片能較好控制高血壓病患者的血壓水平,與卡托普利片療效相當;能明顯降低GPⅡb/Ⅲa水平,其作用機制可能與復(fù)方七芍降壓片調(diào)動血小板激活在動脈血栓形成機制中的中心作用有關(guān)。

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