嘧菌酯殘留量的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定研究

陳 濤 劉永波 崔 磊

（青島市排水管理處，山東 青島 266071）

嘧菌酯又名腈嘧菌酯，原藥為棕色固體，M.P.114 116℃。純品為白色結(jié)晶固體，M.P.116℃。相對(duì)密度 1.34，蒸汽壓 1.1 ×10-7mPa（20℃）。水中溶解度 6mg/L（20℃），微溶于己烷、正辛醇，溶于甲醇、甲苯、丙酮，易溶于乙酸乙酯、乙腈、二氯甲烷。水溶液中光解半衰期為2 周，對(duì)水解穩(wěn)定。嘧菌酯是一種甲氧基丙烯酸酯類(lèi)殺菌劑，高效、廣譜，對(duì)幾乎所有的真菌綱害如白粉病、銹病、穎枯病等均有良好的活性?？捎糜谇o葉噴霧、種子處理，也可進(jìn)行土壤處理，主要用于谷物、水稻、花生、葡萄、馬鈴薯、果樹(shù)、蔬菜、咖啡、草坪等。中國(guó)進(jìn)出口檢驗(yàn)檢疫標(biāo)準(zhǔn)SN/T1976-2007 規(guī)定了用氣相色譜法檢測(cè)嘧菌酯殘留。文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)嘧菌酯殘留量的檢驗(yàn)主要有氣相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用法、液相色譜法、液-質(zhì)聯(lián)用法，但氣相色譜法測(cè)定易受基質(zhì)干擾，造成假陽(yáng)性；液相色譜法前處理過(guò)程復(fù)雜，成本較高，亦存在像氣相色譜法類(lèi)似的問(wèn)題。國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)用氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)蔬菜、水果中嘧菌酯殘留的文獻(xiàn)報(bào)道。本文研究建立了氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定蔬菜、水果中嘧菌酯殘留量的分析方法，操作簡(jiǎn)便，定性準(zhǔn)確，回收率高，重現(xiàn)性好。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

氣-質(zhì)聯(lián)機(jī)Agilent 6890GC/5973MSD；均質(zhì)器 IKA T18 basic；固相萃取柱：Cleanert Pesticarb-SPE 1000mg 6mL，Cleanert Florisil-SPE 1000mg 6mL；氮吹儀；六孔水浴鍋；離心機(jī)TDL-40B-W 型；超聲清洗器 SBS5200；食品加工器；電子天平；濾膜：0.22μm，有機(jī)相；

乙腈、丙酮、二氯甲烷、正己烷烷均為色譜純?cè)噭ǖ聡?guó)Merck 公司）；

無(wú)水硫酸鎂（AR），550℃～600℃烘4 h，存放于干燥器中；氯化鈉（AR），350℃烘 6 h，存放于干燥器中。

嘧菌酯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)購(gòu)自Sigma-Aldrich 公司（純度99.3%）。

1.2 儀器分析條件

1.2.1 GC條件

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色譜柱：DB-35ms 毛細(xì)管色譜柱（30.0m ×0.25mm i.d.× 0.25μm）；載氣：He（99.999%）；流速：1.0 mL ·min-1；進(jìn)樣口溫度：280℃；進(jìn)樣方式：脈沖不分流進(jìn)樣，20 psi，1.0 min；柱溫：200℃ 25℃·min-1290℃ （hold 20.00 min）,Post run：295℃，5.4 min；Total：29.0 min；進(jìn)樣量：1.0μL；嘧菌酯保留時(shí)間：19.44 min。

1.2.2 MS條件

離子源：EI(70eV)；離子源溫度：230℃；四極桿溫度：150℃；接口溫度：295℃；EM 電壓：1812 V；采集方式：SIM；溶劑延遲：5.0 min；調(diào)諧方式：自動(dòng)調(diào)諧。

1.3 樣品處理

準(zhǔn)確稱取15.00 g 在食品加工器中加工好的樣品于100 mL 聚四氟乙烯離心管中（事先加入3 g～4.5 g 氯化鈉），加入30.0 mL 乙腈，在均質(zhì)器中高速均質(zhì)2.0 min。將均質(zhì)好的樣品罐放入離心機(jī)中，4000r/min 離心10min，離心完畢后，吸取乙腈相過(guò)一鋪有濾紙的玻璃漏斗(濾紙上放3g～5g 無(wú)水硫酸鎂)。準(zhǔn)確量取10 mL 乙腈相溶液，放入25 mL 燒杯中，80℃水浴上用蒸汽加熱，杯內(nèi)緩緩?fù)ㄈ氲獨(dú)饬鞔祫?dòng)，蒸發(fā)近干，加入2.0 mL 二氯甲烷。將Florisil 固相萃取柱和Pesticarb 固相萃取柱串聯(lián)，將二氯甲烷溶解的樣品加到已條件化的固相萃取柱上，過(guò)柱凈化，收集洗脫液放在氮吹儀上（水浴溫度60℃），緩緩蒸發(fā)至近干，用二氯甲烷準(zhǔn)確定容至2.0 mL，過(guò)0.22μm 濾膜，樣品進(jìn)GC-MS 分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 固相萃取柱使用的優(yōu)點(diǎn)

固相萃取柱的使用克服了液-液萃取及一般柱層洗的缺點(diǎn)，使萃取、凈化一步完成，而將Florisil 固相萃取柱和Pesticarb 固相萃取柱串聯(lián)使用，則有效地消除了基質(zhì)干擾和色素帶來(lái)假陽(yáng)性的影響，而且節(jié)省有機(jī)溶劑，最大限度地減少大量使用有機(jī)溶劑對(duì)環(huán)境造成的二次污染。

2.2 定性及定量離子的選擇

定量及定性離子的選擇應(yīng)考慮以下幾點(diǎn)：特征性高、質(zhì)量數(shù)高、對(duì)稱性高且重現(xiàn)性好、與柱流失碎片離子不同。鑒于以上條件，本方法選擇 m/z344、m/z345、m/z372、m/z403 作為嘧菌酯的SIM 離子。其中m/z344 為定量離子，其余三個(gè)為定性離子。

2.3 檢出限（LOD）的確定

檢出限是衡量?jī)x器或方法靈敏度的指標(biāo)。它應(yīng)低于目標(biāo)化合物的最大殘留限量（MRL）值，最好低一個(gè)數(shù)量級(jí)。最低檢出限（LOD）是在色譜圖上可清楚確認(rèn)的分析目的物色譜峰的下限。通常為噪音的3 倍（S/N=3）。本方法中嘧菌酯的最低檢出限為：0.0016mg ·kg-1。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

準(zhǔn)確稱取嘧菌酯標(biāo)準(zhǔn)品50.00mg，轉(zhuǎn)入10mL 容量瓶，用二氯甲烷定容至刻度線作為母液，于冰箱內(nèi)保存。將母液用二氯甲烷稀釋配成0.1，0.5，1.0，2.0，5.0μg ·mL-1 系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。取系列濃度的嘧菌酯標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0μL 進(jìn)樣測(cè)定。以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。嘧菌酯的標(biāo)準(zhǔn)回歸方程為：Y（Response）=2.68 ×105X(Amt)－1.45 ×103,r=0.9999。

2.5 精密度和準(zhǔn)確度

向不同基質(zhì)樣品如香蔥、油菜、草莓、蘋(píng)果中分別添加 0.1μg ·mL-1～1.0μg ·mL-1的嘧菌酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，六次平行測(cè)定，平均回收率為88.0%～105.0%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)<5.0%，符合農(nóng)殘分析要求。表1為香蔥中添加嘧菌酯標(biāo)樣的回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

3 結(jié)論

該方法已成功運(yùn)用到本實(shí)驗(yàn)室中多種蔬菜、水果樣品的測(cè)定，與傳統(tǒng)的氣相色譜法和高效液相色譜法相比，具有快速方便，回收率和靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，采用選擇離子方式（SIM）有效地消除了基質(zhì)干擾帶來(lái)的假陽(yáng)性，適用于接收樣品的常規(guī)實(shí)驗(yàn)室分析。

[1]農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所.農(nóng)藥殘留量實(shí)用檢測(cè)方法手冊(cè).第三卷[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)科技出版社，2005.

[2]SN/T1976-2007 進(jìn)出口水果和蔬菜中嘧菌酯殘留量的檢測(cè)方法-氣相色譜法 [S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2007.

[3]JAP-076 腈嘧菌酯檢測(cè)方法[S].