王麗彥

(長春市食品藥品檢驗所,吉林 長春 130012)

*王麗彥，E-mail：wgb654321@yahoo.cn

HPLC測定抗骨增生片中淫羊藿苷的含量

王麗彥*

(長春市食品藥品檢驗所,吉林 長春130012)

目的建立高效相液色譜法測定抗骨增生片中淫羊藿苷的含量。方法采用十八烷基鍵合硅膠為填充劑色譜柱(4.6mm×150mm，5μm)，以乙腈-水(25∶75)為流動相，檢測波長為270nm。結果淫羊藿苷的回歸方程為Y=1490.44X-12.4236(r=1.0000)，線性關系良好；平均回收率為99.5%。結論該方法操作簡便，結果準確，可用于抗骨增生片中淫羊藿苷的含量測定。

抗骨增生片；淫羊藿苷；高效液相色譜法

抗骨增生片收載于《衛(wèi)生部藥品標準·中藥成方制劑》第七冊中，由熟地黃、鹿銜草、骨碎補(燙)、雞血藤、肉蓯蓉、淫羊藿、萊菔子7味藥組成。具有補腎，活血，止痛的功能。用于肥大性脊椎炎，頸椎病，跟骨刺，增生性關節(jié)炎，大骨節(jié)病。原標準中無定性、定量分析項目，不能有效控制成藥質量。本實驗建立高效液相色譜法測定抗骨增生片中淫羊藿苷的含量，結果表明方法專屬性較強，能夠有效地控制抗骨增生片的質量。

1 儀器與試藥

1.1儀器

HP1100高效液相色譜儀(美國安捷倫公司)，Agilent-C18色譜柱(4.6mm×150mm，5μm)，GR-202電子天平。

1.2試藥

淫羊藿苷對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號110737-200312，供含量測定用)?？构窃錾?吉林省羅邦藥業(yè)有限公司，批號見表2，含淫羊藿0.67mg/片),乙腈為色譜純。

2 方法[1]與結果

2.1色譜條件

流動相：乙腈-水(25∶75)；流速：1.0mL·min-1；進樣量：10μL；柱溫：25℃；檢測波長：270nm；理論板數按淫羊藿苷峰計算應不低于1500。

2.2對照品溶液的制備

精密稱取淫羊藿苷對照品適量，加甲醇溶解，制成1mL含淫羊藿苷0.04mg的溶液，即得。

2.3供試品溶液的制備

取本品20片，除去糖衣，研細，取約3g，精密稱定，置100mL量瓶中，加稀乙醇超聲處理1h，放冷至室溫加稀乙醇稀釋至刻度，濾過，取濾液即得。

2.4陰性對照溶液的制備

取按處方比例制成除去淫羊藿的陰性對照樣品，按供試品溶液的制備方法制成陰性對照溶液。

2.5系統(tǒng)適應性試驗

分別吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液各10μL，注入色譜儀，同法測定，結果在淫羊藿苷峰相應位置上，陰性對照無干擾，結果見圖1～3。

圖1 淫羊藿苷對照品HPLC圖

圖2 抗骨增生片HPLC圖

圖3 缺淫羊藿的陰性對照HPLC圖

2.6線性關系

精密量取淫羊藿苷對照品溶液2，5，10，15，20，50μL注入色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積Y對進樣量X(μg)進行線性回歸，得淫羊藿苷回歸方程Y=1490.44X-12.4236，r=1.0000，結果表明淫羊藿苷在0.08～2μg線性關系良好。

2.7精密度試驗

取同一對照品溶液，連續(xù)進樣6次，測得淫羊藿苷峰面積的RSD=0.4%，表明精密度良好。

2.8重現性試驗

取樣品(批號20080607)，精密稱定6份，按2.3項下方法測定淫羊藿苷含量的RSD=0.7%，表明本方法重復性良好。

2.9穩(wěn)定性試驗

取同一供試品溶液，于0，2，4，6，8，12，24h，分別測得淫羊藿苷峰面積的RSD=1.3%，表明供試品溶液在24h內穩(wěn)定。

2.10加樣回收率試驗

精密稱取含量已測定的供試品(批號20080607，含淫羊藿苷為0.67mg·片-1)，分別置于6個100mL量瓶中，精密加入淫羊藿苷對照品溶液(2.803mg·mL-1)1mL，按2.3項下方法測定淫羊藿苷的含量，計算加樣回收率，結果見表1。

2.11樣品含量測定

分別吸取對照品溶液、供試品溶液各10μL,注入色譜儀,記錄色譜圖,測定10批樣品的含量，結果見表2。

表1 淫羊藿苷加樣回收率試驗

注：淫羊藿苷對照品加入量均為2.803 mg

表2 抗骨增生片中淫羊藿苷含量測定 mg/片

3 討論

[1] 國家藥典委員會.中國藥典(一部)[S].北京：化學工業(yè)出版社，2005：229.

DeterminationofIcariininKangguzengshengTabletsbyHPLC

Wang Liyan

(ChangchunInstituteforFoodandDrugControl,ChangchunJilin130012,China)

Objective: To establish a HPLC method for determination the content of icariin in Kangguzengsheng tablets.MethodsAn Agilent C18column (250mm×4.6mm,5μm) was used, the mobile phase was consisted of acetonituile-water(25∶75) at a flow rate of1.0mL·min-1. UV detection wavelength was270nm.ResultsThe calibration curve of Icariin wasY=1490.44X-12.4236(r=1.0000)，and the average recovery was99.5%(n=6).ConclusionThe methed is simple, accurate. It can be used for quality control of Kangguzengsheng tablets.

Kangguzengsheng tablets；Icariin；HPLC

2009-09-02)