動物布魯氏菌病新型防控技術(shù)及研究進展

吳清民

（中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，農(nóng)業(yè)部人畜共患病重點開放實驗室，動物布病防控研究室，北京海淀 100193）

布魯氏菌病（簡稱“布病”）是一種重要的人畜共患病，也是國家法定檢疫－撲殺被感染家畜的三大疫?。谔阋?、布病和結(jié)核病）之一。該病主要發(fā)生于牛、山羊、綿羊、駱駝、豬、鹿和犬等家畜和野生動物。動物發(fā)病后明顯的臨床癥狀是公畜睪丸炎和附睪炎，母畜流產(chǎn)、死胎和不孕，可造成畜牧業(yè)重大損失。人群常因接觸患病動物及其產(chǎn)品、病畜污染的環(huán)境感染發(fā)病，病人臨床主要表現(xiàn)為長期發(fā)熱、盜汗、乏力、臥床、關(guān)節(jié)肌肉疼痛等；轉(zhuǎn)為慢性型后，中壯年可能完全喪失勞動能力或生育能力，伴發(fā)關(guān)節(jié)炎、腦膜炎、心內(nèi)膜炎等，治療極其困難。我國每年新發(fā)生重癥病例3萬多人，新感染人數(shù)粗略估計可達10萬人。過去患病者主要為獸醫(yī)、農(nóng)民、牧民以及動物飼養(yǎng)、裝載運輸、屠宰及檢驗、畜產(chǎn)品加工等職業(yè)人群，但目前兒童、學(xué)生、職業(yè)白領(lǐng)和老年人等非職業(yè)人群發(fā)病率也逐年上升，提示動物性食品可能存在安全隱患。鑒于布魯氏菌病嚴(yán)重威脅人類健康、影響牛、羊、豬等動物產(chǎn)品的國際貿(mào)易，發(fā)達國家如澳大利亞、新西蘭、加拿大、美國和北歐諸國等先后通過檢疫、補償性撲殺、局部免疫-檢疫-撲殺措施，歷經(jīng)幾十年努力分別在其全國范圍內(nèi)對動物布魯氏菌病進行了凈化根除。目前我國布魯氏菌病嚴(yán)重流行造成了公共衛(wèi)生安全隱患和社會恐慌，困擾著政府機關(guān)以及衛(wèi)生部、農(nóng)業(yè)部相關(guān)的防疫部門。

一、動物布病新型防控技術(shù)需求分析

為了阻止布魯氏菌病在動物群內(nèi)不斷擴散并保護國民健康安全，一直以來我國試圖采用發(fā)達國家布病防控策略，即檢疫-撲殺-無害化處理等措施，但因該病為慢性傳染病，潛伏期差異大，病原在體內(nèi)休眠等機制存在，即使每月檢疫一次，幾年后仍然不能凈化群內(nèi)患病動物。同時，因我國牛羊存欄基數(shù)大、陽性動物比例高，根據(jù)發(fā)達國家經(jīng)驗即使現(xiàn)在國家下決心撥出專項經(jīng)費（每年約需10 000億元），用于陽性動物撲殺補償，在短期內(nèi)也無法凈化動物群，只能緩解疫情緊急狀態(tài)，此后由于存在遺留的患病動物，不久又會恢復(fù)原有狀態(tài)。近年來，我國采用疫苗接種為主，檢疫、監(jiān)測、局部補償性撲殺為輔的控制措施，但因為現(xiàn)有布魯氏菌病疫苗存在技術(shù)缺陷，即被接種妊娠動物流產(chǎn)，且奶用動物、妊娠動物和種用動物不能接種疫苗，導(dǎo)致免疫動物群和非免疫動物群混養(yǎng)、臨床感染動物和易感動物混養(yǎng)等現(xiàn)象普遍存在；接種動物和臨床患病動物無法鑒別，法定檢疫凈化措施難以實施，在動物調(diào)運、分娩、產(chǎn)奶和配種時，現(xiàn)有布病疫苗免疫動物群無法監(jiān)管和檢測，致使群體中存在的患病動物對人畜健康和畜產(chǎn)品的安全隱患不能消除，疾病擴散蔓延趨勢無法遏制。因此，國家甚至全球各國都迫切需要對現(xiàn)有的動物布魯氏菌病防控技術(shù)體系進行改進和優(yōu)化。

二、動物布病新型防控技術(shù)的基本應(yīng)用程序

根據(jù)發(fā)達國家動物群布病凈化經(jīng)驗以及對全球動物布病防控技術(shù)分析認(rèn)為，動物布病凈化根除的關(guān)鍵核心技術(shù)產(chǎn)品是安全、高效的布病新型標(biāo)記疫苗及其敏感、特異的配套鑒別診斷試劑。我們認(rèn)為：對尚未實施過布病常規(guī)疫苗接種的動物群，通過該技術(shù)產(chǎn)品實施動物群布病凈化根除的基本程序是：（1）新型標(biāo)記疫苗接種：即每年一次對易感動物實施新型標(biāo)記疫苗接種，以阻止布病在動物群內(nèi)蔓延；（2）現(xiàn)場篩檢和鑒別診斷。即接種后6個月（布病最長潛伏期）全群動物血清采集，通過傳統(tǒng)檢測技術(shù)現(xiàn)場篩檢可疑感染動物，然后利用配套鑒別診斷技術(shù)測定可疑血清，以確定患病動物；（3）評估市值并補償撲殺：通過市值評估，由國家和地方財政以及養(yǎng)殖戶等按比例分?jǐn)偦疾游镅a償份額，一次性撲殺并無害化處理，以清除帶菌動物；（4）凈化效果評估：即新型標(biāo)記疫苗接種12個月，在第二次新型標(biāo)記疫苗接種前，全群采集血清再次篩檢、鑒別以評估防控效果；（5）在一定區(qū)域內(nèi)，動物群布病凈化尚未完成前，每年對所有易感動物接種一次新型標(biāo)記疫苗，但只對具有流產(chǎn)史動物群和待調(diào)運動物群實施篩檢和鑒別性檢疫。

動物布病控制和逐漸凈化根除是人類健康和動物養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的根本保障。為了保障人類健康和養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，動物布病控制已經(jīng)迫在眉睫。研究開發(fā)具有我國自主知識產(chǎn)權(quán)的動物布魯氏菌病凈化根除核心技術(shù)和戰(zhàn)略產(chǎn)品，對促進我國動物布魯氏菌病防控體系的改建和動物布魯氏菌病凈化根除將具有關(guān)鍵作用。

三、動物布病新型防控技術(shù)研究進展

為了構(gòu)建動物布病新型防控技術(shù)體系，解決現(xiàn)有防控技術(shù)缺陷，中國農(nóng)業(yè)大學(xué)自2003年啟動布魯氏菌致病機制和新型疫苗研發(fā)工作，2006年組建了動物布病防控技術(shù)研究室，專業(yè)地從事該病防控技術(shù)研究。目前獲得的技術(shù)成果主要是以下3方面。

動物布病新型標(biāo)記疫苗株2個。初步試驗證實，該兩種疫苗株具有兩大優(yōu)點：第一，安全性高，能夠注射接種包括妊娠、奶用和種用的牛群和羊群，對防疫人員安全性較高，經(jīng)小群動物試驗表明新型標(biāo)記疫苗接種妊娠動物無流產(chǎn)現(xiàn)象、種公畜未見明顯組織異常變化、奶用動物排菌期短；第二，具有雙重鑒別診斷標(biāo)記，疫苗接種后不干擾對動物群的法定檢疫和對動物引種、調(diào)運的監(jiān)管，接種后24周左右（布病最長潛伏期）采集動物血清，利用廉價的布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗抗原進行現(xiàn)場篩檢（第一標(biāo)記測定），將可疑動物血清送實驗室，利用鑒別診斷試劑（第二標(biāo)記測定）確定診斷患病動物，通過兩輪檢測可一次性地從動物群中清除淘汰患病動物，使國家布病控制、凈化，甚至根除的成本大大降低；目前，該項研發(fā)處于掃尾階段，即將進入臨床區(qū)域性試驗。

新型標(biāo)記疫苗配套鑒別診斷試劑3種。通過本試劑可從免疫動物群中鑒別確定患病動物，但為節(jié)省動物布病凈化的財政支出，應(yīng)首先用廉價的布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗抗原對動物群進行現(xiàn)場篩檢，然后通過特異性強、敏感性高的鑒別診斷試劑對可疑動物確診，這種做法每年可為國家財政節(jié)約檢測費用數(shù)十億元；經(jīng)對300余份臨床患病動物和常規(guī)疫苗免疫動物血清檢測發(fā)現(xiàn)，三種鑒別診斷試劑的特異性和敏感性均為95%以上，且患病動物抗體持續(xù)時間長，有利于臨床上檢測發(fā)現(xiàn)患病動物；目前鑒別診斷試劑研發(fā)處于標(biāo)化階段，將于布魯氏菌病新型標(biāo)記疫苗同步走向市場。

目前該項研究已獲國家發(fā)明專利7項，正在申報國際專利4項，正在聯(lián)系相關(guān)企業(yè)進行成果轉(zhuǎn)化。

我國動物布病防控工作未來展望

鑒于我國甚至全球發(fā)展中國家動物布魯氏菌病防控面臨的技術(shù)瓶頸和需求，我國相關(guān)研究院所正在研發(fā)的具有國內(nèi)自主知識產(chǎn)權(quán)的動物布病新型防控技術(shù)核心技術(shù)產(chǎn)品-新型標(biāo)記疫苗及其配套鑒別診斷試劑，并即將走向臨床應(yīng)用。這些新型產(chǎn)品與國內(nèi)外現(xiàn)有疫苗S19、M5、S2以及診斷試劑相比，將具有明顯的應(yīng)用性和技術(shù)性優(yōu)勢，是國家以最低成本、最快速度凈化甚至根除動物布魯氏菌病的關(guān)鍵技術(shù)，同時也是我國動物布魯氏菌病新型防控體系建設(shè)的戰(zhàn)略性核心技術(shù)產(chǎn)品。我們相信：在新技術(shù)產(chǎn)品推廣應(yīng)用之時，只要國家和地方財政支持，我國動物布魯氏菌病凈化根除指日可待，屆時布魯氏菌對人類健康和養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)性發(fā)展相關(guān)的社會及經(jīng)濟影響將會逐漸緩解和消除。