魏建林
隨著血細(xì)胞計數(shù)儀的廣泛應(yīng)用,在減輕檢驗(yàn)人員勞動強(qiáng)度的同時,也提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、精密度和重復(fù)性,給臨床快速診斷提供了可靠依據(jù)。但由于儀器的局限性和疾病的某些病理變化等干擾因素直接影響血細(xì)胞計數(shù)儀的準(zhǔn)確性,因而造成實(shí)驗(yàn)誤差,甚至得出與臨床相矛盾的結(jié)果,給臨床診斷帶來極大困惑。因此正確運(yùn)用高精設(shè)備進(jìn)行檢測,對于某些結(jié)果與臨床不符的病例,進(jìn)行顯微鏡直接計數(shù)尤為重要。我們發(fā)現(xiàn)在急、慢性乙型重癥肝炎患者中,隨著血清膽紅素濃度的進(jìn)行性增高,血細(xì)胞分析計數(shù)的白細(xì)胞優(yōu)勢出現(xiàn)假性增高,報告如下。
1.1 一般資料 選擇我院2009至2011年收治的急、慢性乙型重癥肝炎患者19例,男15例,女4例;年齡32~55歲;全部病例符合全國病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[1],住院治療期間進(jìn)行肝功、腎功、總蛋白、白蛋白、電解質(zhì)等血清生化常規(guī)動態(tài)監(jiān)測,并采用保肝、對癥、抗生素防止感染等綜合治療措施。
1.2 儀器及試劑 CELL-DYN1800型血細(xì)胞分析儀:Accute-40型全自動生化分析儀。Olympus生物顯微鏡。CELL-DYN1800型血型分析儀配套試劑和質(zhì)控品。Accute-40型全自動生化分析儀所用試劑(批號:20101203)和質(zhì)控品(批號:20100906)分別為北京九強(qiáng)公司和朗道公司提供;瑞士-姬姆薩染色均在效期內(nèi)使用。
1.3 方法 生化分析儀與血液分析儀均按說明書嚴(yán)格操作。顯微鏡細(xì)胞計數(shù)和分類計數(shù)按《全國臨床檢驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)程》操作,實(shí)驗(yàn)方法采用上述儀器并與手工計數(shù)法,所選病例分別重復(fù)計數(shù)4次,取其平均值。
19例急、慢性乙型重癥肝炎患者入院后血清總膽紅素檢測均>140 μmol/L,治療過程中呈進(jìn)行性增高,最高達(dá)785 mol/L。19例患者入院時測白細(xì)胞,10.0×109/L 1例,12.0×109~20.0×109/L 3例,21.0×109~38.0×109/L 13例,高于38.0×109/L 2例,其中淋巴細(xì)胞絕對計數(shù)均明顯高于正常。隨著總膽紅素進(jìn)行性增高,白細(xì)胞計數(shù)亦呈進(jìn)行性增高,達(dá)32.0×109~44.0×109/L,淋巴細(xì)胞絕對計數(shù)顯著提高;患者谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總蛋白、白蛋白、電解質(zhì)及血紅蛋白、紅細(xì)胞、血小板等均符合病情變化,19例患者均無發(fā)熱癥狀。根據(jù)患者白細(xì)胞計數(shù)的增高,臨床對19例患者均采取加大抗病毒劑量和增加抗生素種類治療,但白細(xì)胞計數(shù)仍呈持續(xù)性或進(jìn)行性增高,考慮有假性增高的可能,隨時采用手工法計數(shù)和瑞士-姬姆薩染色法進(jìn)行手工分類。結(jié)果10例患者白細(xì)胞計數(shù)4.2×109~9.7×109/L,分類正常,外周末梢血涂片檢測粒、紅細(xì)胞及血小板大致正常,未發(fā)現(xiàn)異性淋巴細(xì)胞。
血細(xì)胞計數(shù)儀大都采用電阻抗原理,不同大小的細(xì)胞通過微孔時產(chǎn)生不同的電脈沖,儀器將脈沖信號放大,根據(jù)脈沖信號的大小不同按進(jìn)行分群和計數(shù),而儀器本身不能識別細(xì)胞的類型。計數(shù)白細(xì)胞時,若含有未溶解或未破壞的紅細(xì)胞必將誤認(rèn)為小白細(xì)胞[2]。黃疸是慢性重癥肝炎的主要表現(xiàn)之一,主要是由于肝細(xì)胞受損、壞死后攝取、轉(zhuǎn)化、排泄膽紅素能力下降使得血液中膽紅素濃度增高所致。主要見于病毒性肝炎、中毒性肝炎或肝癌、肝內(nèi)或肝外膽道阻塞、新生兒生理性黃疸、Gilger-Najjar綜合征、Gilger病和Dubin-Jhknson綜合征等。因此,膽紅素的高低與肝細(xì)胞壞死程度和病情有著密切關(guān)系[3]。19例急、慢性乙型重癥肝炎患者均表現(xiàn)為膽紅素呈進(jìn)行性增高,隨著膽紅素的增高,血細(xì)胞計數(shù)儀出現(xiàn)白細(xì)胞計數(shù)假性增高。后經(jīng)手工白細(xì)胞計數(shù)和分類都在正常范圍。究其原因可能是高膽紅素血癥影響紅細(xì)胞的韌性,以及肝病患者紅細(xì)胞膜脂類異?;蚣t細(xì)胞內(nèi)含有大量的sHb、sHb-CO,抵抗溶血素作用,造成紅細(xì)胞在溶血素作用下溶解破壞不徹底,導(dǎo)致細(xì)胞計數(shù)儀誤將紅細(xì)胞計入小白細(xì)胞,導(dǎo)致白細(xì)胞計數(shù)假性增高。臨床對19例患者均采取了加大抗病毒劑量和增加抗生素類的治療,給患者的病情變化造成了一定影響,并給患者造成了一定的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。同時,基于血細(xì)胞計數(shù)儀對細(xì)胞檢測與顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)學(xué)計數(shù)原理截然不同,報告方式是兩個截然不同的概念,因此,血細(xì)胞計數(shù)儀決不可代替顯微鏡的細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查;對于高膽紅素血癥患者,一旦出現(xiàn)血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞計數(shù)增高,伴隨淋巴細(xì)胞絕對值增高,應(yīng)及時進(jìn)行手工復(fù)查,以防由于紅細(xì)胞因破壞不完全致使白細(xì)胞計數(shù)的假性增高,給臨床治療帶來不良后果。
1 中華傳染病寄生蟲學(xué)分會,肝臟病學(xué)分會.病毒性肝炎防治方案.中華肝臟病雜志,2000,8:324-329.
2 叢玉隆主編.當(dāng)代血液分析技術(shù)與臨床.第1版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1997.12.
3 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜主編.全國臨床檢測操作規(guī)程.第3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006.11.