魏賢莉，胡良勇

（廣州計量檢測技術(shù)研究院，廣東 廣州 510030）

0 引 言

生物安全柜是保障生物安全和環(huán)境安全的重要物質(zhì)基礎(chǔ)[1-2]。目前，已經(jīng)廣泛應(yīng)用在醫(yī)療衛(wèi)生、疾病預(yù)防與控制、食品衛(wèi)生、生物制藥、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。根據(jù)《國家中長期科學(xué)和技術(shù)發(fā)展規(guī)劃綱要（2006～2020年）》和《質(zhì)檢總局“十一五”科技發(fā)展規(guī)劃》的要求，已明確將生物安全保障列入《綱要》重點領(lǐng)域及其優(yōu)先主題的第10條公共安全之中的第（61）款。近年發(fā)生在俄羅斯的女科學(xué)家埃博拉病毒感染事件，以及SARS得到徹底控制后接連發(fā)生的3次實驗室內(nèi)感染事件，致使多名研究人員感染。其中在我國的實驗室感染更造成了三代病例出現(xiàn)的嚴重后果，使得實驗室安全問題對試驗人員和全球公共衛(wèi)生體系所帶來的巨大威脅再次凸現(xiàn)。由此，生物安全柜在我國各行業(yè)的相關(guān)實驗室中得以更廣泛地采用[3-5]。

醫(yī)藥及建筑行業(yè)都制定了生物安全柜的相關(guān)標準，其中人員、產(chǎn)品和交叉污染保護3個項目是生物安全柜檢測項目中最重要的指標。然而，醫(yī)藥行業(yè)及建筑行業(yè)均采用沉降法對以上3個指標進行檢測，此方法不僅操作不方便，而且對空氣中漂浮的小于5 μm帶菌微生物粒子監(jiān)測效率低下。根據(jù)文獻報道，微生物檢測可以使用空氣微生物檢測儀。目前，它已經(jīng)應(yīng)用于環(huán)境保護空氣中細菌總數(shù)測定，醫(yī)院感染管理科、手術(shù)室、病房、制藥環(huán)境中空氣微生物管理，防疫部門研究等方面[6]。

1 實驗部分

該文采用了JWL－IIC空氣微生物檢測儀對生物安全柜人員污染保護這一項目進行細菌的采集和分析。結(jié)果表明相對于傳統(tǒng)沉降法，空氣微生物檢測儀不僅操作簡便，而且有捕獲率高等優(yōu)點，可以在生物安全柜微生物檢測中廣泛使用。另外，數(shù)據(jù)證實了生物安全柜的合理使用確實能有效地防止氣溶膠的泄漏，保護操作人員的生物安全。

1.1 原理

應(yīng)用慣性撞擊原理，采用撞擊式，通過抽氣動力作用，使空氣通過窄縫而產(chǎn)生高速氣流，使懸浮在空氣中的帶菌粒子也高速向前運動。當(dāng)氣流與采樣介質(zhì)表面相遇，微生物粒子則由于慣性作用撞擊到介質(zhì)上而被采集。利用被采集空氣本身推動光盤旋轉(zhuǎn)的特征，使采集的微生物粒子均勻地分布在介質(zhì)上，從而準確測定環(huán)境中帶菌粒子的濃度。采樣后，平皿經(jīng)過恒溫、定時培養(yǎng)，即形成菌落，通過公式，計算空氣中含菌量。

1.2 儀器

固體撞擊式多功能空氣微生物檢測儀（JWL－IIC），北京中儀遠大科技有限公司。由電腦控制器、檢測頭、多功能電源、數(shù)字式便攜恒溫培養(yǎng)箱（另配）、三腳架軟管5個部件組成。檢測范圍為0.1～50μm細菌粒子，采樣流量20L/min，采樣時間為0～12.5min，每個測點重復(fù)測定3次，細菌捕獲率大于99.7%。

1.3 測定方法

監(jiān)測點位于前窗進氣格柵上方或下方140mm，安全柜距前端100 mm，使其對進氣氣流的干擾最小[7-8]，如圖1所示。

采樣結(jié)束后，取下平皿，置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)48h后，取出計數(shù)。每監(jiān)測點取樣3次，取平均數(shù)為檢測結(jié)果。

空氣中微生物含量計算公式為

菌落形成單位（cfu/m3）=（N·1000）（/F·T）

式中：N——培養(yǎng)皿上的菌落數(shù)；

F——空氣流量，L/min；

T——采樣時間，min。

2 結(jié)果與討論

為了和沉降法比較，該文對各級實驗室的6臺生物安全柜中人員污染保護用2種方法同時進行檢測，結(jié)果見表1。

表1 各級實驗室生物安全柜人員污染檢測結(jié)果（單位：cfu/m3）

從表1檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，微生物檢測儀法比沉降法監(jiān)測靈敏度高、重復(fù)性好。沉降法檢出結(jié)果普遍偏低，會存在漏檢的情況，原因是它對空氣中漂浮的5 μm以下的帶菌微生物粒子監(jiān)測效率低，可能會將不合格的生物安全柜誤判為合格，存在潛在的風(fēng)險。另外可以看出，各級實驗室的生物安全柜涉及人員保護污染的細菌個數(shù)都能符合醫(yī)藥行業(yè)及建筑行業(yè)制定的生物安全柜的標準，說明生物安全柜的使用確實能有效地防止實驗室直徑小于5 μm的氣溶膠以及直徑為5～100 μm的微小液滴的泄漏，保護實驗工作人員的生物安全。

3 結(jié)束語

生物安全柜作為一種隔離屏障，可有效防止氣溶膠的擴散[9]。在生物安全柜中操作具有感染性的實驗材料，可將操作過程中產(chǎn)生的感染性氣溶膠局限在安全柜內(nèi)，避免有害或有潛在危害的生物因子對實驗人員、實驗室及其周圍環(huán)境和生態(tài)造成危害或潛在危險[10]。所以，安全可靠的生物安全柜是目前保護生物安全最有效方法之一，由于它應(yīng)用廣泛，其質(zhì)量安全性和可靠性已引起政府和社會各界的關(guān)注和重視。因此，操作方便、監(jiān)測效率高、靈敏度高、結(jié)果準確的監(jiān)測方法尤其重要。目前，多功能空氣微生物檢測儀（JWL－IIC），不僅操作簡便、便于攜帶，而且使用范圍廣、捕獲率高、結(jié)果準確，是一種值得大力推廣、應(yīng)用前景廣闊的監(jiān)測手段，希望能供相關(guān)科技工作者參考借鑒。

[1]何欣，唐敏然，胡良勇，等.生物安全柜性能檢測的依據(jù)及關(guān)鍵技術(shù)[J].中國測試，2009，35（5）：91－94.

[2]胡良勇.生物安全柜的性能和質(zhì)量控制[J].醫(yī)療保健器具，2008，15（8）：18-20.

[3]段永祥.微生物實驗室生物安全問題[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2004，31（5）：658-660.

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[6]于曉南，張啟翔.多功能空氣微生物檢測儀監(jiān)測大氣中的細菌含量[J].現(xiàn)代儀器，2002（5）：33-34.

[7]JG 170—2005國家建筑工業(yè)行業(yè)標準生物安全柜[S].北京：中國標準出版社，2005.

[8]YY 0569—2005國家醫(yī)藥行業(yè)標準生物安全柜[S].北京：中國標準出版社，2006.

[9]顏巖，徐長春，王秋娣.生物安全柜的正確選擇和使用[J].中國醫(yī)藥生物技術(shù)，2008，3（2）：148-149.

[10]蔣晉生，張利民，郭達，等.Ⅱ級B2型生物安全柜安裝問題探討[J].中國醫(yī)院建筑與裝備，2009（4）：65-67.