梁仲遠(四川金堂縣第一人民醫(yī)院藥劑科,金堂縣 610100)
桔梗為桔??浦参锝酃latycodon grandiflorum(Jacq.)A.DC.的干燥根[1]。于春、秋二季采挖,洗凈,除去須根,趁鮮剝去外皮或不去外皮,干燥而得。其味苦、辛,性平,歸肺經。桔梗常以復方煎劑或復方顆粒中的一味藥物形式用于祛痰、鎮(zhèn)咳的治療,但其究竟在復方中發(fā)揮了多大的作用卻未可知。現(xiàn)筆者以桔梗單一為藥,檢測其對小鼠的祛痰、鎮(zhèn)咳作用,以期為復方配比提供理論依據(jù)。
752N型紫外分光光度計(上海天成科技有限公司)。
桔梗由金堂縣第一人民醫(yī)院中藥房提供,經筆者鑒定為真品;鹽酸氨溴索口服液(上海勃林格翰藥業(yè)有限公司,批號:091207);氫溴酸右美沙芬口服液(廣東珠海聯(lián)邦制藥股份有限公司,批號:090423,含量:120 mL∶018 g);酚紅(上海試劑三廠,批號:100112);氨水(沈陽沈一精細化學品有限公司,批號:20090625);其余試劑均為分析純。
SPF小鼠120只,♀♂兼用,體重(20±4)g,由四川大學實驗動物中心提供(動物生產許可證號:SCXK(川)2009-09)。
水煮橘梗2次,第1次2.5 h,第2次1.5 h,加8倍水,合并水提液,即得濃度為80 g·L-1橘梗水提液。
2.2.1 復制模型、分組和給藥 參考文獻[2],50只小鼠禁食不禁水12 h,分別置于500 mL燒杯中,在直徑小于燒杯的表面皿內放一棉球,上面加蓋篩網(wǎng),向棉球中注入0.4 mL氨水,迅速將燒杯倒置,使得氨水刺激小鼠引發(fā)咳嗽,以小鼠腹肌強烈收縮,同時張嘴呼氣為準。以1 min內咳嗽次數(shù)大于或等于3次判定為咳嗽模型初步篩選成功。
實驗分為5組,即模型(等容生理鹽水)、右美沙芬(0.03 g·kg-1)和桔梗水提液高、中、低劑量(16、8、4 g·kg-1)組。ig給藥,每12 h 1次,連續(xù)6次。
2.2.2 指標的測定[3]末次給藥結束后,氨水刺激小鼠咳嗽,以倒置燒杯至發(fā)生咳嗽的時間為咳嗽潛伏期,3 min內不咳者,潛伏期計3 min,記錄小鼠3 min內咳嗽次數(shù)。
2.3.1 分組和給藥 實驗分為5組,即空白對照(等容生理鹽水)、鹽酸氨溴索(0.03 g·kg-1)和桔梗水提液高、中、低劑量(16、8、4 g·kg-1)組。ig給藥,每12 h1次,連續(xù) 6次。
2.3.2 指標的測定[3]于末次給藥后1 h,ip 5%酚紅溶液(每只0.2 mL),ip后30 min脫頸椎處死小鼠,固定于手術板上,剪開頸正中皮膚,分離氣管,于喉頭下將磨平的7號針頭插入氣管內約0.3 cm,結扎固定后,以注射器吸取5%NaHCO3溶液0.5 mL,通過針頭來回灌氣管4次,收集并混合3次灌洗液,然后離心,取上清液于546 nm波長處測定吸光度。以吸光度對酚紅進樣量作標準曲線,根據(jù)標準曲線計算酚紅含量。
所有數(shù)據(jù)均以±s表示,方差分析采用Anova法,組間比較采用t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
與模型組比較,桔梗水提液高、中劑量組咳嗽潛伏期顯著延長(P<0.01或P<0.05),咳嗽次數(shù)顯著減少(P<0.01或P<0.05),桔梗水提液低劑量組在咳嗽潛伏期和咳嗽次數(shù)方面均有改善趨勢。提示桔梗水提液對鎮(zhèn)咳有一定作用。桔梗水提液對模型小鼠的鎮(zhèn)咳作用見表1。
表1 橘梗水提液對模型小鼠的鎮(zhèn)咳作用Tab1 Effect of relieving cough of water extract of P.grandiflorum in model rats
與空白對照組比較,桔梗水提液高、中劑量組小鼠氣管酚紅排泌量顯著增加(P<0.01或P<0.05),桔梗低劑量組小鼠酚紅排泌量雖無顯著差異,但有增加趨勢。提示桔梗水提液能增加呼吸道黏液分泌量,從而稀釋痰液。桔梗水提液對小鼠的祛痰作用見表2。
表2 橘梗水提液對小鼠的祛痰作用Tab2 Effect of removing sputum of water extract of P.grandiflorum in rats
氨水有強刺激性臭味,小鼠吸入后可刺激呼吸道黏膜而誘發(fā)咳嗽。筆者利用氨水刺激引起小白鼠發(fā)生明顯咳嗽。呼吸道分泌液量增多,有利于使附著呼吸道黏膜的濃痰變稀,從氣道壁脫落,從而起到祛痰作用。小鼠ip酚紅后,酚紅隨呼吸道分泌液排出,而酚紅排泌量的多少可間接反映出呼吸道分泌液量。
中醫(yī)認為,咳嗽的病因多由外感或內傷所致,應根據(jù)肺臟受邪的不同施以不同的治療原則,可歸納為祛邪利肺、宣肺止咳、健脾化痰[4]。本研究表明,單用桔梗對鎮(zhèn)咳、祛痰效果較好。但究竟桔梗和哪些中藥配伍使用能達到更好的消散風熱、宣暢肺氣、鎮(zhèn)咳祛痰功效,還有待進一步研究。
[1]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典(一部)[S].2010年版.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:127.
[2]徐叔云,卞如濂,陳 修.藥理實驗方法學[M].第3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:1 357.
[3]陳 奇.中藥藥理研究方法學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000:642.
[4]姜良擇.中醫(yī)肺系病證研究進展[J].環(huán)球中醫(yī)藥,2009,2(3):164.