Survivin和Ki-67在卵巢漿液性囊腺癌中的表達(dá)及意義

李俊霞

卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)常見(jiàn)的三大惡性腫瘤之一。婦女一生罹患卵巢癌的風(fēng)險(xiǎn)為1/70。一直以來(lái)，其發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，且死亡率極高，晚期確診患者的5年生存率只有25%左右［1］。近年來(lái)腫瘤分子生物學(xué)研究認(rèn)為，凋亡抑制和增殖能力增強(qiáng)是腫瘤發(fā)生的兩大主要機(jī)制。本研究通過(guò)檢測(cè)凋亡抑制蛋白Survivin(生存素)和增殖指標(biāo)Ki67在卵巢癌組織中的表達(dá)及二者的相關(guān)性，從凋亡與增殖的角度探討卵巢癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 標(biāo)本來(lái)自2001年1月至2009年1月在我院接受手術(shù)治療且有完整臨床資料的卵巢漿液性腫瘤患者61例，其中46例囊腺癌，術(shù)前均未行放療、化療及生物治療;15例囊腺瘤。臨床分期采用國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟2000年修訂的分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，病理組織學(xué)分級(jí)采用WHO分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

1.2 標(biāo)本置備 標(biāo)本用10%福爾馬林液固定，石蠟包埋，作4 μm連續(xù)切片，分別行常規(guī)HE染色和鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連接(SP)法免疫組化分析。

1.3 試劑 兔抗人Survivin多克隆抗體、鼠抗人Ki67單克隆抗體、SP免疫組化試劑盒，聯(lián)苯二胺顯色試劑盒均購(gòu)于福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法 采用SP法，實(shí)驗(yàn)步驟按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.5 結(jié)果判定 按照試劑盒說(shuō)明，Survivin和Ki67兩種蛋白均以在組織切片中顯示細(xì)胞核或胞漿染色為淡黃至黃棕色顆粒為陽(yáng)性表達(dá)。根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞顯色深淺分級(jí):不顯色或顯色不清為陰性(-);淺黃色為弱陽(yáng)性(+);棕黃色為中度陽(yáng)性(++);深褐色為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，免疫組化結(jié)果比較采用χ2檢驗(yàn)，各組別間相關(guān)性檢驗(yàn)采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Survivin和Ki67在卵巢漿液性囊腺癌、囊腺瘤組織中的表達(dá)及與卵巢癌臨床病理特征的關(guān)系，見(jiàn)表1。

表1 Survivin和Ki67表達(dá)與卵巢漿液性囊腺癌臨床病理特征的關(guān)系

2.2 Survivin、Ki67表達(dá)的相關(guān)性，見(jiàn)表2。

表2 Survivin和Ki67在卵巢漿液性囊腺癌中表達(dá)的相關(guān)性

3 討論

Survivin蛋白是最近新被發(fā)現(xiàn)的一種結(jié)構(gòu)獨(dú)特IAP族的凋亡抑制因子，與細(xì)胞分裂、增殖有關(guān)，在胚胎組織和惡性腫瘤中表達(dá)，正常成年分化組織一般不表達(dá)或弱表達(dá)［2］。是分子量最小的IAP族成員，具有抑制細(xì)胞凋亡和調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖的雙重功能，與卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)［3］。本研究發(fā)現(xiàn)Survivin在卵巢漿液性囊腺瘤和囊腺癌組織的陽(yáng)性表達(dá)率分別為26.7%和84.8%，顯示:從卵巢良性腫瘤到惡性腫瘤，其表達(dá)明顯增高，結(jié)合近年在一些癌前病變?nèi)缰囟葘m頸上皮內(nèi)瘤樣變、子宮內(nèi)膜不典型增生等組織中檢測(cè)出Survivin的表達(dá)，推測(cè)它在腫瘤惡性變的早期即有表達(dá)，可能通過(guò)抑制細(xì)胞凋亡，為存在基因缺陷的細(xì)胞提供生存優(yōu)勢(shì)，促使基因突變的積聚和細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化，最終導(dǎo)致了卵巢癌的發(fā)生發(fā)展。本研究還發(fā)現(xiàn)，Survivin在Ⅲ～Ⅳ期卵巢漿液性囊腺癌中陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于Ⅰ～Ⅱ期，在中低分化囊腺癌中陽(yáng)性率明顯高于高分化，也就是腫瘤分化越差，分期越晚，則它的陽(yáng)性表達(dá)率越高。因此Survivin表達(dá)程度與病期進(jìn)展和不良組織學(xué)分級(jí)相一致，而臨床分期及組織學(xué)分級(jí)程度是卵巢癌的重要預(yù)后因素，提示檢測(cè)它的表達(dá)水平對(duì)于判斷卵巢癌的惡性程度有一定意義，是一個(gè)具有潛在價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物。

細(xì)胞的惡性增殖是惡性腫瘤的顯著特征之一，檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的增殖狀態(tài)對(duì)協(xié)助診斷、估計(jì)預(yù)后及指導(dǎo)治療具有重要意義。Ki67是與細(xì)胞增殖相關(guān)的核抗原之一，與細(xì)胞的有絲分裂密切相關(guān)，其抗原性的表達(dá)在S期的后半期增加明顯，G2/M期達(dá)高峰，半壽期為1 h或更短，故可以準(zhǔn)確地反映細(xì)胞的增殖活性，是檢測(cè)細(xì)胞增殖活性的理想指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)Ki67在卵巢漿液性囊腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于囊腺瘤(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明這兩種分化程度不同的腫瘤其處于S期的細(xì)胞數(shù)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示卵巢癌的發(fā)生與細(xì)胞增殖有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果還顯示Ki67陽(yáng)性表達(dá)率在卵巢癌Ⅲ-Ⅳ期顯著高于Ⅰ-Ⅱ期;在高、中、低分化的卵巢漿液性囊腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)率呈遞增趨勢(shì)，且中低分化組織中Ki67表達(dá)與高分化組織差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這與宋歡歡［4］的實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。由此可見(jiàn)Ki67可以輔助病理檢查對(duì)良惡性腫瘤進(jìn)行鑒別，并且用Ki67檢測(cè)卵巢癌細(xì)胞的增殖能力方便快速，靈敏度、特異性均較高，具有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。

本研究顯示卵巢漿液性囊腺癌中Survivin蛋白表達(dá)陽(yáng)性組織的Ki67陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于Survivin蛋白表達(dá)陰性組織中Ki67陽(yáng)性率，Survivin與Ki67表達(dá)率間呈正相關(guān)(r=0.364，P＜0.05)。推測(cè)Survivin過(guò)表達(dá)可能促進(jìn)轉(zhuǎn)化細(xì)胞異常增殖，使Ki67蛋白表達(dá)明顯增加，在卵巢癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。因此，聯(lián)合檢測(cè)Survivin和Ki67蛋白的表達(dá)，可為卵巢漿液性囊腺癌的病理診斷、臨床診治及預(yù)后判斷提供客觀指標(biāo)。

綜上所述，Survivin在卵巢漿液性癌中高表達(dá)，它可能與卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。Ki-67可作為鑒別卵巢良惡性腫瘤重要的指標(biāo)。聯(lián)合檢測(cè)Survivin和Ki-67可作為卵巢漿液囊腺癌的診斷、評(píng)價(jià)惡性程度和預(yù)后的重要指標(biāo)。

［1］Colombo N，Van Gorp T，Parma G，et al.Ovarian cancer.Crit Rev Oncol Hematol，2006，60(2):159-179.

［2］Chawla Sarkar M，Bae SI，Reu FJ，et al.Downregnlation of Bcl-2，F(xiàn)LIP or IAPs(XIAP and survivin)by siRNAs sensitizes resistant melanoma cells to Apo2L/TRAIL-induced apoptosis.Cell Death Differ，2004，30:1160-1175.

［3］Duffy MJ，O’Donovan N，Brennan DJ，et al.Survivin:a promising tumor biomarker.Cancer Lett，2007，249(1):49-60.

［4］宋歡歡，封全靈.卵巢上皮性腫瘤中磷酸化STAT3與Ki67的表達(dá)及其臨床意義.河南醫(yī)學(xué)研究，2008，17(3):210-213.