左愛學(xué),李 莉,饒高雄

(云南中醫(yī)學(xué)院云南省高校民族藥現(xiàn)代研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,云南昆明 650500)

民族藥物河谷地不容的生物堿成分研究

左愛學(xué),李 莉,饒高雄

(云南中醫(yī)學(xué)院云南省高校民族藥現(xiàn)代研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,云南昆明 650500)

研究了民族藥河谷地不容 (Stephania inter m ediaH.S.Lo sp.Nov.)的生物堿成分,用色譜法從其塊根提取物中分離得到 7個(gè)生物堿,經(jīng)波譜分析鑒定為千金藤堿 (Stephanine,1)、克班寧(Crebanine,2)、異可利定 (Isocorydine,3)、千金藤寧堿 (Stepharanine,4)、藥根堿 (Jatrorrhizine,5)、巴馬汀 (Palmatine,6)和四氫巴馬汀 (Tetrahydropa lmatine,7).其中化合物 1～3是首次從河谷地不容中分離得到.研究結(jié)果表明,河谷地不容生物堿的結(jié)構(gòu)類型和地不容正品 (Stephania epigaeaH.S.Lo)類似,但具體成分有明顯區(qū)別,為保證藥品安全,河谷地不容不宜作為藥材地不容混用、代用.

河谷地不容;化學(xué)成分;生物堿

地不容是云南各地中草藥以及各少數(shù)民族醫(yī)藥中廣泛使用的一類天然藥物,中草藥習(xí)稱地不容、山烏龜、一文錢[1].彝族醫(yī)藥稱為必伍告 (Bi-Wu-Gao)[2],傣醫(yī)藥稱為波波罕 (Bo-Bo-Han)[3].《云南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》(2005年版)收載其正品來(lái)源為防己科千金藤屬植物地不容 (Stephania epigaeaH.S.Lo)的干燥塊根[4].但在實(shí)際應(yīng)用中,由于物種和資源的地理分布、民族區(qū)域分布的不同,有多種同屬近緣植物也在各地被當(dāng)作地不容使用.如何評(píng)價(jià)這些代用、混用的地不容類似品種,除了植物親緣關(guān)系的聯(lián)系以外,從其所含化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)的比較,以及相關(guān)藥理活性的驗(yàn)證等多個(gè)方面來(lái)尋求科學(xué)依據(jù),均是具有重要意義的工作,為此,我們比較系統(tǒng)地對(duì)云南各地各民族應(yīng)用的地不容類藥材進(jìn)行了化學(xué)成分的研究與比較.

河谷地不容主產(chǎn)于云南省紅河州和文山州,當(dāng)?shù)夭葆t(yī)和彝醫(yī)、苗醫(yī)等均當(dāng)作地不容藥用.有關(guān)河谷地不容的化學(xué)成分和生物活性,陳嬿等[5]從采自云南省紅河州個(gè)舊市的藥材樣品中分離鑒定了 10個(gè)生物堿成分,馬養(yǎng)民等[6-11]總結(jié)千金藤屬植物化學(xué)成分的主要特征是富含原小檗堿型和阿撲啡型生物堿,多具有抗心律失常、降血壓、細(xì)胞毒活性等作用,以四氫巴馬亭為原料開發(fā)的顱痛定等已應(yīng)用于臨床.為了進(jìn)一步闡明河谷地不容的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ),我們對(duì)產(chǎn)于云南省文山州西疇縣的河谷地不容的生物堿成分進(jìn)行了研究.

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與材料

熔點(diǎn)用 YANACO顯微熔點(diǎn)儀測(cè)定 (溫度未校正);MS用 Finnigan MAT-95質(zhì)譜儀測(cè)定;NMR用BrukerAM-400核磁共振儀測(cè)定,T MS內(nèi)標(biāo).柱色譜硅膠及薄層色譜硅膠板均為青島海洋化工廠生產(chǎn),柱色譜氧化鋁為上海陸都化學(xué)試劑廠生產(chǎn),葡聚糖凝膠 LH-20為 Phar macia公司生產(chǎn);乙醇、丙酮、環(huán)己烷等試劑均用普通工業(yè)級(jí)溶劑或化學(xué)純?nèi)軇?薄層色譜顯色劑用改良碘化鉍鉀試液或 10%硫酸-乙醇溶液.

河谷地不容藥材 (塊根)采于云南省文山州西疇縣,植物標(biāo)本經(jīng)云南中醫(yī)學(xué)院藥用植物教研室錢子剛教授鑒定為防己科千金藤屬植物河谷地不容Stephania inter m ediaH.S.Lo sp.Nov.,標(biāo)本保存于云南中醫(yī)學(xué)院標(biāo)本館(DBR-00137-M).

1.2 提取與分離

新鮮的河谷地不容塊根 9 kg,刮去粗皮,切成碎塊,用攪拌機(jī)磨成糊狀,再以 2%的稀硫酸于室溫下浸泡提取 2次,每次 3 d,不時(shí)攪拌以促進(jìn)溶出.合并2次酸水提取液,用 20%氫氧化鈉調(diào)節(jié)至 pH=9,依次用氯仿、正丁醇萃取,得到脂溶性生物堿部分 (Fr-A,18 g)和水溶性生物堿部分 (Fr-B,78 g).

Fr-A部分用氧化鋁柱色譜分離,以環(huán)己烷 -丙酮 -三乙胺系統(tǒng)梯度洗脫 (80∶20∶1～60∶40∶1)分為 4個(gè)流份段,再分別以硅膠柱色譜反復(fù)分離,用氯仿 -丙酮 -三乙氨 (100∶5∶0.5～100∶25∶1)梯度洗脫,以及葡聚糖凝膠 LH-20柱色譜 (丙酮洗脫)反復(fù)純化得到化合物 1(1 140 mg)、2(960 mg)、3(17 mg)、7(37mg).

Fr-B部分用氧化鋁柱色譜分離,以氯仿 -甲醇 -三乙胺系統(tǒng)梯度洗脫 (100∶10∶1～100∶100∶1)分為 3個(gè)流份段,再分別以葡聚糖凝膠 LH-20柱色譜 (甲醇洗脫)反復(fù)純化得到化合物 4(12mg)、5(71mg)、6(231mg).

2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物 1:淺黃色片晶 (丙酮),m.p.154～155℃,MS m/z 309(M+,C19H19NO3),1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ:2.55(3H,s,N-CH3),3.90(3H,s,8-OCH3),2.21(1H,td,J=14.5、3.1 Hz,5-Ha),3.05(3H,m,5-Hb和7-H2),2.52(2H,m,4-H2),3.69(1H,dd,J=14.9、4.6 Hz,6a-H),5.90、6.01(各 1H,d,J=1.4 Hz,-OCH2O-),6.55(1H,s,3-H),6.82(1H,br.d,J=8.0 Hz,9-H),7.30(1H,br.t,J=8.0 Hz,10-H),7.78(1H,br.d,J=8.0 Hz,11-H);上述1H NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[12],故鑒定為千金藤堿 (Stephanine).

化合物 2:淺黃色柱晶 (甲醇),m.p.109～110℃.MSm/z339(M+,C20H21O4N).其1HNMR和13CNMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[13],故鑒定為克班寧(Crebanine).

化合物 3:無(wú)色柱晶 (甲醇),m.p.181～183℃.MSm/z341(M+,C20H23O4N).其1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[14],故鑒定為異可利定 (Isocorydine).

化合物 4:紅色針晶 (甲醇),m.p.＞200℃.MS m/z324(M+,C18H15NO4).1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:3.96(3H,s,3-OCH3),4.07(3H,s,9-OCH3),7.50(1H,s,1-H),6.90(1H,s,4-H),3.31(2H,m,5-H2),4.86(2H,m,6-H2),9.40(1H,s,8-H),7.66(1H,d,J=9.0Hz,11-H),7.74(1H,d,J=9.0 Hz,12-H),8.41(1H,s,13-H).上述波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[12,15],故鑒定為千金藤寧堿 (Stepharanine).

化合物 5:橘紅色針晶 (甲醇),m.p.202～205℃.MS m/z 338(M+,C19H17NO4).其1H NMR和13CNMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[16],故鑒定為藥根堿(Jatrorrhizine).

化合物 6:黃色針晶 (甲醇),m.p.205～207℃.MSm/z 352(M+,C20H19NO4).其1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[17],故鑒定為巴馬汀 (Palmatine).

化合物 7:無(wú)色片晶 (甲醇),m.p.140～142℃.MSm/z 355(M+,C21H25NO4).其1H NMR和13C NMR與文獻(xiàn)報(bào)道一致[15,18],故鑒定為四氫巴馬汀 (Tetrahydropalmatine).

4 結(jié)果與討論

從河谷地不容中分離得到 7個(gè)生物堿成分,分別鑒定為千金藤堿 (1)、克班寧 (2)、異可利定 (3),千金藤寧堿 (4)、藥根堿 (5)、巴馬汀 (6)和四氫巴馬汀 (7).其中,化合物 1～3為首次從該種植物中分離得到.研究結(jié)果豐富了對(duì)民族藥物河谷地不容化學(xué)成分的認(rèn)識(shí),也為從內(nèi)在物質(zhì)基礎(chǔ)的角度評(píng)價(jià)其藥用價(jià)值提供了一些分析比較的線索和依據(jù).

河谷地不容的生物堿成分主要屬阿樸菲型 (化合物 1～3)、小檗堿型 (化合物 4～7),且阿樸菲型生物堿含量較高.從生物堿的結(jié)構(gòu)類型看,河谷地不容和《云南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》收載的地不容正品(Stephania epigaeaH.S.Lo)有相似性[6-8],但所含的具體化合物,尤其是高含量生物堿成分有明顯區(qū)別,因此,從內(nèi)在物質(zhì)基礎(chǔ)的比較來(lái)分析,河谷地不容當(dāng)作地不容藥材使用是否可行,還有待進(jìn)一步的深入研究和探索.在目前的臨床使用中,為保證藥品安全,河谷地不容 (Stephania inter m ediaH.S.Lo sp.Nov.)應(yīng)視為藥材地不容偽品,不得混用代用.

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(責(zé)任編輯王 琳)

Studies on the Alkaloids from the Ethno-Remedy Plants Stephania Intermedia H.S.Losp.Nov.

ZUO Ai-xue,LILi,RAO Gao-xiong
(KeyLaboratory of Ethnic-Pha rmacy of Yunnan Higher School,Yunnan University of Traditional ChineseMedicine,Kunming 650500,China)

This research is an analysis of the chemical constituents ofStephania inter m ediaH.S.Lo sp.Nov.,an ethno-medicine,in which seven alkaloids were isolated and characterized as(1)Stephanine,(2)Crebanine,(3)isocorydine,(4)Stepharanine,(5)Jatrorrhizine,(6)Palmatine and(7)Tetrahydro-pa lmatine.Among them,compounds 1—3 were isolated from this plant for the first t ime.The results showed that the structures of alkaloids inS.inter m ediaandS.epigaeawere similar,but the major componentswere quite different.Thus,it is no good to replaceS.epigaeawithS.inter m ediafor the sake of safety.

Stephania inter m ediaH.S.Lo sp.Nov.;chemical constituents;alkaloids

Q 946.88

A

1672-8513(2011)01-0017-03

10.3969/j.issn.1672-8513.2011.01.004

2010-10-26.

左愛學(xué) (1978-),男,博士.主要研究方向:中草藥、民族藥的化學(xué)成分及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn).

饒高雄 (1965-),男,教授.主要研究方向:天然藥物化學(xué).