張志華 裘正軍 朱光輝 劉俊 趙寧 黃陳 馮正中 呂秀紅

·論著·

CD151、c-Met及整合素α3、α6在胰腺導(dǎo)管腺癌中的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系

張志華 裘正軍 朱光輝 劉俊 趙寧 黃陳 馮正中 呂秀紅

目的探討CD151、c-Met和整合素α3、α6蛋白在胰腺導(dǎo)管腺癌中的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系。方法用免疫組化法檢測71例胰腺導(dǎo)管腺癌及10例正常胰腺組織中CD151、c-Met和整合素α3、α6蛋白的表達(dá)，分析它們與臨床病理特征及患者預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果CD151、c-Met和整合素α3、α6在71例胰腺導(dǎo)管腺癌組織中的表達(dá)陽性率分別為81.69%(58/71)、69.01%(49/71)、69.01%(49/71)和84.51%(60/71)，而正常胰腺組織均未表達(dá)。CD151和c-Met的表達(dá)與腫瘤的TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(P值均<0.05)。CD151的表達(dá)與c-Met及整合素α3、α6的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.583，P=0.000；r=0.457;P=0.000；r=0.671;P=0.000)。單因素分析顯示，CD151、c-Met、整合素α3和α6的表達(dá)與預(yù)后有關(guān)(P值均<0.05)。多因素分析表明，CD151、c-Met是患者術(shù)后生存時間的獨(dú)立預(yù)后因子。結(jié)論CD151、c-Met及整合素α3、α6在胰腺癌的發(fā)展、轉(zhuǎn)移及預(yù)后發(fā)揮重要作用，CD151、c-Met可考慮作為臨床評價胰腺癌生物學(xué)行為及評估預(yù)后的指標(biāo)。

胰腺腫瘤； CD151； c-Met； 整合素α3； 整合素α6

CD151是Tetraspanin超家族中的一員，參與腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移[1]。原癌基因c-Met編碼受體酪氨酸激酶家族的一個成員，被肝細(xì)胞生長因子(HGF)激活，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞增殖能力增強(qiáng)、運(yùn)動能力提高、侵襲能力增加[2]。最近研究證明[3]，CD151、c-Met和整合素α3、α6形成一結(jié)構(gòu)和功能性復(fù)合物，在人唾液腺癌和乳腺癌細(xì)胞的HGF/c-Met信號調(diào)節(jié)中起重要作用。本研究檢測胰腺癌組織CD151、c-Met和整合素α3、α6的表達(dá)，分析它們間的相關(guān)關(guān)系及其與臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系。

材料和方法

一、臨床材料

收集1993年8月至2009年1月上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院普外科手術(shù)切除的71例胰腺癌石蠟標(biāo)本，男50例，女21例；年齡40～80歲，平均64歲；術(shù)前均未行放、化療。10例正常胰腺組織標(biāo)本來自供肝附帶的正常胰腺，常規(guī)固定、石蠟包埋。隨訪持續(xù)至患者病死，截止日為2010年3月15日。總生存期指手術(shù)日至病死日，死于癌癥復(fù)發(fā)以外的原因被認(rèn)為是刪失事件。

二、CD151、c-Met和整合素α3、α6蛋白表達(dá)檢測

采用免疫組化SP法檢測，試劑盒購自福州邁新公司，依據(jù)說明書操作。鼠抗人CD151及整合素α3單抗、兔抗人整合素α6多抗(均為美國Santa公司)、兔抗人c-Met單抗(英國Abcam公司)工作濃度均為1∶100。以PBS代替一抗作為陰性對照。由兩位病理科醫(yī)師雙盲閱片。每張切片選10個高視野，每個視野計100個細(xì)胞。陽性染色細(xì)胞百分比及染色強(qiáng)度評分：陽性細(xì)胞≤10%為1分,11%～50%為2分,51%～70%為3分,>70%為4分；無陽性染色0分，淺黃色1分，棕黃色2分，棕褐色3分。兩者相加，≤3分為低表達(dá)，≥4分為高表達(dá)。

三、統(tǒng)計學(xué)處理

SPSS13.0統(tǒng)計軟件包處理數(shù)據(jù)。采用χ2檢驗(yàn)或Fisher確切概率法。雙變量非正態(tài)分布資料用Spearman等級相關(guān)系數(shù)檢驗(yàn)。單因素生存分析用Kaplan-Meier法和log-rank檢驗(yàn)，多因素生存分析用Cox比例風(fēng)險模型。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

一、CD151、c-Met和整合素α3、α6的表達(dá)

CD151、c-Met、整合素α3和α6蛋白定位于癌細(xì)胞的胞膜和胞質(zhì)(圖1)，正常胰腺組織均未見表達(dá)。71例胰腺癌的CD151、c-Met、整合素α3和α6蛋白表達(dá)陽性率分別為81.69%(58/71)、69.01%(49/71)、69.01%(49/71)和84.51%(60/71)。CD151低表達(dá)36例、高表達(dá)35例；c-Met分別為28例和43例；整合素α3分別為32例和39例；整合素α6分別為25例和46例。

圖1胰腺癌組織CD151(a)、c-Met(b)、整合素α3(c)和α6(d)的表達(dá) (免疫組化 ×400)

CD151的表達(dá)與c-Met、整合素α3、整合素α6表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.583、0.457、0.671；P值均=0.000)。

二、CD151、c-Met和整合素α3、α6表達(dá)與胰腺癌臨床病理特征的關(guān)系

CD151、c-Met的表達(dá)與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)，而與其他臨床特征無關(guān)；整合素α3、α6的表達(dá)與臨床病理特征均無關(guān)(表1)。

三、CD151、c-Met和整合素α3、α6表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系

71例患者中隨訪65例，失訪6例，中位隨訪時間14.0個月。47例病死于胰腺癌， 3例存活，刪失事件15例。1、2年生存率分別為55.4%和29.2%。

單因素分析表明，CD151、c-Met、整合素α3和α6的表達(dá)與患者預(yù)后顯著相關(guān)(P值均<0.05，圖2)。

多因素分析示CD151和c-Met表達(dá)是影響患者術(shù)后生存時間的獨(dú)立預(yù)后因子，CD151的OR值為2.605，95%CI1.308～5.187，P=0.006；c-Met的OR值為2.427，95%CI1.239～4.754，P=0.010。

表1 胰腺癌組織CD151、c-Met、整合素α3和α6表達(dá)例數(shù)及與臨床病理特征的關(guān)系

注：a：χ2檢驗(yàn)；b：Fisher′s精確檢驗(yàn)

圖2CD151(a)、c-Met(b)及整合素α3(c)、α6(d)的表達(dá)與胰腺癌患者預(yù)后的關(guān)系

討 論

CD151參與細(xì)胞一系列生物學(xué)過程，包括增殖、黏附、運(yùn)動、血管生成、半橋粒形成和轉(zhuǎn)移。Testa等[4]證實(shí)，CD151抗體能阻止腫瘤細(xì)胞從原發(fā)灶脫離；Kohno等[5]證實(shí)，CD151單抗抑制癌細(xì)胞體內(nèi)轉(zhuǎn)移，將CD151cDNA轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞可增加細(xì)胞的遷移和侵襲能力。臨床研究表明[6]，CD151的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。本結(jié)果證實(shí)CD151在胰腺導(dǎo)管腺癌組織中高表達(dá)，與Gesierich等[7]的報道一致。既往研究顯示，CD151的高表達(dá)可預(yù)測前列腺癌和肝細(xì)胞癌[6]的不良預(yù)后。本結(jié)果顯示，CD151的高表達(dá)是判斷胰腺癌預(yù)后的獨(dú)立因子。

CD151需與各種跨膜蛋白相互作用形成復(fù)合物才能發(fā)揮生物學(xué)功能[8]。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)，CD151表達(dá)增加與c-Met、整合素α3、α6表達(dá)顯著相關(guān)，且c-Met的過表達(dá)與TNM分期和淋巴侵襲顯著相關(guān)，c-Met同樣是判斷胰腺癌預(yù)后的獨(dú)立因子。

[1] Zheng ZZ,Liu ZX.CD151 gene delivery increases eNOS activity and induces ECV304 migration,proliferation and tube formation.Acta Pharmacol Sin,2007,28:66-72.

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2010-08-19)

(本文編輯：屠振興)

ExpressionofCD151,c-Met,integrinalpha3,alpha6andtheprognosticsignificanceinpancreaticductaladenocarcinoma

ZHANGZhi-hua,QIUZheng-jun,ZHUGuang-hui,LIUJun，ZHAONing,HUANGChen,FENGZheng-zhong，LüXiu-hong.

DepartmentofGeneralSurgery,FirstPeople′sHospitalofShanghai,ShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai200080,China

Correspondenceauthor:QIUZheng-Jun,Email:qiuwryb@gmail.com

ObjectiveTo investigate the expression and prognostic significance of CD151, c-Met and integrin alpha 3, alpha 6 in pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC).MethodsThe expression of CD151, c-Met and integrin alpha3, alpha6 in 71 patients with PDAC and 10 samples of normal pancreas tissues were detected by immunohistochemistry, and the relationship between the expression of CD151, c-Met and integrin alpha 3, alpha 6 and the clinicopathological features, prognosis of these patients was analyzed.ResultsThe positive expression rates of CD151, c-Met and integrin alpha 3, alpha 6 in PDAC were 81.69% (58/71), 69.01%(49/71), 69.01%(49/71) and 84.51%(60/71), and there was no expression in normal pancreas tissues. The expressions of CD151, c-Met were significantly associated with TNM stage and lymph node metastasis (P<0.05). The expression of CD151was positively correlated with the expressions of c-Met and integrin alpha3, alpha6 (r=0.583,P=0.000,r=0.457;P=0.000,r=0.671;P=0.000). Univariate analysis suggested the expression of CD151, c-Met and integrin alpha3, alpha6 was associated with survival (P<0.05). Multivariate analysis suggested the expression of CD151, c-Met was the independent prognostic factor for post-operative survival.ConclusionsCD151, c-Met and integrin alpha3, alpha6 play a role in the development, metastasis and prognosis of PDAC, and they might be new markers to predict biological behavior and the prognosis of PDAC patients.

Pancreas neoplasm; CD151； c-Met； Integrin alpha3； Integrin alpha6

10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2011.03.013

200080 上海，上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一人民醫(yī)院普外科(張志華、裘正軍、朱光輝、劉俊、趙寧、黃陳)，病理科(馮正中、呂秀紅)

裘正軍，Email: qiuwryb@gmail.com