左旋龍腦對小鼠耐缺氧的影響

姜成 楊貴

（武警四川總隊(duì)醫(yī)院藥劑科，四川 樂山 614000）

左旋龍腦開竅醒神，清熱止痛。來源于菊科植物艾納香Blumea balsamifera（L.）DC.本文以多種小鼠缺氧實(shí)驗(yàn)為模型，觀察左旋龍腦對小鼠缺血缺氧的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥物及試劑

左旋龍腦（純度95%，批號：20060508）購自湖北省俊輝藥業(yè)有限公司；尼莫地平（20mg·每粒－1，批號：070706）購自山西亞寶藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司；西比靈（5mg·每粒－1，批號：061018955）購自西安楊森制藥有限公司；銀杏達(dá)莫注射液（含總黃酮苷0.92～1.38mg·ml－1，雙嘧達(dá)莫0.36～0.44mg·ml－1，批號：061208）購自巴里莫爾制藥有限公司；NaNO2（（含量大于99.0%，批號：000512）購自北京精細(xì)化學(xué)試劑公司；KCN（批號：20060116）購自上海榮盛，取血紅蛋白測定試劑之文氏液4ml，以生理鹽水稀釋至20ml，為10ml·kg－1。

1.1.2 動物

SPF級昆明種小鼠，體重18～22g，由四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，動物合格證號：SCXK（川）－10－2006。

1.2 方法

1.2.1 對小鼠常壓耐缺氧的影響

小鼠隨機(jī)分組，每組10只，♂♀各半，分別為左旋龍腦0.2、0.4、0.8g·kg－1組以及對照組。灌胃左旋龍腦各劑量藥物0.1ml·10g－1體積，對照組給予等體積羧甲基纖維素鈉液（CMC），給藥后30min，將小鼠放于一定容積的廣口密閉玻璃瓶中（內(nèi)置鈉石灰），觀察小鼠死亡時間［1］。

1.2.2 對小鼠異丙腎上腺素心肌缺氧的影響

小鼠隨機(jī)分組，每組10只，♂♀各半，分別為左旋龍腦0.2、0.4、0.8g·kg－1組，模型組，對照組。灌胃左旋龍腦各劑量藥物0.1ml·10g－1體積，對照組和模型組給予等體積CMC液，灌胃左旋龍腦各劑量藥物15min后，腹腔注射鹽酸異丙腎上腺素原液0.3ml·10g－1，15min后將小鼠放于一定體積的廣口密閉玻璃瓶中（內(nèi)置鈉石灰），觀察小鼠死亡時間［2］。

1.2.3 對小鼠斷頭張口呼吸的影響

小鼠隨機(jī)分組，每組10只，♂♀各半，分別為左旋龍腦0.2、0.4、0.8g·kg－1組，西比靈組，銀杏達(dá)莫組，對照組。灌胃左旋龍腦各劑量藥物0.1ml·10g－1體積，對照組給予等體積CMC液。西比靈藥后60min，其余各藥藥后30min，將小鼠頸部固定部位置于斷頭閘下迅速斬?cái)?，立即記錄小鼠張口呼吸持續(xù)時間［1］。

1.2.4 對NaNO2致小鼠缺氧的影響

小鼠隨機(jī)分組，每組10只，♂♀各半，分別為左旋龍腦0.2、0.4、0.8g·kg－1組，人參皂甙組，銀杏達(dá)莫組，對照組。灌胃相應(yīng)藥物0.1ml·10g－1體積，對照組給予等體積CMC液。藥后30min，立即每鼠腹腔注射400mg·kg－1的 NaNO20.1ml·10g－1，觀察小鼠存活時間［3］。

1.2.5 對KCN致小鼠死亡的影響

小鼠隨機(jī)分組，每組10只，♂♀各半，分別為左旋龍腦0.2、0.4、0.8g·kg－1組，銀杏達(dá)莫組，對照組。灌胃相應(yīng)藥物0.1ml·10g－1體積，對照組給予等體積CMC液。灌胃相應(yīng)藥物后30min，立即每鼠腹腔注射 KCN 0.1ml·10g－1，觀察小鼠存活時間［3］。

1.2.6 對過飽和MgCL2致小鼠死亡的影響

小鼠隨機(jī)分組，每組10只，♂♀各半，分別為左旋龍腦0.2、0.4、0.8g·kg－1組，西比靈組，銀杏達(dá)莫組，對照組。灌胃相應(yīng)藥物0.1ml·10g－1體積，對照組給予等體積CMC液。一次灌胃相應(yīng)藥物后30min，立即慢速尾靜脈注射 MgCL2飽和溶液，觀察小鼠存活時間［4］。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 對小鼠常壓耐缺氧的影響

表1可見，對照組與左旋龍腦比較，左旋龍腦0.2、0.4g·kg－1無明顯差異，左旋龍腦0.8g·kg－1與對照組比較有明顯差異（P＜0.05），能顯著延續(xù)小鼠常壓耐缺氧所致小鼠死亡時間，表明左旋龍腦對密閉環(huán)境所致缺氧有顯著改善作用。

表1 左旋龍腦對小鼠常壓耐缺氧的影響（ d，n＝10）

表1 左旋龍腦對小鼠常壓耐缺氧的影響（ d，n＝10）

注：與對照組相比＊P＜0.05，＊＊P＜0.01。

組 別 劑量（g·kg－1） 存活時間（min）對照40.30±6.79左旋龍腦 0.2 49.78±8.910.4 46.32±7.810.8 54.21±9.96＊

2.2 對小鼠異丙腎上腺素心肌缺氧的影響

表2可見，模型組與正常對照組比較，模型組小鼠死亡時間顯著少于正常組，左旋龍腦死亡時間與模型組無差異，表明左旋龍腦對在限氧環(huán)境異丙腎上腺素所致小鼠心肌耗氧量增多所致死亡無明顯作用。

表2 左旋龍腦對小鼠異丙腎上腺素心肌缺氧的影響（ d，n＝10）

表2 左旋龍腦對小鼠異丙腎上腺素心肌缺氧的影響（ d，n＝10）

注：與對照組相比＊P＜0.05，＊＊P＜0.01。

組 別 劑量（g·kg－1） 存活時間（min）對照43.65±7.01模型 19.87±4.25＊＊左旋龍腦 0.2 19.43±3.10＊＊0.4 15.91±3.42＊＊0.8 16.78±6.37＊＊

2.3 對小鼠斷頭張口呼吸的影響

表3可見，各給藥組與對照組相比較，銀杏達(dá)莫0.02g·kg－1對斷頭所致小鼠腦缺血缺氧有顯著延長作用。左旋龍腦0.2、0.4、0.8g·kg－1亦能顯著延長斷頭所致小鼠死亡時間。

表3 左旋龍腦對小鼠斷頭張口呼吸的影響（ d，n＝10）

表3 左旋龍腦對小鼠斷頭張口呼吸的影響（ d，n＝10）

注：與對照組相比＊P＜0.05，＊＊P＜0.01。

組 別 劑量（g·kg－1） 張口呼吸時間（s）對照25.2±3.3西比靈 0.006 29.1±5.7銀杏達(dá)莫 0.02 64.3±8.2＊＊左旋龍腦 0.2 30.3±4.7＊0.4 31.4±5.3＊0.8 35.1±4.9＊＊

2.4 對NaNO2致小鼠缺氧的影響

表4可見，左旋龍腦組，陽性藥與對照組比較，銀杏達(dá)莫0.02g·kg－1對NaNO2所致小鼠內(nèi)缺氧有顯著延長作用，人參皂甙0.06g·kg－1無明顯差異，左旋龍腦各劑量組無明顯作用。

表4 對NaNO2致小鼠缺氧的影響（ d，n＝10）

表4 對NaNO2致小鼠缺氧的影響（ d，n＝10）

注：與對照組相比＊＊P＜0.01。

組 別 劑量（g·kg－1） 存活時間（min）對照12.54±1.78人參皂甙 0.06 10.85±1.35銀杏達(dá)莫 0.02 17.02±1.87＊＊左旋龍腦 0.2 12.98±2.120.4 12.56±2.750.8 13.12±2.23

2.5 對KCN致小鼠死亡的影響

表5可見，各給藥組與對照組相比較，銀杏達(dá)莫0.02g·kg－1對KCN致小鼠死亡時間有顯著延長作用，左旋龍腦0.2、0.4g·kg－1對小鼠的死亡時間有延長趨勢，0.8g·kg－1能顯著延長KCN致小鼠死亡時間。

表5 左旋龍腦對KCN致小鼠死亡的影響（ d，n＝10）

表5 左旋龍腦對KCN致小鼠死亡的影響（ d，n＝10）

注：與對照組相比＊P＜0.05。

組 別 劑量（g·kg－1） 死亡時間（min）對照0.014±0.78銀杏達(dá)莫 0.02 11.23±8.02＊左旋龍腦 0.2 3.02±1.520.4 3.78±2.230.8 9.92±6.32＊

2.6 對過飽和MgCL2致小鼠死亡的影響

表6可見，銀杏達(dá)莫組，左旋龍腦組與對照組比較，銀杏達(dá)莫0.02g·kg－1對MgCL2致小鼠的死亡時間有顯著延長作用，左旋龍腦0.2、0.4g·kg－1對小鼠的死亡時間有延長趨勢，0.8 g·kg－1能顯著延長MgCL2致小鼠的死亡時間。

表6 對過飽和MgCL2致小鼠死亡的影響（ d，n＝10）

表6 對過飽和MgCL2致小鼠死亡的影響（ d，n＝10）

注：與對照組相比＊P＜0.05，＊＊P＜0.01。

組 別 劑量（g·kg－1） 存活時間（s）對照28.8±2.9銀杏達(dá)莫 0.02 36.8±6.5＊西比靈 0.06 30.9±6.3左旋龍腦 0.2 31.2±4.80.4 33.9±5.90.8 37.3±3.1＊＊

3 討論

抗整體小鼠缺氧實(shí)驗(yàn)是篩選治療心腦組織因缺血缺氧引起功能障礙的常用方法之一。常壓缺氧時由于酸性代謝產(chǎn)物和二氧化碳蓄積，引起呼吸加深加快，心搏加速，心輸出量增加。缺氧晚期，因心臟和腦組織缺氧而死亡。左旋龍腦能顯著延長小鼠在密閉容器內(nèi)的缺氧死亡時間。

小鼠斷頭后，腦血液供應(yīng)中斷，腦中原有的血液和營養(yǎng)物質(zhì)尚能使腦功能維持一段時問，表現(xiàn)在小白鼠規(guī)律地張口呼吸，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示左旋龍腦能明顯延長小白鼠的斷頭張口呼吸時間，即能使腦耗能減少，對斷頭腦缺氧具有保護(hù)作用。表明左旋龍腦對小鼠的腦缺氧死亡有明顯改善作用。

左旋龍腦對在密閉缺氧容器中小鼠注射異丙腎上腺素后使心率加快，心肌收縮力增強(qiáng)的耗氧量增加無明顯作用。

亞硝酸鈉可使血紅蛋白變成高鐵血紅蛋白，失去攜帶氧的功能，最終會導(dǎo)致機(jī)體心、腦等重要器官、組織供氧不足而死亡。左旋龍腦對亞硝酸鈉所致小鼠內(nèi)缺氧無明顯拮抗作用。

氰化鉀被人體吸收后，立即水解為氫氰酸，吸收進(jìn)血液，細(xì)胞色素氧化酶的Fe3＋與血液中的CN－相結(jié)合生成氰化高鐵細(xì)胞色素氧化酶，使Fe3＋喪失了傳遞電子的能力，造成呼吸鏈中斷，細(xì)胞窒息死亡［5］。左旋龍腦能顯著延長氰化鉀所致小鼠死亡時間，其抗氰化鉀缺氧作用是通過抑制細(xì)胞色素氧化酶與CN－的結(jié)合發(fā)揮作用。

注射過飽和MgCL2可使小鼠心臟發(fā)生竇性心動過緩、各種情況的傳導(dǎo)阻滯組織，還可使呼吸中樞抑制，呼吸肌麻痹引起死亡，左旋龍腦可顯著延長呼吸中樞麻痹及心臟傳導(dǎo)阻滯所致死亡［6］。

綜上所述，左旋龍腦對小鼠心，腦缺血缺氧有顯著保護(hù)作用?？砷_發(fā)為抗腦缺血缺氧的藥物，其抗腦缺氧缺血作用的機(jī)制，尚需進(jìn)行深入全面的研究。

1 施淑萍，曾靖，黃玉珊，等.茉莉根水提取液的耐缺氧作用研究［J］.時珍國醫(yī)國藥，2005，16（8）：801－802.

2 付曉春，李少鵬，邱蔚芬，等.葒草苷對缺氧模型小鼠的抗缺氧作用研究［J］.中國藥房，2006，l7（9）：654－655.

3 付曉春，王敏偉，李少鵬，等.竹葉提取物的抗缺氧作用［J］.中藥新藥與臨床藥理，2005，16（2）：100－102.

4 迪麗努爾·沙比托夫，朱毅忠，買爾旦·米吉提，等.紅花黃色素對小鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用［J］.中國中醫(yī)藥信息雜志，2006，13（2）：26－27.

5 金惠銘.病理生理學(xué)［M］.第5版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2000，81－83.

6 和宇崢.鎂對心臟活動的影響［J］.衡水學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，11（4）：55－57.