王月嬌 王 偉
(1.吉林省食品藥品檢驗(yàn)所 吉林 長(zhǎng)春 130033;2.吉林大學(xué)第一醫(yī)院二部?jī)嚎?吉林 長(zhǎng)春 130031)
蒲公英(Taraxacum officinale)為菊科多年生草本植物,其營(yíng)養(yǎng)豐富,且具有一定的藥理作用已被國(guó)家衛(wèi)生部已將其列入藥食兩用品種[1]?,F(xiàn)代藥理研究表明蒲公英具有清熱解毒、消腫散結(jié)、抗菌消炎、抗腫瘤、助消化等功效,而關(guān)于其對(duì)乙醇所致急性肝損傷的保護(hù)作用研究較少[2]。因此本實(shí)驗(yàn)旨在通過蒲公英對(duì)乙醇所致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用,進(jìn)一步探討蒲公英的藥理藥效作用,為蒲公英的綜合利用開發(fā)提供參考依據(jù)。
干品蒲公英由長(zhǎng)白山林業(yè)局提供,無水乙醇購(gòu)自北京化工廠,ALT、AST、ALP、ALB、TP和 TC試劑盒均購(gòu)自中生北控生物科技股份有限公司。
性成熟健康昆明種小鼠由吉林省長(zhǎng)春市高新醫(yī)學(xué)動(dòng)物試驗(yàn)研究中心提供,許可證號(hào)SCXK-(吉)2003-2004。
1.3.1 蒲公英水煎液的制備
取干燥蒲公英10g,加入500ml蒸餾水浸泡30min后,煮沸30min,收集藥液。重復(fù)煎煮兩次,把上述3次水煎藥液混勻,過濾,沸騰水浴濃縮至10ml,使水煎液1ml相當(dāng)于生藥1g,4℃冰箱保存[3]。
1.3.2 蒲公英水煎液對(duì)乙醇所致小鼠肝損傷保護(hù)作用研究
選取昆明種雄性小鼠50只,18-22g,每組10只,隨機(jī)分為給藥高、中、低劑量組、空白對(duì)照組和模型對(duì)照組。給藥組分別以蒲公英水煎液5g/kg.BW、1.25g/kg.BW、0.25g/kg.BW灌胃,空白對(duì)照組和模型對(duì)照組給予蒸餾水,連續(xù)30天。第31天給予給藥組和模型對(duì)照組50%乙醇12mL/kg.BW灌胃,空白對(duì)照組給予蒸餾水。
1.3.3 觀察項(xiàng)目
禁食16h后,進(jìn)行眼眶靜脈取血,3500rpm/min,離心10min,分離收集血清,測(cè)定血清中 ALT、AST、ALP、ALB、TP 和 TC 水平。
測(cè)得各項(xiàng)指標(biāo)所得數(shù)據(jù)采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)分析。
由試驗(yàn)結(jié)果表2可知,模型對(duì)照組小鼠的血清ALT極顯著高于正常對(duì)照組,蒲公英高、中、低劑量組小鼠的血清ALT與模型對(duì)照組比較極顯著下降,且隨著劑量增高而下降。模型對(duì)照組小鼠的血清AST極顯著高于正常對(duì)照組,蒲公英高、中、低劑量組小鼠的血清AST與模型組比較均有明顯下降,且蒲公英高和中劑量組差異極顯著。模型對(duì)照組小鼠的血清ALP極顯著高于正常對(duì)照組,且蒲公英高、中劑量組較模型對(duì)照組極顯著降低。表明乙醇所致小鼠急性肝損傷模型成功,且蒲公英對(duì)乙醇所致小鼠急性肝損傷中ALT、AST、ALP指標(biāo)具有一定影響。
表1 蒲公英水煎液對(duì)乙醇所致肝損傷小鼠血清中ALT、AST 和 ALP 的影響(xˉ±S,n=20)
由試驗(yàn)結(jié)果表2可知,模型對(duì)照組與正常對(duì)照組比較,血清ALB和TP極顯著降低,蒲公英高、中和低劑量組可明顯提高大鼠血清ALB和TP,且高和中劑量組差異極顯著。模型對(duì)照組小鼠的血清TC極顯著高于正常對(duì)照組,蒲公英各劑量組可使升高的TC顯著降低,且與模型對(duì)照組比較有極顯著差異。表明蒲公英對(duì)乙醇所致小鼠急性肝損傷中ALB、TP、TC指標(biāo)具有一定影響。
表2 蒲公英水煎液對(duì)乙醇所致肝損傷小鼠血清中ALB、TP 和 TC 的影響(xˉ±S,n=20)
酒精性肝損傷是指酒精及其代謝產(chǎn)物乙醛等直接或通過免疫機(jī)制損害肝細(xì)胞,發(fā)生肝細(xì)胞脂肪變性、酒精性肝炎、肝纖維化、肝硬化,是酒精性肝病發(fā)生發(fā)展的最基本病理狀態(tài)[4]。肝臟具有復(fù)雜而精細(xì)的代謝功能,其代謝功能依賴于肝內(nèi)酶的作用。診斷肝損傷嚴(yán)重程度的常用酶類有ALT、AST和ALP,并且可通過測(cè)定血清中ALB、TP和TC指標(biāo)來分析肝損傷的程度[5]。
ALT廣泛存在于人體的肝臟、心肌、骨骼肌、腎臟等組織中,而以肝細(xì)胞內(nèi)含量為最高,AST主要存在于肝細(xì)胞線粒體中[6]。ALP是一組同工酶,主要來源于肝、腎、腸和胎盤,其中以肝源性和骨源性為主,目前認(rèn)為,肝膽疾病時(shí),肝細(xì)胞在膽汁淤積、炎癥、癌腫等刺激下過量制造ALP,后者經(jīng)淋巴道和肝竇進(jìn)入循環(huán)。在正常情況下,肝細(xì)胞膜能將細(xì)胞內(nèi)的酶保持在細(xì)胞內(nèi),維持肝細(xì)胞與肝竇狀隙之間存在的一個(gè)明顯酶濃度梯度。通過本試驗(yàn)研究結(jié)果可知,蒲公英高、中、低劑量組對(duì)乙醇所致小鼠急性肝損傷中血清ALT、AST和ALP指標(biāo)較模型對(duì)照組都有明顯下降,并呈一定的量效關(guān)系。說明蒲公英能有效保護(hù)乙醇所致急性肝損傷的酶類。
ALB是最豐富的血漿蛋白,由肝細(xì)胞產(chǎn)生,ALB的主要功能是維持血漿滲透壓和作為藥物、激素、代謝廢物,入膽紅素的運(yùn)輸?shù)鞍?,也可作為合成其他蛋白質(zhì)的氨基酸來源。ALB濃度是肝硬化失代償和預(yù)后的標(biāo)志。TP在肝病時(shí)一般不降低,在急性肝壞死時(shí),一周后可降低,亞急性肝炎和肝硬化腹水時(shí),TP常降低。肝臟是合成、儲(chǔ)藏和供給TC的主要器官,由于酯化TC的酶是肝臟合成分泌的,因此測(cè)定膽固醇酯在總TC中的比例還有助于了解肝功能的情況。通過本試驗(yàn)研究結(jié)果可知,蒲公英高、中、低劑量組對(duì)乙醇所致小鼠急性肝損傷中ALB和TP較模型對(duì)照組升高且TC降低,說明蒲公英能有效的保護(hù)乙醇所致急性肝損傷的蛋白類。
通過本試驗(yàn)研究,表明蒲公英對(duì)乙醇所致小鼠急性肝損傷具有有效的保護(hù)作用。
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