ERCC-1和COX-2在非小細胞肺癌中的表達及其臨床意義

樊志明，黃超紅，鄭宏瑩，賀鴻桂

(解放軍第422醫(yī)院腫瘤科，廣東湛江524009)

ERCC-1和COX-2在非小細胞肺癌中的表達及其臨床意義

樊志明，黃超紅，鄭宏瑩，賀鴻桂

(解放軍第422醫(yī)院腫瘤科，廣東湛江524009)

目的探討ERCC-1和COX-2在非小細胞肺癌中的表達水平，分析兩者與非小細胞肺癌患者預后的相關性。方法采用免疫組織化學法檢測96例非小細胞肺癌組織中的ERCC-1和COX-2表達水平，分析兩者與臨床病理參數間的相關性。結果ERCC-1與NSCLC的病理相關性分析顯示，病理類型、TNM分期及預后與ERCC-1的陽性表達密切相關(P＜0.05)。COX-2與NSCLC的病理相關性分析顯示，病理類型、分化程度與COX-2的陽性表達密切相關(P＜0.05)。ERCC-1蛋白表達與COX-2蛋白表達的相關性分析顯示ERCC-1和COX-2蛋白表達不相關。結論COX-2蛋白及ERCC-1在NSCLC中均有不同程度的表達，檢測COX-2及ERCC-1表達對NSCLC預后的判斷具有一定價值。

ERCC-1；COX-2；非小細胞肺癌

肺癌是最常見的肺原發(fā)性惡性腫瘤，其發(fā)病率及死亡率均居全球各類腫瘤的首位，肺癌患者5年生存率低于15.7%[1]，其中非小細胞肺癌(Non-small cell lung cancer，NSCLC)占肺癌發(fā)病率的80%[2]。環(huán)氧合酶-2(Cyclooxygnase-2，COX-2)是一種過度表達可促進腫瘤細胞增殖的誘導酶。DNA切除修復交叉互補基因-1(Excision repair cross-complementation group 1，ERCC-1)為DNA修復密切相關的基因，多數作者認為其與腫瘤分化密切相關。有關ERCC-1和COX-2表達在非小細胞肺癌中的臨床意義并不清楚，為此，本文著重探討ERCC-1和COX-2在非小細胞肺癌組織中的表達及相關性，現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料收集我院2004年6月至2008年 12月行手術治療的非小細胞肺癌(NSCLC)患者96例，其中男63例，女33例。年齡37～81歲，平均(58.2±8.9)歲。病理類型中腺癌56例，鱗癌29例，粘液表皮癌5例，腺鱗癌6例。分化程度中低分化55例，高分化41例。所有患者術前均給予放療、化療以及免疫治療，術后隨訪36個月。

1.2 方法腫瘤組織標本于術后收集，石蠟包埋后制成蠟塊，4μm切片后行SP法免疫組織化學染色。石蠟切片脫蠟至水后磷酸鹽緩沖液(PBS)液洗兩次，每次5 min。高壓鍋抗原修復后PBS液洗兩次，每次5 min。滴加血清封閉液20 min，甩去多余液體分別滴加ERCC-1(福州邁新公司)、COX-2一抗(北京中杉金橋生物技術有限公司)，放置1 h后PBS洗3次，每次2 min。滴加試劑SABC 20 min，PBS洗4次，每次5 min。DAB試劑盒顯色，蒸餾水清洗后采用蘇木素復染，酒精分化、脫水、透明、封片并鏡檢。

1.3 評估方法根據染色細胞比例及染色強度對ERCC-1和COX-2表達進行分析，其中ERCC-1和COX-2染色中細胞核染色呈棕黃色顯示陽性，細胞核無著色或者細胞漿無著色顯示陰性。在陽性表達較為集中的切片中選取5個高倍鏡視野，每視野計數200個細胞，取平均數，其中＜5%：0分，5%～30%：1分，31%～70%：2分，≥71%：3分。著色強度中，陰性：0分；弱陽性：1分；陽性：2分；強陽性：3分。兩組數據相乘，其中0～1分為(-)，1～2分為(+)，3～4分為(++)，5分以上為(+++)。

1.4 統(tǒng)計學處理數據采用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件分析，計量資料采用t檢驗；計數資料比較采用χ2檢驗；等級資料比較采用Kruskal-Wallis H檢驗，兩者之間的相關性采用Pearson檢驗，其中P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 各指標中ERCC-1與NSCLC病理特征相關性病理類型、TNM分期及預后與ERCC-1的陽性表達密切相關(P＜0.05)。腺癌患者(++～+++)程度表達39.3%，鱗癌表達17.2%，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。預后≤3年患者(++～+++)程度表達15.4%，預后＞3年患者表達為40.4%，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。TNM分期方面，Ⅰ～Ⅱ期患者(++～+++)程度表達40.0%，Ⅲ～Ⅳ期表達13.9%，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。具體見表1。

表1 各指標中ERCC-1與NSCLC病理特征相關性(例)

2.2 各指標中COX-2與NSCLC病理特征相關性病理類型、分化程度與COX-2的陽性表達密切相關(P＜0.05)。腺癌患者(++～+++)程度表達64.3%，鱗癌表達37.9%，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜ 0.05)。分化程度中，高分化肺癌患者(++～+++)程度表達為43.9%，中低分化表達為60.0%，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，具體見表2。

組別分類例數P值性別男女＞0.05年齡＞0.05病理類型＜0.05分化程度＜0.05預后＞0.05 TNM分期≤60歲＞60歲鱗癌腺癌高分化中低分化≤3年＞3年Ⅰ～Ⅱ期Ⅲ～Ⅳ期＞0.05淋巴結轉移有無63 33 54 42 29 56 41 55 39 57 60 36 44 52 COX-2 -～+(n=45) 29 16 26 19 18 20 23 22 17 28 26 19 20 25 ++～+++、(n=51) 34 17 28 23 11 36 18 33 22 29 34 17 24 27＞0.05

2.3 ERCC-1和COX-2蛋白表達的相關性非小細胞肺癌中的ERCC-1蛋白表達與COX-2蛋白表達進行配對卡方檢驗(χ2＝2.683，P=0.132)，顯示兩組蛋白表達不存在相關性。具體見表3。

表3 ERCC-1和COX-2蛋白表達的相關性分析(例)

3 討論

肺癌是惡性腫瘤患者死亡的主因，我國肺癌的發(fā)病率及死亡率占據惡性腫瘤的首位。肺癌根據生物學行為不同分為小細胞肺癌和非小細胞肺癌，其中非小細胞肺癌占80%左右。肺癌患者生存率較低、預后相對較差，因此，我們需對肺癌具體機制進行深入研究，以期提高肺癌患者診斷率及治愈率。COX是催化花生四烯酸轉移成為內源性前列腺素中的關鍵性限速酶，包括結構型COX-1和誘生型COX-2兩種亞型，正常情況下COX-2在多數正常組織中不表達或者呈低表達，而在幾乎所有的腫瘤組織中均可表達COX-2[3]，其主要通過對腫瘤細胞增殖、分化，抑制腫瘤細胞凋亡及促進腫瘤血管生成等，在腫瘤發(fā)生、發(fā)展、侵襲、轉移等多個過程中均起著較為重要的作用[4-5]。Cianchi等[6]研究中顯示，COX-2在結直腸癌腫瘤上皮細胞中呈現(xiàn)陽性表達，而正常結腸上皮中呈陰性表達。王魯建等[7]研究表明COX-2在NSCLC中呈現(xiàn)過度表達，其表達水平與NSCLC的侵襲、淋巴結轉移以及臨床分期密切相關。本組研究表明，腺癌患者(++～+++)程度表達64.3%，鱗癌表達37.9%，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。分化程度比較中顯示，高分化肺癌患者(++～+++)程度表達43.9%，中低分化表達60.0%，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。研究結果表明COX-2表達陽性程度高的NSCLC患者主要表現(xiàn)為腺癌及分化程度相對較低，COX-2表達表達與NSCLC患者的預后呈一定關系。

ERCC-1位于19號染色體中，是核苷酸剪切修復家族中具有特異性的重要成員之一，其為編碼297個氨基酸的蛋白，在DNA單鏈受損處5’端進行剪切后發(fā)揮作用，ERCC1的表達具有防止腫瘤的發(fā)生、發(fā)展的作用[8]。ERCC-1在NSCLC組織中表達意義因不同腫瘤的臨床分期以及化療與否具有不同的相關性。研究表明，ERCC-1陽性患者的生存期顯著高于陰性表達患者，而晚期接受化療的NSCLC患者中，ERCC-1的高表達患者生存期相對短于低表達的患者[9-10]。而本組研究結果表明，腺癌患者(++～+++)程度表達39.3%，鱗癌表達17.2%，腺癌患者ERCC-1陽性表達顯著高于鱗癌。在生存期分析中，預后≤3年患者(++～+++)程度表達15.4%，預后＞3年患者表達40.3%，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。研究結果表明ERCC-1高表達與非小細胞肺癌患者預后密切相關，陽性表達高患者生存期顯著提高。在TNM分期比較方面，Ⅰ～Ⅱ期患者(++～+++)程度表達40.0%，Ⅲ～Ⅳ期表達13.9%，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結果顯示，ERCC-1陽性表達患者TNM分期分期較低，表明ERCC-1陽性表達高的患者分期較好、患者預后較佳。而在相關性研究方面，ERCC-1蛋白表達與COX-2蛋白表達的配對卡方檢驗結果(χ2=2.683，P=0.132)表明ERCC-1和COX-2蛋白表達不相關，顯示兩組蛋白表達不存在相關性。

綜上所述，筆者認為COX-2蛋白及ERCC-1在NSCLC中均有不同程度的表達，檢測COX-2及ERCC-1表達對NSCLC預后的判斷具有一定價值。

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Expression of ERCC-1 and COX-2 in non-small cell lung cancer and their clinical significance.

FAN Zhi-ming, HUANG Chao-hong,ZHENG Hong-ying,HE Hong-gui.The 422thHospital of PLA,Zhanjiang 524009,Guangdong, CHINA

ObjectiveTo investigate the expression of ERCC-1 and COX-2 in non-small cell lung cancer (NSCLC),and to analyze their correlation with the prognosis of NSCLC.MethodsImmunohistochemistry methods were used to detect the expression levels of ERCC-1 and COX-2 in 96 patients of NSCLC.The correlation between the expression of the two proteins and the clinical pathology were analyzed.ResultsThe pathologic correlation analysis between ERCC-1 and NSCLC revealed that the pathological types,TNM staging and the prognosis were related closely with the positive expression of ERCC-1 protein(P＜0.05).The pathologic correlation analysis between COX-2 and NSCLC showed that the pathological types and differentiation degree were related closely with the positive expression of COX-2 protein,P＜0.05.No correlation was found between the expression of ERCC-1 protein and COX-2 protein.ConclusionCOX-2 and ERCC-1 proteins have different degree of expression in NSCLC.Detecting the expression levels of COX-2 and ERCC-1 is of certain value in the prognosis of NSCLC.

ERCC-1;COX-2;Non-small cell lung cancer

R734.2

A

1003—6350(2012)12—001—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2012.12.001

2012-02-11)

樊志明(1971—)，男，湖北省咸寧市人，主治醫(yī)師，學士。