孫峰瑞，孫冬霞，時(shí)志民，王 蕾，范 建

(1邯鄲市婦幼保健院，河北 邯鄲 056002;2河北工程大學(xué)醫(yī)學(xué)院;3邯鄲市傳染病醫(yī)院)

宮頸癌是危害婦女生命與健康的主要惡性腫瘤之一，其發(fā)病率居女性生殖器惡性腫瘤首位，在導(dǎo)致女性死亡的腫瘤中宮頸癌居于第2位。2009年6月～2011年12月，我們采用免疫組化SP法檢測(cè)宮頸癌組織中 Survivin、尿激酶型纖溶酶原激活劑(uPA)表達(dá)情況，現(xiàn)分析結(jié)果，探討其在宮頸癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。

1 材料與方法

1.1 材料 選取我院2009年1月～2011年12月手術(shù)切除的宮頸癌組織標(biāo)本47份(腫瘤組，患者平均年齡47.5歲;術(shù)前均未行放、化療及激素治療)。病理檢查診斷為宮頸鱗癌40例，宮頸腺癌7例;按2000年FIGO標(biāo)準(zhǔn)，病理分期為Ⅰ期21例、Ⅱ期26例;腫瘤組織為高分化11例、中分化17例、低分化19例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移18例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移29例。同時(shí)選取門(mén)診就診并行宮頸錐形切除術(shù)的宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變(CIN)標(biāo)本35份(瘤變組，患者平均年齡45.2歲)。另選因子宮肌瘤或子宮脫垂而行手術(shù)切除子宮的正常宮頸組織標(biāo)本21份(正常組，患者平均年齡42.3歲)。各組一般資料無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，具有可比性。

1.2 Survivin、uPA表達(dá)檢測(cè) 采用免疫組化 SP法，按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，取已知乳腺癌組織切片作為陽(yáng)性對(duì)照，以PBS緩沖液代替一抗作為陰性對(duì)照。常規(guī)免疫組化SP試劑盒，鼠抗人Survivin多克隆抗體和鼠抗人uPA單克隆抗體均購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。結(jié)果判斷:Survivin和uPA陽(yáng)性定位于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，細(xì)胞質(zhì)和核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性信號(hào)。每張切片均隨機(jī)觀察5個(gè)高倍視野(×400)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù) ＜5%為(－)，5% ～25%為(+)，26% ～50%為(++)，＞50%為(+++)。+～+++為陽(yáng)性表達(dá)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，相互關(guān)系用等級(jí)相關(guān)分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn) α =0.05。

2 結(jié)果

2.1 Survivin、uPA 陽(yáng)性率 腫瘤組、瘤變組、正常組 Survivin 陽(yáng)性率分別為76.60%(36/47)、37.14%(13/35)、0，uPA 陽(yáng)性率分別為 59.57%(28/47)、31.43%(11/35)、0，腫瘤組、瘤變組均明顯高于正常組，腫瘤組明顯高于瘤變組(P均＜0.05)。

2.2 Survivin、uPA陽(yáng)性表達(dá)與宮頸癌臨床病理參數(shù)的相關(guān)性 見(jiàn)表1。

表1 Survivin、uPA陽(yáng)性表達(dá)與宮頸癌臨床病理參數(shù)的相關(guān)性

2.3 相關(guān)性分析 Survivin、uPA在宮頸癌組織中的表達(dá)呈明顯正相關(guān)(r=0.364，P=0.013)。

3 討論

Survivin是1997年由耶魯大學(xué) Ambrosini等［1］發(fā)現(xiàn)的一種新的凋亡抑制蛋白，是凋亡抑制蛋白(IAP)家族的成員之一，具有調(diào)控細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡的雙重作用，也是迄今發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的凋亡抑制因子［2］。Survivin基因定位于染色體 17q25，全長(zhǎng)14.7 kb，含3個(gè)內(nèi)含子和4個(gè)外顯子，在多數(shù)成人分化成熟的正常組織中檢測(cè)不到，但是在某些惡性腫瘤中Survivin蛋白明顯表達(dá)［3，4］。近年研究表明，其在多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用［5～8］。研究發(fā)現(xiàn)，Survivin高表達(dá)腫瘤與Survivin陰性表達(dá)的腫瘤相比，具有侵襲能力強(qiáng)、對(duì)化療藥物和放射線的反應(yīng)性較差以及生存期較短的特點(diǎn)，因此Survivin被認(rèn)為是一種具有潛在價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物，有可能成為腫瘤治療的新靶點(diǎn)［9］。本研究腫瘤組、瘤變組Survivin陽(yáng)性率均明顯高于正常組，腫瘤組明顯高于瘤變組，提示Survivin表達(dá)可能是宮頸癌發(fā)生的重要機(jī)制之一，檢測(cè)Survivin在宮頸的表達(dá)，有助于早期檢出具有進(jìn)一步惡變傾向的宮頸癌前病變。Survivin表達(dá)與宮頸癌臨床分期、組織分級(jí)及有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，由此推測(cè)Survivin在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中起重要作用，有助于判斷宮頸癌的惡性程度及臨床預(yù)后。

uPA是一種絲氨酸蛋白水解酶，位于10號(hào)染色體的長(zhǎng)臂上，由10個(gè)內(nèi)含子和11個(gè)外顯子構(gòu)成，成熟的mRNA長(zhǎng)度為2.4 kb。uPA能將纖溶酶原激活為纖溶酶，而纖溶酶可降解基質(zhì)和基底膜等成分，在腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用［10］。文獻(xiàn)報(bào)道，uPA在多種惡性腫瘤中均有過(guò)表達(dá)［11，12］。甄紅霞等［13］發(fā)現(xiàn)，uPA在宮頸癌中的活性明顯高于CIN。本研究腫瘤組、瘤變組uPA陽(yáng)性率均明顯高于正常組，腫瘤組明顯高于瘤變組，說(shuō)明uPA在由正常組織、癌前病變到癌逐步演變的過(guò)程中可能具有重要作用。本研究還發(fā)現(xiàn)，Survivin與uPA呈顯著正相關(guān)，說(shuō)明二者在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移過(guò)程中具有協(xié)同作用。

總之，宮頸癌組織中Survivin和uPA處于過(guò)表達(dá)狀態(tài)，檢測(cè)兩者的表達(dá)情況有助于早期宮頸癌的診斷及病情判斷，可為宮頸癌的防治探索新思路。

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