陳紅艷 廖國周 王桂瑛 樊月圓 蘇子峰 廖啟順 楊建發(fā) 程志斌

（1.云南農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學院，云南昆明 650031；2.云南農(nóng)業(yè)大學，云南昆明 650201；3.大理學院農(nóng)學與生物科學學院，云南大理 671003）

安全高效飼料添加劑的使用是保障畜禽健康環(huán)保養(yǎng)殖的關(guān)鍵技術(shù)之一（程志斌等，2011a、b、c；楊俊琦等，2011）。大量研究表明，枯草芽孢桿菌（Bacillus Subtilis）通過調(diào)控畜禽腸道菌群、補充腸道多種內(nèi)源酶不足、改善飼料營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率，顯著提高畜禽生產(chǎn)性能，是替代飼用抗生素的高效飼料添加劑之一（陳亮等，2011；解廣勤等，2011；張博等，2011；卞國順等，2012；成廷水等，2012；侯玉潔等，2012；楊光宇，2012；周映華等，2012a、b）。絲蘭提取物（yucca extracts）能夠有效地減少雞舍氨氣、硫化氫等有害氣體，改善肉雞生長性能的同時降低養(yǎng)殖環(huán)境污染（Yeo等，1997；劉春龍等，2005；Windisch 等，2008）。本課題組前期試驗也證明（程志斌等，2012a），將絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌組合使用，能改善規(guī)?；B(yǎng)殖肉雞的生長性能，降低雞舍氨氣和硫化氫濃度，符合當前肉雞規(guī)?；】淡h(huán)保養(yǎng)殖的實際生產(chǎn)需求。本試驗在前期工作基礎(chǔ)上，進一步研究絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌組合使用的效果及機理，為肉雞健康環(huán)保養(yǎng)殖提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與試驗分組

本試驗選擇1日齡新出生的羅斯308（ROSS 308）肉仔雞240只，依據(jù)試驗日糧中絲蘭提取物和枯草芽孢桿菌的使用不同,分為4個試驗處理組,見表1。每個處理組6個重復，每個重復10只，公、母各半。

表1 試驗處理組設(shè)計

1.2 試驗日糧

日糧配方參考《雞飼養(yǎng)標準（NY/T 33—2004）》，結(jié)合云南肉雞養(yǎng)殖實際情況，配制兩階段試驗日糧，基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平見表2。處理組1肉雞日糧添加金霉素，并遵守農(nóng)業(yè)部發(fā)布的《飼料藥物添加劑使用規(guī)范》；處理組2日糧添加枯草芽孢桿菌，添加量為5×1011cfu/kg全價日糧，枯草芽孢桿菌由云南師范大學生命科學學院（云南昆明）提供；處理組3日糧添加絲蘭提取物（富蘭寶，美國DPI公司，美國），添加量為120 mg/kg全價日糧；處理組4同時添加絲蘭提取物（120 mg/kg全價日糧）和枯草芽孢桿菌（5×1011cfu/kg全價日糧）。試驗日糧低溫（65℃）制粒。

表2 基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗肉雞采用籠養(yǎng)方式飼養(yǎng)于同一雞舍，單籠為1個試驗組重復，試驗在云南農(nóng)業(yè)大學試驗雞場進行。按常規(guī)免疫程序進行免疫，專人負責飼養(yǎng)試驗。自然光照輔以人工照明，光照時間22 h，試驗周期42 d。

1.4 測定指標

1.4.1 生長性能

測定體重、飼料消耗，計算平均日增重、平均日采食量、料重比（飼料轉(zhuǎn)化效率）等生長性能指標。

1.4.2 飼料養(yǎng)分利用率

采用Cr2O3指示劑法，在肉雞15～21日齡和36～42日齡進行飼料營養(yǎng)物質(zhì)的表觀代謝率測定，預飼4 d,正式代謝試驗3 d,具體方法參考丁雪梅等(2011)報道。

1.4.3 脲酶活性

試驗肉雞21日齡和42日齡早晨空腹稱重后，每個試驗重復組隨機抽取2只健康肉雞（1公、1母）處死，取小腸和大腸組織，分析脲酶活性，具體方法參考Yeo等（1997）的報道。脲酶活性單位（1 U國際單位）定義為：1 g腸組織培養(yǎng)物37℃條件下每30 min分解尿素的毫摩爾數(shù)。分析測定在云南省動物營養(yǎng)與飼料科學重點實驗室完成。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析和組間多重比較，P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對肉雞生長性能的影響（見表 3）

表3 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對肉雞生長性能的影響

試驗全期平均日增重和料重比指標，處理組4肉雞顯著優(yōu)于處理組1（P＜0.05），而處理組2和3之間差異不顯著（P＞0.05）。此外，所有處理組之間肉雞平均日采食量無顯著差異（P＞0.05）。

2.2 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對肉雞飼料養(yǎng)分利用的影響（見表4）

表4 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對肉雞飼料養(yǎng)分利用的影響(%)

肉雞對飼料粗蛋白的表觀代謝率指標，在肉雞19～21日齡和40～42日齡階段，均表現(xiàn)為處理組2和4 顯著大于處理組 1（P＜0.05）。19～21 日齡階段肉雞對飼料代謝能利用率指標，處理組4顯著大于處理組1(P＜0.05),處理組2和3之間差異不顯著(P＞0.05)。此外,其他測定指標，4個處理組之間無顯著差異(P＞0.05)。

2.3 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對肉雞腸道脲酶活性的影響（見表5）

肉雞21日齡，處理組1小腸和大腸組織脲酶活性均顯著大于（P＜0.05）其他3個處理組，其中處理組4小腸組織脲酶活性數(shù)值最低。肉雞42日齡，小腸和大腸組織脲酶活性所有處理組之間無顯著差異（P＞0.05）。

表5 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對肉雞腸道脲酶活性的影響(U/g)

3 討論

3.1 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對肉雞生長性能的影響

試驗全期采食單獨添加枯草芽孢桿菌日糧的處理組2肉雞平均日增重顯著大于使用飼用抗生素的處理組1肉雞。單獨添加絲蘭提取物的處理組3肉雞平均日增重、末體重、料重比等生長性能指標，雖有優(yōu)于處理組1的趨勢，但數(shù)據(jù)統(tǒng)計差異不顯著。同時添加枯草芽孢桿菌和絲蘭提取物的處理組4肉雞平均日增重、末體重、料重比顯著優(yōu)于處理組1（P＜0.05）。以上結(jié)果說明：肉雞日糧中添加枯草芽孢桿菌或絲蘭提取物均能改善肉雞生長性能，而枯草芽孢桿菌的改善效果更明顯，且枯草芽孢桿菌和絲蘭提取物組合使用具有協(xié)同效應，肉雞生長性能更好。本試驗結(jié)果與我們過去的報道（程志斌等，2012a）及前人的結(jié)論（張博等，2011；卞國順等，2012）一致。

3.2 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對肉雞飼料養(yǎng)分利用的影響

畜禽良好的生產(chǎn)性能取決于對飼料營養(yǎng)物質(zhì)的充分消化、吸收與利用（Cheng等，2006；程志斌等，2011d、e、f；程志斌等，2012b、c），采用 Cr2O3指示劑法測定的飼料養(yǎng)分表觀代謝率能夠客觀反映肉雞對日糧的消化與利用狀況（丁雪梅等，2011）。表4結(jié)果顯示：采食添加枯草芽孢桿菌日糧的處理組2和4肉雞對飼料粗蛋白的表觀代謝率顯著大于使用飼用抗生素的處理組1。這與表3肉雞平均日增重的結(jié)果基本相符，充分說明日糧添加枯草芽孢桿菌有利于提高肉雞對飼料蛋白的消化吸收，從而改善肉雞的生長性能。我們的結(jié)果也印證了過去關(guān)于枯草芽孢桿菌具有補充或維持動物腸道多種消化酶，增加營養(yǎng)攝入而改善畜禽生長性能的機理（Chen等，2009；鮑振國等，2012；劉星等，2012）。

肉雞對飼料粗蛋白質(zhì)營養(yǎng)利用率的提高意味著糞尿中飼料氮排放的減少，這對降低高密度、規(guī)?；F(xiàn)代肉雞養(yǎng)殖舍有害氣體濃度，保障肉雞健康環(huán)保養(yǎng)殖有積極意義（白兆鵬等，2011；李連任，2012；唐艷林，2012）。因此，本試驗結(jié)果也支持了我們的前期報道（程志斌等，2012a）：日糧添加枯草芽孢桿菌不僅提高肉雞的生長性能，也能有效降低雞舍氨氣和硫化氫的濃度，降低養(yǎng)殖環(huán)境污染。

3.3 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對肉雞腸道脲酶活性的影響

氨氣和硫化氫是規(guī)?；B(yǎng)殖場空氣污染的主體(白兆鵬等，2011)，關(guān)于絲蘭提取物降低養(yǎng)殖環(huán)境空氣污染的內(nèi)容已有大量報道（Yeo等，1997；劉春龍等，2005；Windisch等，2008），我們前期試驗也發(fā)現(xiàn)（程志斌等，2012a）：就改善養(yǎng)殖環(huán)境空氣污染的作用效果而言，絲蘭提取物對減少雞舍氨氣和硫化氫的效果優(yōu)于枯草芽孢桿菌。劉春龍等（2005）認為，絲蘭提取物可能通過改善飼料養(yǎng)分利用率、與有害氣體結(jié)合、抑制脲酶活性等多種途徑，綜合降低養(yǎng)殖場有害氣體污染。因此，本試驗在測定肉雞對飼料養(yǎng)分利用的基礎(chǔ)上，進一步分析了肉雞腸道組織的脲酶活性。

表5結(jié)果顯示：21日齡肉雞的小腸和大腸組織脲酶活性指標,處理組1均顯著大于其他3個處理組,其中處理組4小腸組織脲酶活性數(shù)值最低。這一結(jié)果似乎說明絲蘭提取物不僅能夠有效降低肉雞腸道脲酶活性，減少養(yǎng)殖舍空氣污染，而且枯草芽孢桿菌也具有相似的功能。然而，當前國內(nèi)外動物營養(yǎng)學家對絲蘭提取物添加劑是否通過降低畜禽腸道脲酶活性而減少空氣污染，存在一定爭議（Yeo等，1997；劉春龍等，2005；Windisch 等，2008）。本次試驗（表 5）也佐證了這一觀點：42日齡肉雞的小腸和大腸組織脲酶活性，所有處理組之間無顯著差異。結(jié)合表4飼料養(yǎng)分利用率數(shù)據(jù)，這一結(jié)果難以解釋：絲蘭提取物對減少雞舍氨氣和硫化氫的效果優(yōu)于枯草芽孢桿菌（程志斌等，2012a）。分析表5脲酶活性測定值，我們發(fā)現(xiàn)大部分脲酶測定值的變異系數(shù)較大，因此結(jié)合前人試驗報道我們推測：肉雞的日齡、取樣部位（組織或食糜）、脲酶的測定方法等因素對脲酶活性測定值的影響很大，可能影響試驗最終結(jié)論。鑒于國內(nèi)外畜禽脲酶活性測定的試驗報道較少，這一推測值得我們進一步深入研究。

4 小結(jié)

本試驗證明，枯草芽孢桿菌與絲蘭提取物能提高肉雞對飼料蛋白的消化與利用率，具有協(xié)同改善肉雞生長性能的作用，其作用效果優(yōu)于單一使用。

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