HPD-700型大孔樹脂對(duì)野生越橘花色苷分離的研究

呂春茂，包 靜，孟憲軍，董文軒*，王新現(xiàn)

(1.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110866；2.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110866)

HPD-700型大孔樹脂對(duì)野生越橘花色苷分離的研究

呂春茂1,2，包 靜2，孟憲軍2，董文軒1,*，王新現(xiàn)2

(1.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110866；2.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110866)

采用柱層析法對(duì)野生越橘花色苷分離純化進(jìn)行研究。結(jié)果表明：HPD-700型大孔樹脂對(duì)野生越橘花色苷的分離效果最佳，其適宜的分離條件為樣品液pH2.0、花色苷質(zhì)量濃度0.75mg/mL、最大上樣量22BV、上樣流速0.5mL/min，樣品洗脫最佳乙醇體積分?jǐn)?shù)60%、以流速1.5mL/min速度洗脫時(shí)、洗脫液量5BV為洗脫終點(diǎn)。該工藝生產(chǎn)的花色苷產(chǎn)品為紫黑色粉末，色價(jià)為62.40，回收率為86.20%。

野生越橘；HPD-700大孔樹脂；花色苷；吸附；解吸

越橘為杜鵑花科(Ericaceae)越橘屬(Vaccinium)植物，是多年生落葉或常綠小灌木樹種[1]，小型漿果，成熟果實(shí)藍(lán)紫色或藍(lán)黑色，又名藍(lán)漿果，果肉淡綠色，半透明，皮薄，有獨(dú)特的果香味[2]。越橘果實(shí)含有豐富的花色苷色素，花色苷類物質(zhì)對(duì)人體健康非常有益，具有多種生物活性，如抗氧化及清除自由基、抗突變活性、抗炎癥及抗病毒作用[3]、增強(qiáng)關(guān)節(jié)和軟組織功能[4]、延緩腦神經(jīng)衰老[5]，增強(qiáng)心臟功能和抗癌的獨(dú)特功效[6]，被聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織列為人類五大健康食品之一[7]。國(guó)內(nèi)外對(duì)藍(lán)莓花色苷的研究主要集中在其生理功能方面，而對(duì)野生越橘花色苷純化方面研究較少[8]。由于越橘果實(shí)醇溶性花色苷提取物中含有膠質(zhì)、淀粉、糖類、蛋白質(zhì)、脂肪、有機(jī)酸堿、無機(jī)鹽、重金屬離子等，嚴(yán)重影響花色苷的應(yīng)用范圍，因此花色苷的純化精制是天然花色苷生產(chǎn)加工的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。

在花色苷分離純化方面主要有層析法(包括紙層析、薄層層析、柱層析)、毛細(xì)管電泳、高效液相色譜等方法。目前國(guó)內(nèi)花色苷類色素的純化主要采用大孔樹脂柱層析法，大孔吸附樹脂是近10年發(fā)展起來的一類有機(jī)高分子聚合物吸附劑[9]。大孔樹脂吸附純化法以效率高、質(zhì)量穩(wěn)定、成本低且操作簡(jiǎn)單易行等特點(diǎn)而成為當(dāng)前分離純化天然產(chǎn)物的主要方法[10-11]，已廣泛應(yīng)用于天然色素的分離純化中[12]。本實(shí)驗(yàn)采用柱層析的方法對(duì)野生越橘花色苷分離進(jìn)行研究，篩選出適于越橘果中花色苷分離純化的樹脂類型，并對(duì)其吸附和解吸性能進(jìn)行研究，以期為野生越橘花色苷在食品、藥品領(lǐng)域的開發(fā)利用提供一定的理論依據(jù)，為工業(yè)化生產(chǎn)花色苷提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

野生篤斯越橘(Vaccinium unliginosumL.)，采自長(zhǎng)白山，冰袋冷藏運(yùn)輸，－2 0℃冷凍貯藏。

無水乙醇、鹽酸、氫氧化鈉、檸檬酸、檸檬酸鈉：均為分析純?cè)噭籄B-8、X-5型大孔樹脂 天津南開大學(xué)化工廠產(chǎn)品；D101、HPD-100、HPD-400、HPD-600、HPD-700型大孔樹脂 河北滄州寶恩化工有限公司產(chǎn)品；S-8、NKA-9 上海寶曼生物科技有限公司；WD-6陰離子樹脂 安徽皖東化工有限公司。

UV-2100型可見分光光度計(jì) 上海尤尼柯儀器有限公司；TU-1810型紫外-可見分光光度計(jì) 北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；JY92-Ⅱ超聲波細(xì)胞破碎機(jī) 寧波新芝生物科技股份有限公司；pHS-25型酸度計(jì) 上海日島科學(xué)儀器有限公司；電熱恒溫水浴鍋 常州國(guó)華電器有限公司；RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠；SHB-IIIA 型循環(huán)水真空泵 鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司；SHA-C恒溫振蕩器 常州國(guó)華電器有限公司；DZF-6050型真空干燥箱 上海精宏儀器設(shè)備有限公司；玻璃層析柱(1.6cm×60cm) 上海青浦滬西儀器廠。

1.2 方法

1.2.1 野生越橘花色苷吸收光譜的測(cè)定和工作曲線的制作

用pH3.0的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液配制少量花色苷溶液，在400～750nm范圍內(nèi)對(duì)其進(jìn)行波長(zhǎng)掃描，得到花色苷的吸收光譜圖。準(zhǔn)確稱取越橘花色苷粉末，用pH3.0的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液定容，根據(jù)比耳定律制作花色苷的工作曲線。

1.2.2 野生越橘花色苷粗提物制備

將貯藏于冰箱冷凍室的野生越橘果實(shí)用打漿機(jī)打成糊狀，冷凍過夜后進(jìn)行真空冷凍干燥，收集干燥后粉末備用。取1g花色苷凍干粉用鹽酸體積分?jǐn)?shù)1%、濃度60%的酸性乙醇溶液溶解，經(jīng)超聲波細(xì)胞破碎機(jī)輔助處理，每次50mL、重復(fù)提取3次，收集粗提液后經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得濃縮液，再經(jīng)真空干燥得野生越橘花色苷粗提物粉末，呈紫黑色。

1.2.3 樹脂活化

對(duì)選定的樹脂進(jìn)行預(yù)處理，先用無水乙醇浸泡24h→蒸餾水洗至中性→5%鹽酸浸泡12h→蒸餾水洗至中性→5%氫氧化鈉浸泡12h→蒸餾水洗至中性，備用。

1.2.4 最適樹脂的篩選

準(zhǔn)確稱取1.00g野生越橘花色苷粉狀粗提物用提取液溶解，然后用pH3的檸檬酸﹣檸檬酸鈉緩沖液定容至1000mL，備用。分別稱取2.00g樹脂于250mL錐形瓶中，然后分別加入50mL已經(jīng)配制好的野生越橘花色苷溶液，于30℃，110r/min，24h恒溫振蕩。取上清液在520nm最大吸收波長(zhǎng)測(cè)量吸光度，按照公式測(cè)定各吸附率與解吸率。

其中：A0為原液的吸光度值；A1為樹脂吸附后上清液的吸光度值；A2為吸附飽和的樹脂經(jīng)乙醇解吸后上清液的吸光度值。

通過對(duì)不同樹脂吸附率和解吸率的測(cè)定，篩選出最適樹脂。

1.2.5 洗脫劑的選擇

分別準(zhǔn)確稱取已經(jīng)吸附花色苷飽和的樹脂各0.40g，用蒸餾水沖洗一次，分別使用5mL甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯解吸花色苷，室溫靜止解吸12h，間歇搖動(dòng)。測(cè)定解吸液的吸光度A。

1.2.6 不同流速的動(dòng)態(tài)吸附曲線

準(zhǔn)確稱取10mL預(yù)處理過的HPD-700型大孔樹脂裝柱，配制pH2.0質(zhì)量濃度1mg/mL的越橘花色苷樣液，在室溫條件下進(jìn)行吸附，分別設(shè)定0.5、1.0、1.5、2.0mL/min這4個(gè)不同的流速，每10mL接一個(gè)樣。測(cè)定不同流速對(duì)吸附的影響。

1.2.7 野生越橘花色苷濃度對(duì)動(dòng)態(tài)吸附的影響

分別設(shè)定2.00、1.00、0.50、0.25mg/mL四個(gè)不同花色苷樣液質(zhì)量濃度，調(diào)整其pH2，用預(yù)處理過的HPD-700大孔樹脂裝柱，采用1.0mL/min流速，在室溫條件下進(jìn)行吸附，每10mL接一個(gè)樣。測(cè)定不同濃度對(duì)吸附的影響。

1.2.8 pH值對(duì)動(dòng)態(tài)吸附的影響

準(zhǔn)確稱取10mL預(yù)處理過的HPD-700型大孔樹脂裝柱，采用1.00mg/mL的樣液質(zhì)量濃度，1.0mL/min流速，在室溫條件下進(jìn)行吸附，分別設(shè)定1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0六個(gè)不同的pH值，每10mL接一個(gè)樣。測(cè)定不同pH值對(duì)吸附的影響。

1.2.9 不同洗脫劑流速的動(dòng)態(tài)解吸曲線

準(zhǔn)確稱取10mL已經(jīng)吸附飽和的HPD-700型大孔樹脂裝柱，采用pH2.0體積分?jǐn)?shù)70%乙醇溶液，在室溫條件下解吸，分別設(shè)定0.5、1.0、1.5、2.0mL/min四個(gè)流速，每10mL接一個(gè)樣。測(cè)定不同流速對(duì)解吸的影響。

1.2.10 洗脫劑體積分?jǐn)?shù)對(duì)動(dòng)態(tài)解吸的影響

準(zhǔn)確稱取10mL已經(jīng)吸附飽和的HPD-700型大孔樹脂裝柱，分別設(shè)定30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%八個(gè)洗脫劑體積分?jǐn)?shù)，調(diào)整所有洗脫劑pH2.0，在1.0mL/min流速及室溫條件下進(jìn)行解吸，每10mL接一個(gè)樣。測(cè)定洗脫劑體積分?jǐn)?shù)對(duì)解吸的影響。1.2.11 pH值對(duì)動(dòng)態(tài)解吸的影響

準(zhǔn)確稱取10mL已經(jīng)吸附飽和的HPD-700型大孔樹脂裝柱，采用體積分?jǐn)?shù)50%乙醇溶液，在1.0mL/min流速及室溫條件下進(jìn)行解吸，分別設(shè)定1.0、2.0、3.0、4.0、5.0這5個(gè)不同的pH值，每10mL接一個(gè)樣。測(cè)定pH值對(duì)解吸的影響。

1.2.12 越橘花色苷回收率和色價(jià)的測(cè)定

精確稱取自制的花色苷產(chǎn)品0.05g，用pH3.0的檸檬酸緩沖液定容至100mL容量瓶中，稀釋至一定倍數(shù)，在波長(zhǎng)520nm處測(cè)定其吸光度，計(jì)算色價(jià)。

式中：A為吸光度：m為樣品的質(zhì)量/g；r為測(cè)定吸光度時(shí)所吸取樣品的稀釋倍數(shù)[13]。

2 結(jié)果與分析

2.1 野生越橘花色苷吸收光譜

圖1 越橘果實(shí)花色苷色素緩沖液pH3.0全波長(zhǎng)掃描圖Fig.1 Ultraviolet spectrum of bilberry extraction solution at pH 3.0

由圖1可知，越橘花色苷在pH3.0檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液中，在520nm處有一最大吸收峰，該吸收峰

是花色苷的特征峰465～560nm[15]。由圖2可知，在pH3.0的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液中吸光度與花色苷質(zhì)量濃度成線性關(guān)系，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：A＝0.4311C＋0.0019，R2＝0.9972，式中，A為吸光度，C為花色苷質(zhì)量濃度/(mg/mL)。

2.2 大孔樹脂的篩選

表1 不同大孔吸附樹脂對(duì)越橘花色苷靜態(tài)吸附和解吸的比較Table 1 Comparison of adsorption and desorption efficiencies using different resins

從表1可以看出，在30℃、110r/min、恒溫振蕩24h情況下，不同類型的樹脂對(duì)花色苷的吸附程度不同，吸附率最好的依次是HPD-100、HPD-400、AB-8、HPD-700，而解吸率最好的依次是NKA-9、HPD-600、X-5、HPD-700，綜合考慮吸附率和解吸率，后續(xù)實(shí)驗(yàn)選用HPD-700型作為純化野生越橘花色苷的大孔吸附樹脂。

2.3 洗脫劑的選擇

圖2 不同洗脫劑對(duì)洗脫效果影響Fig.2 Effects of different elution agents on desorption efficiency

由圖2可知，不同洗脫劑對(duì)吸附飽和的HPD-700型大孔樹脂上花色苷的解吸能力依次為：乙醇＞丙酮＞甲醇＞乙酸乙酯，且差異顯著，因此選用乙醇作為HPD-700型大孔吸附樹脂的洗脫劑。

2.4 動(dòng)態(tài)吸附

2.4.1 不同流速的動(dòng)態(tài)吸附曲線

圖3 不同流速的動(dòng)態(tài)吸附曲線Fig.3 Dynamic adsorption curves at the conditions of absorption rates

在0.5、1.0、1.5、2.0mL/min這4個(gè)不同的流速情況下，HPD-700型大孔樹脂對(duì)1mg/mL越橘花色苷樣液pH2.0的吸附曲線見圖3。隨著上樣液體積的增加，流出液中花色苷含量逐漸增加。當(dāng)流出液中花色苷吸光度達(dá)到上樣液花色苷吸光度的1/10時(shí)，被認(rèn)為已經(jīng)出現(xiàn)泄漏[16]。由圖3可知，上樣液體積達(dá)到220mL時(shí)出現(xiàn)泄漏。隨流出液體積的增大，其花色苷的吸光度也逐漸增加，樹脂對(duì)花色苷的吸附百分比逐漸下降。上樣液流速低，花色苷的泄漏率也比較低。本實(shí)驗(yàn)上樣流速0.5mL/min時(shí)HPD-700型樹脂對(duì)花色苷有較好的吸收。

2.4.2 越橘花色苷質(zhì)量對(duì)動(dòng)態(tài)吸附的影響

圖4 花色苷質(zhì)量濃度對(duì)動(dòng)態(tài)吸附的影響Fig.4 Effect of anthocyanins concentration on adsorption efficiency

由圖4可見，HPD-700型大孔吸附樹脂對(duì)野生越橘花色苷的吸附能力隨著花色苷質(zhì)量濃度的降低而增加，但花色苷質(zhì)量濃度為1.00mg/mL時(shí)與質(zhì)量濃度0.50、0.25mg/mL的差異不大。根據(jù)實(shí)際效率和經(jīng)濟(jì)效益考慮，選擇1.00mg/mL作為動(dòng)態(tài)吸附中花色苷質(zhì)量濃度。

2.4.3 pH值對(duì)動(dòng)態(tài)吸附的影響

由圖5可知，不同pH值對(duì)HPD-700型大孔吸附樹脂動(dòng)態(tài)吸附的影響并不顯著，但是對(duì)花色苷的顯色有很大的影響，在pH小于3時(shí)影響最小，而pH值過低又會(huì)影響花色苷的結(jié)構(gòu)，故本實(shí)驗(yàn)選擇pH2。

圖5 pH值對(duì)動(dòng)態(tài)吸附的影響Fig.5 Effect of pH on adsorption efficiency

2.4.4 正交試驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)單因素結(jié)果設(shè)計(jì)三因素三水平正交試驗(yàn)。正交試驗(yàn)因素及水平見表2，正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見表3?？梢钥闯?，各因素對(duì)HPD-700型大孔吸附樹脂吸附率影響的主次順序是B＞A＞C，即花色苷質(zhì)量濃度＞流速＞pH值。確定的最佳提取條件為A1B1C2，即流速0.5mL/min、花色苷質(zhì)量濃度0.75mg/mL、pH2.0。

表2 HPD-700型大孔吸附樹脂動(dòng)態(tài)吸附L9(33)正交試驗(yàn)因素及水平Table 2 Factors and levels of orthogonal tests for optimizing the absorption of HPD-700

表3 HPD-700型大孔吸附樹脂動(dòng)態(tài)吸附L9(33)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 3 Design and results of orthogonal tests for optimizing the absorption of HPD-700

確定最佳吸附條件為流速0.5mL/min、花色苷質(zhì)量濃度0.75mg/mL、pH2.0。在此條件下對(duì)HPD-700 型大孔吸附樹脂的吸附率進(jìn)行測(cè)定，求得吸附率為97.12%，說明吸附工藝得到優(yōu)化。

2.5 動(dòng)態(tài)解吸

2.5.1 不同流速的動(dòng)態(tài)解吸曲線

圖6 不同流速的動(dòng)態(tài)解吸曲線Fig.6 Dynamic desorption curves at the conditions of different desorption rates

由圖6不同流速的動(dòng)態(tài)解吸曲線可以看出，流速為1.0mL/min時(shí)具有最大的解吸能力；且四種流速處理中，3BV的70%乙醇均基本可將吸附在樹脂上的花色苷洗脫下來，當(dāng)洗脫液達(dá)到5BV時(shí)，已解吸下來超過99%的花色苷。曲線的出峰快，洗脫峰集中，無明顯拖尾現(xiàn)象。2.5.2 洗脫劑體積分?jǐn)?shù)對(duì)動(dòng)態(tài)解吸的影響

圖7 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)動(dòng)態(tài)解吸的影響Fig.7 Effect of ethanol concentration on desorption efficiency

由圖7可知，不同洗脫劑體積分?jǐn)?shù)對(duì)花色苷的解吸能力影響較大，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)50%時(shí)，具有最大的解吸能力。

2.5.3 pH值對(duì)動(dòng)態(tài)解吸的影響

圖8 pH值對(duì)動(dòng)態(tài)解吸的影響Fig.8 Effect of pH on desorption efficiency

由圖8可知，在洗脫液達(dá)到3個(gè)柱體積時(shí)，絕大部分的花色苷被解吸下來，且pH2時(shí)具有最大的解吸能力。

2.5.4 HPD-700型大孔吸附樹脂解吸正交試驗(yàn)

根據(jù)單因素結(jié)果設(shè)計(jì)三因素三水平正交試驗(yàn)。正交試驗(yàn)因素及水平見表4，試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見表5。由表5可以看出，通過極差的大小確定各因素對(duì)HPD-700型大孔吸附樹脂解吸率影響的主次順序是C＞B＞A，即pH值＞乙醇體積分?jǐn)?shù)＞流速。確定的最佳提取條件為A3B3C1，即流速1.5mL/min、乙醇體積分?jǐn)?shù)為60%、pH1.0。在此條件下對(duì)HPD-700 型大孔吸附樹脂的解吸率進(jìn)行測(cè)定，求得解吸率為80.37%，說明解吸工藝得到優(yōu)化。

表4 HPD-700型大孔吸附樹脂解吸L9(33)正交試驗(yàn)因素及水平Table 4 Factors and levels of orthogonal tests for optimizing the desorption of HPD-700

表5 HPD-700型大孔吸附樹脂解吸L9(33)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 5 Design and results of orthogonal tests for optimizing the desorption of HPD-700

2.6 野生越橘花色苷色價(jià)和回收率的測(cè)定

純化后的野生越橘花色苷為紫黑色粉末，其色價(jià)為64.20，回收率為86.20%。

3 結(jié) 論

通過對(duì)10種大孔樹脂的靜態(tài)吸附研究，HPD-700型是一種較好的純化野生越橘花色苷的大孔樹脂；野生越橘花色苷在HPD-700型上的吸附平衡條件為22BV，解吸平衡條件為5BV，在上樣流速0.5mL/min，花色苷質(zhì)量濃度0.75mg/mL，pH2.0的條件下吸附效果最好；采用pH1.0體積分?jǐn)?shù)60%的乙醇溶液，在流速1.5mL/min的條件下洗脫效果好。該工藝生產(chǎn)的花色苷產(chǎn)品為紫黑色粉末，色價(jià)為64.20，回收率為86.20%。

[1] 李亞東. 越橘栽培與加工利用[M]. 長(zhǎng)春: 吉林科學(xué)技術(shù)出版社 , 2001.[2] 孫延玲, 閻瑞香, 李寧, 等. 不同保鮮包裝對(duì)越橘果實(shí)貯藏生理和效果的影響[J]. 保鮮與加工, 2008, 47(4): 27-30.

[3] 徐淵金, 杜琪珍. 花色苷分離鑒定方法及其生物活性[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè), 2006, 32(3): 67-72.

[4] SKUPIEN K, OSZMIANSKI J, DOROTA K N, et al.In vitroantileukaemic actity of extracts from berry plant leaves against sensitive and multidrug restant HL60 cells[J]. Cancer Lett, 2006, 236(2): 282-291.

[5] FRANCIS C L, SHUKITT-HALE B, JAMES A J. The beneficial effects of fruit polyphenols on brain aging[J]. Neuto Aging, 2005, 26(1): 128-132.

[6] YI Weiguang, FISCHER J, KREWER G, et al. Phenolic compounds from blueberrise can inhibit colon cancer cell proliferation and induce apoptosis[J]. J Agric Food Chem, 2005, 53(18): 7320-7329.

[7] 李亞東, 吳林, 張志東. 越橘(藍(lán)莓)栽培與加工利用[M]. 長(zhǎng)春: 吉林科學(xué)技術(shù)出版社, 2000.

[8] YI Weiguang, C A, SIMIR C A, FISCHER J, et al. Effects of phenolic compounds in blueberries and muscadine grapes on Hep G2 cell viability and apoptosis[J]. Food Research International, 2006, 39(5): 628-638.

[9] 王萍, 苗雨. 大孔樹脂對(duì)黑加侖果渣花色苷的純化研究[J]. 哈爾濱商業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào): 自然科學(xué)版, 2008, 24(6): 701-704.

[10] 陳陽(yáng), 王軍華, 滕利榮, 等. 大孔樹脂法純化紅花蕓豆色素及初步鑒定[J]. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào), 2007, 23(6): 237-241.

[11] El-MEKKAWY S, MESELHY M R, NAKAMURA N, et al. Anti-HIV-1 and anti-H IV-1-protease substances fromGanoderma lucidum[J].Phytochemistry, 1998, 49(6): 1651-1657.

[12] FU Boqiang, LIU Jie, LI Huan, et al. The application of macroporous resinsin the separation of licorice flavonoids and glycyrrhizic acid[J].Journal of Chromatography A, 2005, 1089(12): 18-24.

[13] QUAN Qingzhuan, DANG Ruiye, LI Tongsheng. Adsorbing and separating radish red pigment by X-5 resin[J]. Acta Botanica Boreal-Occiden-talia Sinica, 2001, 21(6): 1218-1222.

[14] MA Y H, LI W L, PENG Y F, et al. The extractive technique of red pigment ofBougainvillea spectabiliswild[J]. Food Sciences, 2003, 24(1): 78-80.

[15] 馬卡姆 K R. 黃酮類化合物結(jié)構(gòu)鑒定技術(shù)[M]. 張寶琛, 譯. 北京: 科學(xué)出版社, 1990.

[16] 李穎暢, 鄭鳳娥, 孟憲軍. 大孔樹脂純化藍(lán)莓果中花色苷的研究[J].食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào), 2009, 28(4): 496-500.

Separation of Anthocyanins from Wild Bilberry by HPD-700 Macroporous Resin

LU.. Chun-mao1,2，BAO Jing2，MENG Xian-jun2，DONG Wen-xuan1,*，WANG Xin-xian2(1. College of Horticultural Science, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110866, China；
2. College of Food Science, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110866, China)

In this study, the separation methods of anthocyanins from wild bilberry were investigated. The results showed that the macroporous resin HPD-7 was the optimal absorption material. The optimum conditions of adsorption and desorption were pH 2.0, anthocyanins concentration of 0.75 mg/mL, sample loading volume of 22 BV (resin bed volume) the adsorption speed of 0.5 mL/min, the 60% ethanol volume as the eluent of 5 BV, and the desorption speed of 1.5 mL/min. Under the optimal separation and purification conditions, a purplish dark powder with color value of 62.40 was achieved at the recovery rate of 86.20%.

wild bilberry；HPD-700 macroporous resin；anthocyanins；adsorption；desorption

TS255.1

A

1002-6630(2012)10-0078-06

2011-07-01

沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)博士后基金項(xiàng)目；沈陽(yáng)市青年人才基金項(xiàng)目(1081240-1-02)

呂春茂(1970—)，男，副教授，博士，研究方向?yàn)槭称飞锛夹g(shù)。E-mail：Bt_lcm@126.com

*通信作者：董文軒(1963—)，男，教授，博士，研究方向?yàn)楣麡浞N子資源。E-mail：wxdong63@126.com