楊梅中硒含量測(cè)定的消化方法

蔣步云，柴振林，呂愛華，尚素微，朱杰麗

(浙江省林產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)站，浙江 杭州 310023)

楊 梅 (Myrica rubra Sieb) 是 楊 梅 科(Myricaceae)楊梅屬 (Myrica L.)中的一個(gè)種，是我國(guó)南方特產(chǎn)果樹之一［1］，深受廣大消費(fèi)者的喜愛。楊梅營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富，且有藥用價(jià)值，含有碳水化合物、有機(jī)酸、蛋白質(zhì)及多種維生素等成分，具有生津止渴、和胃消食、益腎利尿和解暑止瀉之功效，同時(shí)也具有抗氧化和抗衰老的作用［2-3］。硒是人體必不可少的微量元素之一，具有抗氧化、保護(hù)心血管、解毒、防癌和提高免疫力等作用［4-5］。隨著科技的進(jìn)步，人們生活水平的提高，富硒楊梅開始日益走俏。但何謂富硒，楊梅中硒含量究竟有多少等等都是重點(diǎn)關(guān)注的問題，因此，準(zhǔn)確、快速地測(cè)定楊梅中硒的含量顯得尤為重要。

目前，測(cè)定硒的方法主要有原子光譜法、吸光光度法、熒光光度法、電化學(xué)法及色譜法等，各種聯(lián)用技術(shù)也已經(jīng)用于硒的測(cè)定及形態(tài)分析［6］。本實(shí)驗(yàn)使用的是氫化物原子熒光光譜法。原子熒光法測(cè)定的范圍寬，具有方法簡(jiǎn)單、靈敏度高、準(zhǔn)確性好的特點(diǎn)［7］。應(yīng)用氫化物原子熒光光譜法測(cè)定必須對(duì)樣品進(jìn)行消解，為提高測(cè)定結(jié)果的正確性和效率，進(jìn)行了微波消解法和濕法消解 (電熱板加熱消解)法對(duì)測(cè)定結(jié)果影響的實(shí)驗(yàn)?，F(xiàn)將有關(guān)結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器

AFS-930 型雙道原子熒光光度計(jì) (北京吉天儀器有限公司)，Multiwave3000 微波消解儀 (奧地利安東帕公司)，可控式電爐，硒空心陰極燈等。

1.1.2 試劑

硝酸，高氯酸，鹽酸 (優(yōu)級(jí)純)，過(guò)氧化氫(分析純)，硼氫化鉀溶液10 g·L-1，硒標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液100 mg·L-1，硒標(biāo)準(zhǔn)使用液0.1 mg·L-1，載流5%鹽酸溶液，10 g·L-1鐵氰化鉀溶液 (掩蔽劑:可明顯消除Pb、Cu 的干擾［8］)，標(biāo)準(zhǔn)茶葉對(duì)照樣 (國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，樣品編號(hào)GSB-7)。

1.2 方法

1.2.1 原理

樣品經(jīng)酸加熱消化后，在6 mol·L-1鹽酸介質(zhì)中，將試樣中的六價(jià)硒還原成四價(jià)硒，用硼氫化鉀作還原劑，將四價(jià)硒在鹽酸介質(zhì)中還原成硒化氫，由載氣(氬氣)帶入原子化器中進(jìn)行原子化，在硒空心陰極燈照射下，基態(tài)硒原子被激發(fā)至高能態(tài)，在去活化回到基態(tài)時(shí)，發(fā)射出特征波長(zhǎng)的熒光，其熒光強(qiáng)度與硒含量成正比。與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定值［9］。

1.2.2 樣品制備

取楊梅可食用部分打成勻漿后備用，余樣放冷柜冰凍儲(chǔ)藏。

1.2.3 樣品前處理

濕法消解 (電熱板加熱消解)。參考 GB 5009.93—2010 食品中硒的測(cè)定中第1 法 (氫化物原子熒光光譜法)，準(zhǔn)確稱取處理好的待測(cè)試樣1～2.000 g 于消化瓶中，加入混合酸 (硝酸∶高氯酸4∶2)10 mL，蓋上表面皿冷消化過(guò)夜，于次日電爐上加熱。當(dāng)溶液變?yōu)槌吻逋该鞑橛邪谉煏r(shí)，再繼續(xù)加熱至剩余體積2 mL 左右，不可蒸干。冷卻，再加5 mL 6 mol·L-1鹽酸，繼續(xù)加熱至溶液變?yōu)槌吻逋该鞑橛邪谉煶霈F(xiàn)，將六價(jià)硒還原成四價(jià)硒。冷卻，用去離子水定容到25 mL 容量瓶中，待測(cè)，同時(shí)做試劑空白。

微波消解法。準(zhǔn)確稱取處理好的待測(cè)試樣0.5～2.000 g 于微波消解罐內(nèi)，加混合酸為4 mL硝酸+3 mL 過(guò)氧化氫，放置過(guò)夜，次日置于微波消解儀器內(nèi)按設(shè)定程序進(jìn)行消解。當(dāng)室內(nèi)溫度低于10℃時(shí)，應(yīng)先放于趕酸架上40℃預(yù)熱10 min 左右，以便微波消解儀能正常啟動(dòng)。程序運(yùn)行結(jié)束后取出反應(yīng)罐冷卻一段時(shí)間，放置于趕酸架上120℃趕酸至剩余2 mL 左右時(shí)取下，冷卻后加入5 mL 6 mol·L-1鹽酸溶液，繼續(xù)放回趕酸架上消化至剩余溶液澄清透明，將六價(jià)硒還原成四價(jià)硒。取下冷卻至室溫，0.5%硝酸溶液定容到25 mL 容量瓶中，待測(cè)，同時(shí)做試劑空白。32 位微波消解儀設(shè)置條件經(jīng)多次試驗(yàn)摸索得到最佳化條件。

1.2.4 測(cè)定方法

原子熒光光度計(jì)儀器工作條件設(shè)置。光電倍增管負(fù)高壓270 V，屏蔽氣流量800 mL·min-1，原子化器溫度200℃，讀數(shù)時(shí)間7 s，原子化器高度8 mm，延遲時(shí)間1.5 s，燈電流80 mA，測(cè)量方式Std.Curve，載氣流量400 mL·min-1，讀數(shù)方式Peak.Area。

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制。取硒標(biāo)準(zhǔn)使用液0.1 mg·L-12.5 mL 到25 mL 容量瓶中，用5%鹽酸溶液稀釋，加入1 mL 鐵氰化鉀溶液為掩蔽劑，定容到刻度線，搖勻作為硒的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。儀器設(shè)置為自動(dòng)進(jìn)樣，標(biāo)準(zhǔn)系列分別為1.000，2.000，4.000，6.000 和10.000 μg ·L-1。得出標(biāo)準(zhǔn)系列濃度(x)與熒光強(qiáng)度 (y)的關(guān)系式:y=15.225 1x-0.871 1，R2=0.999 8。

樣品測(cè)定。向2種消化方法 (微波消解法和濕法消解法)消化好后定容到25 mL 容量瓶中的樣品溶液內(nèi)加入1 mL 10 g·L-1鐵氰化鉀溶液作為掩蔽劑，搖勻，同標(biāo)準(zhǔn)曲線一樣上機(jī)測(cè)定含量。載流為5%鹽酸溶液，還原劑為10 g·L-1硼氫化鉀溶液。

2 結(jié)果與分析

2.1 測(cè)定值

標(biāo)準(zhǔn)茶葉對(duì)照樣GSB-7 經(jīng)過(guò)原子熒光光譜法測(cè)定后，2種消化方法對(duì)結(jié)果的影響見表1。

表1 微波消解法和濕法消解法測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)茶葉對(duì)照樣的結(jié)果

從表1 可知，微波消解法的測(cè)定平均值高于濕法消解法 (電熱板加熱法)的測(cè)定平均值，兩者都在標(biāo)準(zhǔn)值范圍內(nèi)。微波消解法的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差較低，說(shuō)明微波消解標(biāo)樣更完全更徹底，硒含量損失較少且平行性良好。

從2種消化方法處理后得到的待測(cè)楊梅樣品測(cè)定結(jié)果 (表2)來(lái)看，同樣可得出微波消解法優(yōu)于濕法消解法。

表2 微波消解法和濕法消解法測(cè)定楊梅樣品的結(jié)果

2.2 加標(biāo)回收率

對(duì)微波消解法作為消化方法的標(biāo)準(zhǔn)茶葉對(duì)照樣進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，3個(gè)加標(biāo)濃度得到的回收率為90%～110% (表3)，符合加標(biāo)回收的要求，說(shuō)明微波消解法消解楊梅樣品是可行有效的。

表3 微波消解法的加標(biāo)回收率

通過(guò)加標(biāo)回收試驗(yàn)評(píng)估樣品預(yù)處理產(chǎn)生的不確定度。18個(gè)加標(biāo)樣品的平均回收率99.33%，標(biāo)準(zhǔn)偏差S 為2.91%，標(biāo)準(zhǔn)不確定度設(shè)為U (R)，有U (R)=0.008 774，則其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為U (R)/R=0.008 833。

2.3 精密度

對(duì)微波消解法消化標(biāo)準(zhǔn)茶葉對(duì)照樣進(jìn)行11 次精密度試驗(yàn)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.11%，說(shuō)明其符合要求。

3 小結(jié)

在楊梅中硒含量測(cè)定的過(guò)程中，通過(guò)2種消化方法的比較，可以看出微波消解相對(duì)于濕法消解，具有消耗樣品和試劑少、消解徹底、快速簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度高、精密度好等優(yōu)點(diǎn)，是一種較理想的前處理方法，且污染少更利于操作者的安全［10-11］。因此，楊梅中硒含量測(cè)定的消化方法可采用微波消解法。

［1］謝小波，求盈盈，邱立軍，等.堿性土壤對(duì)楊梅生長(zhǎng)結(jié)果的影響［J］.浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2008，20 (4):261-265.

［2］馬瑞，徐麗珊，程躍微，等.不同品種楊梅用途研究［J］.山西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39 (12):1287-1290.

［3］張澤煌，盧新坤，林旗華，等.10個(gè)楊梅品種果實(shí)糖和氨基酸含量分析［J］.浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，23 (7):18-20.

［4］李麗輝，林親錄.食品中硒的生理功能及其檢測(cè)方法［J］.食品工程，2007 (1):28-29.

［5］余光輝，溫琰茂，何樹悠，等.廣州市26種水果中硒含量特征分析［J］.食品科學(xué)，2007，28 (8):344-347.

［6］劉興艷，馬建華，朱靜平，等.食品中硒的分析進(jìn)展［J］.微量元素與健康研究，2005，22 (1):26-28.

［7］袁菊，洪濤，陳鳳凰，等.微波消解一氫化物發(fā)生原子熒光法測(cè)定土壤中硒［J］.貴州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，6 (1):54-56.

［8］彭新元，朱攀.原子熒光光譜測(cè)定土壤中硒的方法研究［J］.實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2008，15 (5):1599.

［9］GB 5009.93—2010，食品中硒的測(cè)定［S］.

［10］侯曉芳，遲忠云，王悅霞.氫化物發(fā)生原子吸收法測(cè)定保健食品中硒含量［J］.海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2009，15(1):55-56.

［11］馮信平.熱帶水果中硒形態(tài)分析的不確定度研究［J］.熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，30 (4):8-11.