劉朋朋,潘激揚,林青華,余輝攀,吳靜義,張宏桂
(北京中醫(yī)藥大學中藥學院,北京 100102)
東北刺人參為五加科植物東北刺人參(Oplopanax elatus Nakai.)的干燥根及根狀莖,有補氣助陽、強心利尿之功效,用于治療多種神經衰弱癥、糖尿病、心血管疾病等,有類似人參之效,為重要的藥用植物[1-2]。東北刺人參含有皂苷、揮發(fā)油等化學成分[3]。目前已有學者研究了其揮發(fā)油的化學成分。利用氣相色譜-質譜聯(lián)用儀(GC-MS)技術分離出刺人參總揮發(fā)油40余個組分,鑒定出其中的30個[4]。東北刺人參揮發(fā)油成分較復雜,不同的提取[5-7]、分離方法,所得結果也不盡相同。筆者按2010版《中國藥典》中水蒸氣蒸餾法提取東北刺人參揮發(fā)油,將揮發(fā)油分成極性不同的兩部位,利用GC-MS技術分別對其化學成分進行分析比較,為東北刺人參揮發(fā)油的活性、開發(fā)應用研究奠定基礎。
1.1 儀器 GCMS-QP5050A氣相色譜-質譜聯(lián)用儀(日本島津公司);水蒸氣蒸餾裝置(自制)。
1.2 材料 乙醚、乙酸乙酯、無水硫酸鈉均為分析純(北京化學試劑廠);刺人參采自吉林省長白山縣,經高士賢教授鑒定為東北刺人參(OplopanaxelatusNakai.)。
2.1 方法
2.1.1 揮發(fā)油的提取 取干燥的東北刺人參5 kg,粉碎后采用揮發(fā)油提取器按《中國藥典》2010版一部附錄XD揮發(fā)油測定法項下甲法操作提取揮發(fā)油[8]。所得揮發(fā)油在乙醚中用無水硫酸鈉干燥12 h,過濾,回收乙醚,得澄清揮發(fā)油液體(A)3.7 g,備用。用乙酸乙酯萃取揮發(fā)油下面蒸餾水層中含有極性較大的揮發(fā)油成分,萃取液用無水硫酸鈉干燥12 h,過濾,回收乙酸乙酯,得到澄清揮發(fā)油液體(B)1.8 g,備用[9]。
2.1.2 氣相色譜條件 HP-5MS毛細管色譜柱(0.25 μm,0.25 mm×30 mm),進樣口溫度 280 ℃,接口溫230℃,載氣為氦氣,流速1 mL/min,分流比為10∶1,進樣量為 1.0 μL,升溫程序:柱始溫 100 ℃,保持4min,再以5℃/min速率升到170℃,保持10min,再以5℃/min速率升到280℃,保持5 min。
2.1.3 質譜條件 EI源,電子能量70 eV,掃描范圍33~500 amu,接口溫度230℃,倍增電壓1.00 kV,掃描速度1000 amu/秒。
2.2 結果用氣相色譜數(shù)據處理系統(tǒng),以峰面積歸一化法測定其中各組分的相對百分含量。按上述GC-MS條件對東北刺人參揮發(fā)油A和B進行分析,各得其總離子流圖。對總離子流圖中的各峰經質譜掃描后得到質譜圖,經過NIST98質譜圖庫檢索,結合人工譜圖解析以及查閱有關質譜資料,從基峰相對豐度等幾個方面進行直觀比較,結果揮發(fā)油A部位分離出了31個色譜峰,見圖1、圖2,鑒定出了20個成分,占總離子峰的92.72%,見表1。揮發(fā)油B部位分離出了18個色譜峰,見圖3、圖4,鑒定出了13個成分,占總離子峰的91.66%,見表2。
從表1可知東北刺人參揮發(fā)油A部位中主要化學成分是橙花叔醇33.94%、T-蓽澄茄醇16.08%、(-)-蓽澄茄油烯醇 5.36%、β-蒎烯 5.07%、a-蒎烯4.06%、香葉烯D 3.74%等,其中橙花叔醇含量最高,其次是T-蓽澄茄醇。從表2可知東北刺人參揮發(fā)油B部位中主要化學成分是橙花叔醇38.40%、T-蓽澄茄醇 28.44%、(-)-蓽澄茄油烯醇 6.62%、α-蓽澄茄醇4.09%、匙桉醇4.03%等,其中橙花叔醇含量最高,其次是T-蓽澄茄醇。
表1 東北刺人參揮發(fā)油A部位化學成分Tab.1 The chemical compostion of A in volatile oil of Oplopanax elatus Nakai
表2 東北刺人參揮發(fā)油B部位化學成分Tab.2 The chemical compostion of B in volatile oil of Oplopanax elatus Nakai
東北刺人參揮發(fā)油A、B兩部位中共有8個相同成分,在共有成分中橙花叔醇、T-蓽澄茄醇、(-)-蓽澄茄油烯醇這3個成分在A、B部位中含量都居前三,但含量有一定差異。東北刺人參揮發(fā)油B部位中含有的基本是醇類物質,A部位含有醇類物質以及烯類物質,因此A、B部位中含有的特征成分基本相同,只是含量不同,另外揮發(fā)油A、B兩部位中個別成分也有差異。
通常情況水蒸氣蒸餾的揮發(fā)油下面水層被棄掉,而本研究對這部分又選用乙酸乙酯進一步萃取極性大的揮發(fā)油,因此得油率增加,減少了損失,更能真實反映東北刺人參揮發(fā)油的含量以及化學成分信息。
通過GC-MS分析發(fā)現(xiàn)東北刺人參揮發(fā)油A、B兩部位中有部分成分交叉存在,B部位中多為含氧化合物,極性相對大,可能活性與A部位活性有一定區(qū)別,因此按此法得到的兩部分更有利分別作活性實驗。
本實驗分析比較了東北刺人參揮發(fā)油A、B兩部位的化學成分,對東北刺人參揮發(fā)油的活性、開發(fā)應用研究提供一定的參考價值。
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