（廣東省江門市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，廣東江門 529000）

新城疫是由新城疫病毒引起的一種急性、高度接觸性傳染病。典型新城疫表現(xiàn)為發(fā)病急，呼吸困難，頭冠紫黑，下痢，泄殖腔出血、壞死，腺胃乳頭、腺胃與肌胃交界處以及十二指腸出血。慢性病例常有呼吸道癥狀或神經(jīng)癥狀。禽出敗又稱禽霍亂或巴氏桿菌病，是由多殺性巴氏桿菌引起的急性傳染病，表現(xiàn)為體溫升高、腹瀉、呼吸困難，死亡率很高[1]。近年來(lái)，新城疫多以非典型出現(xiàn)，發(fā)病率不高，臨床癥狀不明顯，病理變化不典型，死亡率低，臨床判斷的難度加大。而禽出敗在近年又有抬頭的跡象[2]。2013年7月，江門某雞場(chǎng)雞群發(fā)病，經(jīng)了解發(fā)病情況，結(jié)合臨床癥狀、解剖癥狀及實(shí)驗(yàn)室結(jié)果，診斷為新城疫并發(fā)感染禽出敗，現(xiàn)報(bào)告如下：

1 發(fā)病情況

新會(huì)大澤某雞場(chǎng)共有5批雞，分別為74、79、86、110、170日齡，74日齡批次在18日齡注射了三聯(lián)苗；79日齡批次在17日齡注射禽流感疫苗；86日齡批次在16日齡時(shí)注射禽流感疫苗，在24日齡時(shí)注射三聯(lián)苗；110日齡批次在20日齡注射禽流感疫苗，在24日齡注射三聯(lián)苗。雞場(chǎng)79日齡批次雞在9月中旬開(kāi)始發(fā)病，每天死亡約20～30只，隨后各批次雞相繼發(fā)??；曾用過(guò)磺胺類藥物，有好轉(zhuǎn)，但3 d后又復(fù)發(fā)。

2 病理變化

病雞肝臟表面有數(shù)個(gè)針尖大小的灰白色壞死點(diǎn)；心包炎，心冠脂肪出血、心外膜出血；脾臟有大小不一的灰白色壞死點(diǎn)，腎臟腫大，小腸黏膜有出血點(diǎn)，氣管充血出血。

3 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

3.1 細(xì)菌分離培養(yǎng)

（1）取病雞肝臟組織，用點(diǎn)燃的酒精棉輕輕按壓病料表面用以殺滅表面細(xì)菌，用火焰灼燒過(guò)的剪刀在病料表面剪一小口，用灼燒過(guò)的接種環(huán)伸入小口挑取病料。左手持平皿，用其左手拇指、食指及中指將皿蓋揭開(kāi)成最小的角度，角度愈小愈好，以免空氣中的細(xì)菌進(jìn)入皿中將培養(yǎng)基污染。右手持接種環(huán)將病料少許涂布于培養(yǎng)基的邊緣，然后將接種環(huán)上在火焰中灼燒消毒，待接種環(huán)冷卻后，再與涂布魯氏菌病料之處輕輕接觸，新劃線帶與舊劃線帶成120°角，開(kāi)始劃線，劃線時(shí)不應(yīng)劃破培養(yǎng)基。37℃溫箱培養(yǎng)18～24 h后觀察其生長(zhǎng)特性，可見(jiàn)在血液瓊脂平板上形成淡灰色、圓形、濕潤(rùn)、露珠樣小菌落，且不溶血[3]。（2）用針筒吸取生理鹽水，滴一小滴在干凈玻片上，用接種環(huán)鉤取典型菌落涂片，革蘭氏染色后鏡檢，為革蘭氏陰性兩極濃染的球桿菌。

3.2 生化試驗(yàn)

（1）鉤取典型菌落接種血液瓊脂平板進(jìn)行純培養(yǎng)，37℃溫箱培養(yǎng)18～24 h。（2）把待用的生化反應(yīng)管內(nèi)的培養(yǎng)液甩到管的同一極，用砂輪把反應(yīng)管打開(kāi)，用接種環(huán)鉤取純培養(yǎng)物分別接種到葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖、鼠李糖、菊糖、肌醇發(fā)酵管，用已滅菌的固體石蠟封住管口，37℃培養(yǎng)2～3d后觀察結(jié)果。由生化管顏色的變化判斷葡萄糖、果糖、蔗糖被分解，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；不發(fā)酵乳糖、鼠李糖、菊糖、肌醇。（3）用接種環(huán)鉤取純培養(yǎng)物接種蛋白胨水，固體石蠟封口，37℃培養(yǎng)2～3 d后，加入吲哚試劑反應(yīng)，能形成靛基質(zhì)。

根據(jù)細(xì)菌的形態(tài)、著色情況和生化試驗(yàn)結(jié)果確定該細(xì)菌為多殺性巴氏桿菌。

3.3 藥敏試驗(yàn)

（1）按照說(shuō)明書上的配制方法配制海頓肉湯，高溫高壓滅菌后，分裝到滅菌試管里。（2）用一次性注射器針頭挑取純培養(yǎng)物，連針頭一起放進(jìn)裝有海頓肉湯的試管里，用膠塞塞緊，輕輕晃動(dòng)，37℃培養(yǎng)18～24 h備用。（3）用滅菌棉簽粘取菌液，均勻涂布接種至血液瓊脂平板上，均勻的粘貼各藥敏紙片，并記錄每種抗菌藥物藥敏紙片的位置；37℃培養(yǎng)12～18 h，從培養(yǎng)箱中取出觀察結(jié)果，根據(jù)抑菌圈的直徑判斷該菌對(duì)先鋒VI和青霉素高度敏感。

3.4 PCR檢測(cè)

根據(jù)病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果確定該病毒為新城疫病毒。

4 診斷結(jié)果

根據(jù)發(fā)病情況、病理解剖癥狀以及實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌分離、生化試驗(yàn)和病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果，診斷該病為雞新城疫混合感染禽出敗。

5 治療措施

緊急接種新城疫Ⅳ系疫苗，用頭孢拉定和多維混水供飲，用百毒殺帶雞消毒[4]。

6 小結(jié)

（1）經(jīng)過(guò)治療處理，第2 d雞只死亡率迅速降低，6 d后停止死亡，治療效果明顯。（2）經(jīng)過(guò)臨床診斷、解剖診斷和實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，本次疫情為新城疫并發(fā)禽出敗，兩病同時(shí)并發(fā)引起雞群的死亡率很高，因此養(yǎng)殖戶必須要高度重視。（3）養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)根據(jù)本場(chǎng)實(shí)際情況，制定適合本養(yǎng)殖場(chǎng)使用的免疫程序，并同時(shí)做好常規(guī)防疫工作；要做好免疫監(jiān)測(cè)，這樣才能有效減少傳染病的發(fā)生，減少經(jīng)濟(jì)損失。

[1] 辛朝安.禽病學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2003.

[2] 胡洪杰，單既樂(lè)，潘鑫，等.當(dāng)前我國(guó)雞病流行的特點(diǎn)及防制策略[J].山東畜牧獸醫(yī)，2008，29（5）：21-22.

[3] 李元星，陳夏莉.禽出敗的診斷及其防治措施[J].養(yǎng)禽與禽病防治，1999，（4）：36-37.

[4] 黃云.免疫雞群發(fā)生新城疫與禽出敗混合感染的診治[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，2007，（6）：106-107.