孫永泰

（遼寧省遼中縣北一路75號，遼中 110200）

伊維菌素為抗生素類藥，含有2種有效成分，即含有高于80%的22-23-雙氫埃維菌素B1a和低于20%的22-23-雙氫埃維菌素B1b［1］。伊維菌素注射液對線蟲、昆蟲和螨均具有驅(qū)殺作用，《中國獸藥典》［2］規(guī)定其含量測定采用高效液相色譜法，該方法測定結(jié)果準(zhǔn)確，但對實(shí)驗(yàn)設(shè)備要求高，一般獸藥廠難以達(dá)到。筆者等采用紫外分光光度法測定伊維菌素注射液中伊維菌素B1含量，操作簡便、快速，結(jié)果滿意。

1 儀器與試劑

美國UnicamUV-300型紫外分光光度計；伊維菌素原料、伊維菌素注射液由武漢光牧生化科技有限公司提供；伊維菌素對照品源于中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，批號KY31297；甲醇為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 伊維菌素備用溶液的制備

取伊維菌素約40mg，精密稱定，置100 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻即得。

2.2 伊維菌素吸收度測定

吸取上述備用液3 mL，置100 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用紫外分光光度法于200～400 nm測定其吸收度，結(jié)果在238 nm和245nm處有最大吸收，其中245nm處吸收度最大。

2.3 伊維菌素紫外吸收標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

取伊維菌素備用液，分別用甲醇稀釋成4.0、8.0、12.0、16.0、20.0、24.0、28.0 μg/mL 溶液，用甲醇作空白，于1 cm石英比色池中，在245 nm處測定其吸收度，得標(biāo)準(zhǔn)曲線：

C＝26.5404A－0.5323，r＝0.9999

結(jié)果表明，伊維菌素 B1濃度在 4.0～28.0 μg／mL 范圍內(nèi)時與吸收度呈良好線性關(guān)系，符合朗伯－比爾定律。

2.4 回收率試驗(yàn)

加處方比例的溶劑適量，按上法操作，在245 nm處測定其吸收度，符合《中國獸藥典》（2000年版）要求。

精密稱取伊維菌素適量（約含伊維菌素B140 mg）與處方比例的溶劑4 mL，置50 mL容量瓶中，加甲醇定容，搖勻。精密吸取2 mL，用甲醇稀釋至100 mL，搖勻，于245 nm處測定吸收度。另取伊維菌素對照品，按上法同樣操作，根據(jù)二者吸收度比值計算伊維菌素B1含量。5次測定結(jié)果回收率在99.81%～100.31%之間，平均回收率為 100.06%，RSD 為 0.21%（n＝5）。結(jié)果見表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝5）

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取回收試驗(yàn)項下溶液，在室溫、暗處存放不同時間，依次于245nm處測定吸收度，結(jié)果見表2。

由表2結(jié)果可見，伊維菌素4 h內(nèi)吸收度基本保持不變，4h后測各溶液吸收曲線、峰形、λmax均保持不變。

表2 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

2.6 樣品含量測定

2.6.1 紫外法 精密吸取伊維菌素注射液4 mL（含伊維菌素40 mg），置50 mL容量瓶中，加甲醇定容，搖勻，精密吸取2mL置100mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，于245nm處測定吸收度。另取伊維菌素對照品，按上法同樣操作，根據(jù)二者吸收度比值計算伊維菌素B1含量。

2.6.2 高效液相色譜法 精密吸取伊維菌素注射液4mL（含伊維菌素40 mg），置200 mL容量瓶中，加甲醇定容，搖勻，按《中國獸藥典》［2］伊維菌素注射液含量測定方法操作。結(jié)果見表3。

表3 紫外法與高效液相法測定結(jié)果比較%

3 小結(jié)

經(jīng)與高效液相色譜法比較可知，采用紫外分光光度法測定伊維菌素注射液中伊維菌素B1含量，操作簡便，快速，重現(xiàn)性好，結(jié)果滿意。且該方法可定量檢測伊維菌素B1（B1a＋B1b），適用于生產(chǎn)單位對該產(chǎn)品及中間體的含量控制。