■郭艷麗 鐘光柱 王 榮
(甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,甘肅蘭州 730070)
紅芪是多序巖黃芪的干燥根,在中醫(yī)臨床上主要用于補氣固表,利尿托毒、排膿和斂瘡生肌等(國家藥典委員會,2005)。有關(guān)人和鼠的研究表明,紅芪具有提高機體免疫力(王瑋等,2000)、改善心血管系統(tǒng)缺血、缺氧現(xiàn)象(馬海彥等,2009),改善抗氧化機能(海力茜·陶爾大洪等,2007)、抗腫瘤(雷豐豐等,2008)、抗病毒(張宸豪等,2005)以及保護肝臟(任遠(yuǎn)等,2000)等作用。有關(guān)紅芪對畜禽作用的報道較少。來自本研究小組的試驗結(jié)果表明,飼糧中添加紅芪能顯著提高肉雞的粗蛋白質(zhì)、鈣和磷的表觀存留率(鐘光柱等,2010),并能改善肉雞的脂類代謝(郭艷麗等,2010)。尚未見到紅芪對肉雞抗氧化性能和免疫功能影響的研究報道。所以,本研究將以紅芪作為添加劑,研究其對肉仔雞抗氧化性能和免疫功能的影響,為其在飼料中的合理應(yīng)用提供進一步的理論依據(jù)。
選用240只0日齡的AA肉公雛,按體重隨機分為4組,每組6個重復(fù),每個重復(fù)10只。采用三層籠養(yǎng),試驗期0~42 d,分為前期(0~21 d)和后期(22~42 d)兩個階段,自由采食和飲水。于7、21日齡進行新城疫+傳支(二聯(lián))免疫,14、28日齡進行法氏囊免疫。日常管理參照《AA肉仔雞飼養(yǎng)管理手冊》進行。
參照美國NRC(1994)家禽營養(yǎng)需要配制基礎(chǔ)飼糧(見表1),另外在基礎(chǔ)飼糧中分別添加0.5%、1%、2%的紅芪(購自蘭州市安寧醫(yī)藥公司,在60~65℃烘箱中烘干、粉碎、過40目篩),共配制成4種飼糧。
表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平
于試驗第21和42 d,每個重復(fù)選擇1只接近平均體重的雞,空腹12 h后頸部采血,肝素鈉抗凝。用離心機3000 r/min離心15 min后,吸取血漿,一份用于測定T淋巴細(xì)胞陽性率,另一份放于-20℃冰箱保存,用于測定抗氧化性能等指標(biāo)。同時屠宰動物,采集心臟、肝臟和腎臟等組織樣品,同樣于-20℃保存?zhèn)錅y抗氧化性能指標(biāo)。然后摘取胸腺、法氏囊和脾臟,并稱重量,計算免疫器官指數(shù)。
血漿、心臟、肝臟和腎臟中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量等指標(biāo)采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測定。T淋巴細(xì)胞陽性率采用α-醋酸萘酯酶反應(yīng)標(biāo)記法(ANAE+)測定(劉玉斌等,1989)。IgG含量用OlyMPUS-AU400生化分析儀測定。
免疫器官指數(shù)按下式計算:免疫器官指數(shù)(%)=[免疫器官重(g)/活重(g)]×100
采用SPSS10.0對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析,差異顯著時采用Duncan法進行多重比較,顯著性水準(zhǔn)為0.05。
和對照組相比,添加紅芪能顯著提高肉雞21、42日齡血漿和多數(shù)組織的SOD活性(見表2)(P≤0.012),對于GSH-Px活性(見表3),除腎臟外,21和42日齡血漿和其他組織多數(shù)指標(biāo)在紅芪添加組顯著高于對照組(P≤0.024)。另外,抗氧化效應(yīng)在不同組織及不同日齡顯示效應(yīng)的紅芪添加量不同。對于SOD活性,前期肝臟、腎臟和心臟以及后期血漿,添加0.5%處理組就顯示出提高的效應(yīng),且在前期腎臟和心臟,2%處理組進一步提高,顯著高于0.5%和1%添加組;后期肝臟和心臟,在1%處理組顯著升高,且與2%處理組無顯著差異;而前期血漿和后期腎臟,在2%紅芪添加組顯著高于其他三個處理組,其他三組間無顯著差異。就GSHPx活性而言,前、后期血漿在0.5%處理組顯著高于對照組,且三個添加劑量組間無顯著差異;前期肝臟、后期心臟和肝臟,在1%添加組才開始顯著提高,后期心臟和肝臟與2%處理組無顯著區(qū)別,前期肝臟在2%組比1%處理組又進一步提高;前期心臟顯示效應(yīng)的添加劑量是2%。MDA含量在21日齡血漿上表現(xiàn)出添加效應(yīng)(見表4)(P=0.026),在2%添加組顯著低于基礎(chǔ)飼糧組和0.5%添加組。
添加紅芪對肉仔雞免疫功能的影響僅表現(xiàn)在細(xì)胞免疫功能上(見表5)。肉雞21、42日齡的ANAE+百分率在紅芪添加組顯著高于基礎(chǔ)飼糧組,且存在顯著的劑量依賴效應(yīng)(P<0.001),隨著紅芪添加量的提高,其效應(yīng)也顯著提高。其他免疫功能指標(biāo)不受添加紅芪的影響。
表2 紅芪對肉仔雞血漿和組織中SOD活性的影響
表3 紅芪對肉仔雞血漿和組織中GSH-Px活性的影響
表4 紅芪對肉仔雞血漿和組織中MDA含量的影響
表5 紅芪對肉仔雞免疫功能的影響
在集約化的飼養(yǎng)條件下,肉雞受到很多應(yīng)激因素的影響,這些應(yīng)激因素會促使動物體內(nèi)的自由基增多,細(xì)胞受損,影響免疫功能,最終導(dǎo)致疾病、死亡率增加,生產(chǎn)效率下降。自由基的毒害作用可因抗氧化劑的存在而受到抑制。近年來,一些天然的具有抗氧化作用的物質(zhì)受到重視。研究表明,中草藥是一種重要的抗氧化物質(zhì)。其中,紅芪具有很強的抗氧化活性(惠和平等,2010)。本研究中,添加紅芪能夠提高肉雞血漿和多數(shù)組織中的SOD和GSH-Px活性的結(jié)果說明,紅芪可能是通過提高抗氧化酶的活性而調(diào)整動物的氧化和抗氧化平衡。盡管在畜禽上沒有類似的研究,但體外試驗與鼠上的試驗結(jié)果表明,紅芪或其浸提物能顯著提高SOD和GSH-Px活性,降低MDA含量(金智生等,2004;劉毅等,2010;楊小虎等,2010;惠和平等,2010;金智生等,2011)。
家禽生產(chǎn)中,提高動物的免疫功能,減少疾病感染非常重要。鼠上的研究表明,紅芪(崔芬芬等,2012)、紅芪多糖(姚寶泰等,2008)、紅芪水提物(胡燕等,2011)能顯著提高鼠的免疫功能。有關(guān)紅芪對畜禽免疫功能的研究較少。本研究中,添加紅芪能顯著提高肉雞ANAE+百分率的結(jié)果說明,紅芪能夠提高肉雞的細(xì)胞免疫功能。研究表明,紅芪水提物(海力茜·陶爾大洪等,2007)或紅芪總黃酮(王瑋等,2000)能提高非健康大鼠的胸腺和脾臟指數(shù)。但在本研究中,紅芪對肉雞免疫器官指數(shù)沒有顯著影響,可能與試驗動物的健康狀態(tài)有關(guān)。
飼糧中添加紅芪能顯著提高肉雞的抗氧化性能和細(xì)胞免疫功能,且在多數(shù)指標(biāo)上以2%的添加組效果最好。由于2%是本試驗中設(shè)計的最高添加劑量,所以,尚無法提出肉雞飼糧中最適宜的紅芪添加量,需要做更多的研究加以確定。