吳涓 田璐璐 祝德秋

（上海市同濟(jì)醫(yī)院 上海 200065）

大孔樹脂又稱全多孔樹脂、聚合物吸附劑，它是一類以吸附為特點(diǎn)，對有機(jī)物具有濃縮、分離作用的高分子聚合物，是吸附性和篩選性相結(jié)合的多孔性高分子材料。通過物理吸附從溶液中有選擇地吸附有機(jī)物質(zhì)，從而達(dá)到分離純化的目的。其理化性質(zhì)穩(wěn)定，不溶于酸、堿及有機(jī)溶劑，對有機(jī)物選擇性好，不受無機(jī)鹽類及強(qiáng)離子、低分子化合物存在的影響，在水和有機(jī)溶劑中可吸附溶劑而膨脹。比其它天然吸附劑（或凝膠型樹脂）具有較大的吸附能力、洗脫容易、機(jī)械強(qiáng)度高和抗污染能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。特別是其孔徑和孔度大小、比表面積、極性等性能都可以人為控制調(diào)節(jié)，供任意選擇，近幾年來，由于大孔吸附樹脂新技術(shù)的引進(jìn)，使中藥有效單體成分或復(fù)方中某一單體成分的指標(biāo)得到提高。它具有快速、高效、方便、靈敏、選擇性好等優(yōu)點(diǎn)，因而發(fā)展速度很快，應(yīng)用面很廣。本文對其在中藥提取純化中的應(yīng)用做一綜述。

1 中藥或天然藥物中有效單體成分的分離純化

1.1 黃酮類

黃酮的分離、精制純化常用此技術(shù)。魏涵等[1]利用大孔樹脂 HPD100、 HPD400、 HPD450、 HPD500、HPD600、 HPD722 和HPD101富集純化披針新月蕨中的黃酮類成分，結(jié)果發(fā)現(xiàn)HPD500對其有效成分吸附效果最好。朱會霞等[2]采用大孔樹脂對山茱萸黃酮進(jìn)行分離純化，確定其分離純化條件，樹脂的篩選實(shí)驗(yàn)結(jié)果和靜態(tài)吸附動態(tài)學(xué)研究表明，所選的4種大孔樹脂，AB-8樹脂屬于快速吸附樹脂，吸附率和解吸率都很高，是用于山茱萸黃酮分離純化的理想樹脂?？滦氐萚3]用HPD600型號大孔樹脂與ZTC天然澄清劑聯(lián)用優(yōu)化純化條件后，總黃酮含量提升近10倍，既可提高產(chǎn)品內(nèi)在質(zhì)量，又能縮短生產(chǎn)周期、減少有機(jī)溶劑的使用、降低成本，值得推廣。

對于異黃酮類有效成分大多用HPD101型樹脂純化分離。方建等[4]先用聚醚砜有機(jī)膜對豆粕乙醇提取液進(jìn)行超濾，然后用HPD101大孔樹脂純化，研究大豆異黃酮的精制工藝。結(jié)果表明，用孔徑5 000 D的有機(jī)膜超濾處理豆粕乙醇提取液，能夠去除其中56.1%的雜質(zhì)，再用HPD101大孔樹脂純化，能得到純度為41.2%的大豆異黃酮產(chǎn)品，大豆異黃酮的總收率為65.7%。綜上所述，大孔吸附樹脂對黃酮類成分進(jìn)行分離、精制純化等工藝研究都取得了較好的效果。

1.2 生物堿類

大孔吸附樹脂在生物堿吸附方面的研究多以生物堿的吸附量和洗脫率為考察指標(biāo)，對國內(nèi)常見大孔吸附樹脂型號進(jìn)行篩選。秦學(xué)功等[5]以苦參總堿吸附量和解吸率為指標(biāo)， X-5型非極性大孔樹脂能直接從苦參滲漉液中快速吸附分離生物堿，吸附量大、解吸容易，并對環(huán)境、產(chǎn)品無污染，極具開發(fā)成綠色工藝的潛力。周洪雷等[6]比較 HPD101、AB-8(安徽 )、DM301、HPD100、AB-8（河北）等5種大孔樹脂對鉤藤總生物堿的動態(tài)吸附率和動態(tài)解析率，以鉤藤總生物堿含量為指標(biāo)篩選大孔吸附樹脂上樣條件和洗脫條件，結(jié)果AB-8大孔樹脂對鉤藤中總生物堿有最好的吸附分離性能。董潔等[7]通過靜態(tài)、動態(tài)吸附和解吸動力學(xué)試驗(yàn)，篩選最佳大孔樹脂，結(jié)果HPD100對浙貝母總生物堿的富集綜合性能較好，并優(yōu)選其純化工藝，可使浙貝母總生物堿含量＞65%。其他生物堿方面的研究還涉及黃連、黃柏、平貝母中總生物堿，石蒜中的石蒜堿以及烏頭堿等。

1.3 皂苷類

大孔吸附樹脂技術(shù)在皂苷類化學(xué)成分分離純化方面的應(yīng)用比較成熟，常用于皂苷的型號主要是HPD101。此外，應(yīng)用的型號還有S-8，HPD100，DM130，ADS-7等。盧鳳來等[8]研究HPD101大孔樹脂分離純化番茄總苷的工藝條件及技術(shù)參數(shù)，采用高效液相色譜法測定番茄皂苷A的含量，考察HPD101大孔樹脂對番茄總苷的吸附及解吸性能。結(jié)果表明，HPD101大孔樹脂對番茄總苷的純化方法可行，具有較好的應(yīng)用前景。Wu等[9]先從10種大孔樹脂中初步篩選后用HPD722型樹脂分離純化，川續(xù)斷皂苷Ⅵ的產(chǎn)量提高了近10倍，從6.27%提高到59.41%，為得到更高產(chǎn)率，又從另5種大孔樹脂篩選出ADS-7型進(jìn)一步純化提取，使其產(chǎn)量可以從59.41%提高到95.05%。

1.4 多糖類

大孔吸附樹脂對多糖類的純化研究日趨受到重視，影響吸附洗脫效果的主要因素為pH、上樣量、上樣液濃度、流速和洗脫劑。任海偉等[10]為提高薏苡多糖純度，以吸附量（率）與解吸率為評價(jià)指標(biāo)，從6種大孔吸附樹脂中篩選適宜的樹脂，并采用靜動態(tài)吸附-解吸方法優(yōu)化工藝，結(jié)果表明，AB-8樹脂純化薏苡多糖效果更佳。李元元等[11]以吸附率和解吸率為評價(jià)指標(biāo)，選定DM-2型大孔樹脂分離、純化沙棗多糖的最佳工藝條件，通過動態(tài)試驗(yàn)研究各因素對分離、純化效果的影響，確定在實(shí)驗(yàn)設(shè)定條件下，DM-2型大孔樹脂分離、純化沙棗多糖的效率較高。

1.5 萜類

大孔吸附樹脂對環(huán)烯醚萜類化合物的吸附是近年來比較新的研究方向，尤其是對環(huán)烯醚萜類和總?cè)祁惓煞值难芯俊Ｓ鄷詴煹萚12]采用不同型號的大孔吸附樹脂對黃管秦艽中裂環(huán)烯醚萜類化合物進(jìn)行吸附和解吸實(shí)驗(yàn)，并研究其工藝條件和參數(shù)，同時(shí)采用紫外分光光度儀分析檢測，結(jié)果篩選出效果較好的HPD100大孔吸附樹酯,確定了最佳工藝條。宋歌等[13]采用高效液相色譜法測定蜘蛛香中環(huán)烯醚萜類成分11-ethoxyviburtinal的含量，并以此為指標(biāo)，采用單因素考察、正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法對上樣溶液濃度、洗脫溶劑、洗脫流速等進(jìn)行考察及優(yōu)化。結(jié)果表明，AB-8大孔吸附樹脂具有良好的吸附分離性能。孟憲軍等[14]對5種商品化大孔樹脂吸附純化北五味子藤莖中總?cè)频男阅苓M(jìn)行對比篩選，發(fā)現(xiàn)AB-8樹脂對北五味子藤莖總?cè)凭哂凶畲蟮奈搅?。?jīng)過AB-8樹脂純化，產(chǎn)品的洗脫率達(dá)90.52%，純度達(dá)34.26%。

1.6 有機(jī)酸和酚類

有機(jī)酸或酚酸類的抗菌、利膽、升白等作用也越來越受到關(guān)注。熊偉等[15]通過靜、動態(tài)吸附和洗脫實(shí)驗(yàn)，篩選出306型大孔樹脂為綠原酸的吸附樹脂，洗脫液經(jīng)濃縮干燥后得綠原酸粗品，純度達(dá)40%以上。李佳彥等[16]研究應(yīng)用大孔樹脂富集澤蘭中酚酸類成分，富集原兒茶醛和咖啡酸的最佳樹脂型號為HPD600，而富集迷迭香酸的最佳樹脂型號為AB-8。陳偉等[17]篩選出對升麻中總酚酸吸附效果最佳的HPD600大孔樹脂，設(shè)置系列的正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選最佳制備工藝，將藥材提取液進(jìn)行2次吸附洗脫，精制升麻總酚酸，結(jié)果升麻總酚酸含量達(dá)到50%以上。魏冬青等[18]以丹參總酚酸的含量和轉(zhuǎn)移率為指標(biāo)，采用HPD100型大孔吸附樹脂純化丹參酚酸的最佳工藝條件，丹參總酚酸純度可達(dá)60%以上，轉(zhuǎn)移率約45%。

1.7 色素

大孔吸附樹脂在色素分離方面有其不可替代的優(yōu)勢，該技術(shù)具有對色素吸附量大，易解吸，目標(biāo)成分損失少，富集得到的色素純度高等特點(diǎn)。主要涉及的色素有原花青素、番茄紅素、原花色素、紅花黃色素。李干祿等[19]為利用大孔吸附樹脂分離純化三孢布拉霉菌發(fā)酵液番茄紅素,考察了4種大孔樹脂（HP20、 HP2MG、SP825、SP207）對番茄紅素的吸附-解吸特性，篩選出最佳樹脂。結(jié)果表明，HP20大孔樹脂對番茄紅素具有較好的吸附-解吸性能，且吸附迅速，回收率可達(dá)89.55%，重結(jié)晶后純度達(dá)95%以上。武永剛等[20]用水超聲法提取菊科植物紅花中紅花黃色素A，提取液經(jīng)HP D101大孔吸附樹脂色譜柱進(jìn)行粗分，洗脫物用中壓制備色譜進(jìn)行兩次分離純化，所得產(chǎn)物羥基紅花黃色素A純度為95.97%。

2 中藥復(fù)方制劑分離純化

中藥復(fù)方是中醫(yī)臨床治療的主要形式，然而中藥復(fù)方制劑“粗、大、黑”問題嚴(yán)重制約了其發(fā)展。由于其成分復(fù)雜，必須根據(jù)功能主治明確其有效成分的類別和性質(zhì)，確定大孔吸附樹脂的型號和用量，以達(dá)到提高有效成分的相對含量的目的。王淑美等[21]利用AB-8型大孔吸附樹脂對復(fù)方腦脈通顆粒的有效部位進(jìn)行純化，以總蒽醌、總皂苷、總生物堿及葛根素的含量為指標(biāo)，優(yōu)化了大孔吸附樹脂的純化工藝條件，使有效部位的純度達(dá)到63%。劉若霞等[22]以比色法測定泄?jié)岢苑街锌傇碥蘸?，采用靜態(tài)吸附-解析篩選樹脂類型，并對影響分離的各種因素進(jìn)行系統(tǒng)研究，結(jié)果經(jīng)HP D101樹脂處理后的泄?jié)岢苑娇傇碥湛蛇_(dá)80%以上。此外還有應(yīng)用大孔吸附樹脂對中藥復(fù)方免疫增強(qiáng)劑中多糖的純化，蘇郁滴丸中柴胡郁金提取液的純化，葛根丹參藥對水溶性有效物質(zhì)的純化，芍藥甘草湯的分離精制等研究報(bào)道。

盡管如此，大孔吸附樹脂技術(shù)應(yīng)用于中藥復(fù)方制劑尚存在一些實(shí)際問題，如應(yīng)用于復(fù)方中藥的等效性、技術(shù)評價(jià)的科學(xué)性等。有專家提出，經(jīng)過大孔樹脂處理后的復(fù)方提取物是否能夠代表原提取物的“藥性”，該如何用確鑿的證據(jù)證明該過程是去除了無用的成分，保留了有效成分。因此，僅以純化、減少浸膏為目的而將中藥復(fù)方用大孔樹脂處理的做法，由于缺乏較多的研究基礎(chǔ)，很難充分說明采用樹脂純化的必要性及合理性，在評價(jià)上的依據(jù)也不很充分。研究者應(yīng)該在充分考慮臨床療效和安全性的基礎(chǔ)上研究中藥復(fù)方提取、純化工藝路線，如需用大孔樹脂處理應(yīng)充分解決好其基礎(chǔ)研究問題，使該方法具有充分的科學(xué)性、合理性和可行性。

3 去除有害雜質(zhì)

有些中藥重金屬的含量超標(biāo)，而大孔樹脂可用于去除中藥水煎液中的鉛、鎘、銅。梁賀升等[23]經(jīng)原子吸收光譜法測定，通過D001、D113與D751型大孔吸附樹脂處理后都能夠顯著脫除中藥水提取液中的鉛、鎘、銅的含量，普遍脫除率都在58.9%以上。

藥材與飲片不同，用于制藥和臨床的是飲片，藥材是生貨原藥，是飲片加工的前體。

中藥農(nóng)藥殘留的問題近年來也成為了新的焦點(diǎn)，大孔吸附樹脂技術(shù)在這個(gè)領(lǐng)域可以發(fā)揮重要的作用。魏艷彪等[24]進(jìn)行了大孔吸附樹脂對吡蟲啉的吸附性能的研究。吡蟲啉作為一種低毒高效的殺蟲劑在農(nóng)業(yè)及衛(wèi)生領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。該試驗(yàn)使用了聚甲基丙烯酸甲酯大孔吸附樹脂對水中吡蟲啉的吸附行為進(jìn)行研究，為應(yīng)用大孔吸附樹脂處理中藥水提液中吡蟲啉殘留的研究提供了理論依據(jù)。

4 多糖脫色與澄清工藝

大孔樹脂應(yīng)用廣泛，也可用于制劑澄清和脫色。王佩等[25]對蟬貝口服液澄清工藝澄清度和測定總生物堿含量兩項(xiàng)為對比工藝。比較了硅藻土吸附、乙醇沉淀、殼孔吸附樹脂吸附5種純化方法，只有大孔樹脂既能保留有效成分又能使溶液澄清，為一種較好的澄清工藝。多糖純度一般較低，往往含有色素、蛋白質(zhì)以及一些小分子物質(zhì)。色素的存在不僅影響多糖的色澤、純度，而且對多糖的進(jìn)一步純化和研究其組成帶來一定影響，因此，在多糖分離純化之前，需進(jìn)行脫色處理，以方便進(jìn)一步的研究。川芎多糖、靈芝多糖等應(yīng)用大孔吸附樹脂吸附技術(shù)不僅脫色效率高，而且有效成分保留好。

5 結(jié)語

目前，大孔吸附樹脂技術(shù)主要集中應(yīng)用于黃酮、生物堿和皂苷類等有效化學(xué)成分的分離純化。但是從國家對該技術(shù)的關(guān)注程度來看，我們有理由相信該技術(shù)在中藥研究和生產(chǎn)中的應(yīng)用將會有更廣闊的空間。尤其對于近年來出現(xiàn)的用于脫除重金屬雜質(zhì)和農(nóng)藥殘留物方面，其既不影響目標(biāo)成分的含量又不會帶入新雜質(zhì)的特點(diǎn)，是其他方法不可替代的。

隨著各項(xiàng)基礎(chǔ)和應(yīng)用研究的不斷深入，大孔吸附樹脂在分離、純化中藥提取液等方面已日益顯示其獨(dú)特的效果，不僅為中藥制劑質(zhì)量控制和中藥現(xiàn)代化研究提供更有效、可靠的純化富集手段，更重要的是改善了傳統(tǒng)中藥制劑“粗、大、黑”的外觀和服用量過大等缺點(diǎn)，必將有利于中藥制劑工藝的改進(jìn)，并且對中藥現(xiàn)代化研究進(jìn)程有很大的促進(jìn)作用。

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