李世祥等

【關(guān)鍵詞】 Rh血型；溶血??；弱D

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2013.06.148 文章編號(hào)：1004-7484（2013）-06-2992-02

Rh血型系統(tǒng)是目前已知的32個(gè)人類紅細(xì)胞血型系統(tǒng)中最復(fù)雜的一個(gè)。Rh血型由于其D抗原的強(qiáng)免疫原性而使RhD血型最具有臨床意義。RhD血型具有多態(tài)性，除RhD陽(yáng)性和RhD陰性外，還存在多種變異體，包括弱D、部分D及DEL型?，F(xiàn)已有弱D、部分D及DEL型獻(xiàn)血者所獻(xiàn)血液使RhD陰性受血者產(chǎn)生抗-D報(bào)道[1-3]。筆者在1例新生兒溶血病換血治療交叉配血實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)婦為Rh弱D表型，產(chǎn)生抗-D抗體，引起新生兒溶血病，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 對(duì)象 產(chǎn)婦張某，36歲，漢族。孕3產(chǎn)1，既往人流2次；現(xiàn)第3胎足月剖宮產(chǎn)。張某之子出生后皮膚鞏膜黃疸?？偰懠t素為530umol/L，臨床診斷為新生兒溶血病，急需換血治療，因配血困難送檢。

1.2 主要試劑和儀器 四批抗-D單克隆抗體，譜細(xì)胞（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司）；Rh基因分型試劑（美國(guó)G&T公司）；DNA提取試劑盒（北京天為時(shí)代生物技術(shù)有限公司）。日本久保田KUBOTAKA-2200細(xì)胞洗滌離心機(jī)，美國(guó)ABI公司PE-9700擴(kuò)增儀，美國(guó)UVP公司UVPGDS-8000凝膠成像系統(tǒng)和DYY-6B型穩(wěn)壓電泳儀。

1.3 方法

1.3.1 血清學(xué)方法 ABO血型鑒定采用試管法；RhD血型鑒定選用4批不同廠家，不同批號(hào)的抗D試劑進(jìn)行抗人球蛋白方法檢測(cè)；抗體篩選及鑒定采用抗人球蛋白方法用10個(gè)O型譜細(xì)胞和2附加的特殊表型細(xì)胞做抗體鑒定。具體方法參見文獻(xiàn)[4]。

1.3.2 Rh系統(tǒng)基因分型方法 采用PCR-SSP方法，操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作。150V電泳15-20min，在紫外光下拍照記錄。

2 結(jié) 果

2.1 ABO血型 產(chǎn)婦張某血型為B型，患兒為B型。

2.2 Rh血型 產(chǎn)婦RhD血型在四批試劑鹽水介質(zhì)均為陰性，抗球蛋白介質(zhì)中，兩批陽(yáng)性，兩批陰性。Rh因子為ce；患兒RhD血型為正常陽(yáng)性，Rh因子為ce。基因分型結(jié)果同血清學(xué)結(jié)果，產(chǎn)婦張某含有RHD基因。結(jié)果見圖1。

2.3 血型抗體檢測(cè) 產(chǎn)婦和患兒血清存在游離抗體。產(chǎn)婦血清和患兒血清與1-10號(hào)譜細(xì)胞反應(yīng)，鹽水介質(zhì)中無(wú)凝集，抗人球蛋白介質(zhì)中7號(hào)和9號(hào)不凝，其余都凝集。自身細(xì)胞均無(wú)凝集。增加11號(hào)Ce表型和12號(hào)cE表型細(xì)胞，確定抗體類型為抗-D抗體，見表1。采用間接抗人球蛋白方法，抗-D抗體效價(jià)為8。

2.4 交叉配血試驗(yàn) 與5例B型RhD陰性，表型為ce獻(xiàn)血員進(jìn)行交叉配血主次測(cè)均相合。采用B型Rh（D）陰性血400ml進(jìn)行臍靜脈或外周靜脈同步換血技術(shù)換血治療。

3 討 論

Rh血型是輸血醫(yī)學(xué)重要的血型系統(tǒng)，主要包括D、c、c、E和e等5種抗原，其中D抗原具有很強(qiáng)的免疫原性，是引起新生兒溶血病的主要血型抗原，是最具臨床意義的Rh因子。弱D個(gè)體無(wú)論作為供者或是受者均具有臨床意義。對(duì)于弱D孕婦妊娠Rh陽(yáng)性胎兒或Rh陰性孕婦妊娠弱D型胎兒時(shí)必須實(shí)施Rh同種免疫監(jiān)護(hù)[5]。

本次報(bào)道先證者為弱D孕婦，但是由于多次妊娠產(chǎn)生抗-D抗體。IgG抗D所致新生兒溶血，病情重，黃疸進(jìn)展很快，如治療不及時(shí)可致核黃疸甚至死亡。Rh系統(tǒng)新生兒溶血病換血治療原則是ABO血型同孩子，Rh血型同母親。本例患者是B型，母親是弱D表型。本例采用B型RhD陰性血進(jìn)行的換血治療。換入血液可換出大量血清中非結(jié)合膽紅素，降低血清膽紅素濃度，防止核黃疸發(fā)生。同時(shí)糾正貧血，防止心力衰竭。

由于Rh血型系統(tǒng)具有豐富而復(fù)雜的多態(tài)性和人種、民族等的差異，所以建立正確、準(zhǔn)確的檢測(cè)D變異體的基因分型策略、指導(dǎo)臨床輸血工作和新生兒溶血病等疾病的預(yù)防研究都有著重要的意義。

參考文獻(xiàn)

[1] Wagner FF，Gassner C，Muller，et al.Molecular basis of weak D phenotypes.Blood，1999，93：385-393.

[2] Legler TJ，Mass JH，Blaschke V，et al.RHD genotyping in weak D phenotypes by multiple polymerase chain reations.Transfusion，1998，8（5）：434-440.

[3] Kyenog-Hee，Kim，Kyung-Eum Kim：Primary anti-D immunization by DEL red blood cells.Korean J Lab Med，2009，29：361-365.

[4] 葉應(yīng)嫵，王毓三.全國(guó)臨床檢測(cè)操作規(guī)程[M].南京：東南大學(xué)出社，1991：1052-1053.

[5] 熊文，秦建江，劉艷，等.一個(gè)弱D15型家系研究.中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志，2007，2（24）：35-37.