程運斌 劉育清

（1.湖北省農(nóng)藥及農(nóng)產(chǎn)品安全質(zhì)量監(jiān)督檢驗站 武漢 430064； 2.湖北省農(nóng)藥檢定管理所 武漢 430070）

1 前言

三環(huán)唑的化學名稱:5-甲基一1，2，4一三唑并（3，4-b）苯并噻唑。是一種具有較強內(nèi)吸性的保護性三唑類殺菌劑。殺菌作用機理主要是抑制附著孢黑色素的形成，從而抑制孢子萌發(fā)和附著孢形成，阻止病菌侵人和病菌孢子的產(chǎn)生。三環(huán)唑具有較強的內(nèi)吸性，能迅速被水稻根莖葉吸收，并輸送到稻株各部，一般在噴灑后2小時稻株內(nèi)吸收藥量可達飽和。對銹病和白粉病具有預防、鏟除、治療、熏蒸等作用。丙環(huán)唑的化學名稱:1-[2-（2，4-二氯苯基）-4-丙基-1，3-二氧戊環(huán)-2-甲基]-1氫-1，2，4三唑，是一種具有保護和治療作用的三唑類殺菌劑，內(nèi)吸性強，具有雙向傳導性能，可被根、莖、葉部吸收，并能很快地在植物株體內(nèi)向上傳導，施藥2小時即可將入侵的病原體殺死，1d～2d控制病 情擴展，阻止病害的流行發(fā)生，滲透力及附著力極強，特別適合在雨季使用；防治子囊菌，擔子菌和半知菌引起的病害，特別是對小麥全蝕病、白粉病、銹病、根腐病，水稻惡菌病，香蕉葉斑病具有較好的防治效果。目前，三環(huán)唑和丙環(huán)唑單劑產(chǎn)品均國家標準[1-2]，二者與其它有效成分的混配產(chǎn)品分析方法亦有報道[3-8]，二者混配的分析方法未見報道。該文介紹了利用氣相色譜法在同柱同條件下對三環(huán)·丙環(huán)唑525g/L懸乳劑中三環(huán)唑和丙環(huán)唑兩組分的有效分離、測定方法。

2 實驗部分

2.1 儀器與試劑

氣相色譜儀：Agilent6890N，帶FID檢測器，HP化學工作站；

色譜柱：1m×3mm（i.d），內(nèi)填5%OV-101/ChromosorbWAW-DMCS（150-180m）；

微量進樣器：10L；

XH-C型旋渦混勻器,AnkeTDL-40B離心機；

圖1 標樣色譜圖

圖2 試樣色譜圖

三環(huán)唑標準品：99.5%（農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所）；

丙環(huán)唑標準品：98.6%（國家農(nóng)藥質(zhì)檢中心）；

三環(huán)·丙環(huán)唑525g/L懸乳劑（浙江世佳科技有限公司）；

內(nèi)標物：鄰苯二甲酸正丁酯，應(yīng)不含有干擾色譜分析的雜質(zhì)。

溶劑：丙酮（分析純）；

2.2 色譜條件

溫度：柱溫 225℃保持 5.5min，20℃/min程序升溫至260℃保持6min，進樣口230℃，檢測器280℃；

流速（mL/min）：載氣 25，氫氣 30，空氣 300；進樣量：1L；

保留時間：鄰苯二甲酸正丁酯約2.7min；三環(huán)唑約4.7min；丙唑約7.3min；

2.3 溶液配制

2.3.1 內(nèi)標溶液的配制

稱取鄰苯二甲酸正丁酯2.5g于100mL容量瓶中，用丙酮稀釋至刻度，于XH-C型旋渦混勻器上搖勻靜置備用。

2.3.2 標準溶液的配制

分別稱取三環(huán)唑、丙環(huán)唑標準品0.09g、0.03g（精確至0.0002g）于10mL容量瓶中，準確加入內(nèi)標溶液2.0mL，用丙酮稀釋至刻度，于XH-C型旋渦混勻器上充分振搖靜置備用。

2.3.3 試樣溶液的配制

稱取三環(huán)·丙環(huán)唑525g/L懸乳劑0.22g（精確至0.0002g）于10mL容量瓶中，加入丙酮直至樣品被浸泡溶解，準確加入內(nèi)標溶液2.0mL，再用丙酮稀釋至刻度，于XH-C型旋渦混勻器上充分振搖后，于AnkeTDL-40B離心機上離心，靜置備用。

2.4 測定方法

在上述色譜條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)進數(shù)針標準溶液，待相鄰兩針的相對響應(yīng)值變化<1.5%時，按照標樣、試樣、試樣、標樣的順序進行測定，色譜圖見圖1、圖2。

三環(huán)·丙環(huán)唑 20%可濕性粉劑有效成分的質(zhì)量分數(shù)%按下式計算：

式中：A1——標樣中三環(huán)唑（丙環(huán)唑）與內(nèi)標物峰面積比的平均值；

A2——試樣中三環(huán)唑（丙環(huán)唑）與內(nèi)標物峰面積比的平均值；

m1——標準品三環(huán)唑（丙環(huán)唑）的質(zhì)量（g）；

m2——試樣三環(huán)唑（丙環(huán)唑）的質(zhì)量（g）；

P——標準品三環(huán)唑（丙環(huán)唑）的質(zhì)量分數(shù)（%）

3 結(jié)果與分析

3.1 分析條件的選擇

為使試樣中的兩組分在同柱同條件下得到有效分離并能準確定量測定，分別選用了幾種內(nèi)標物進行試驗。結(jié)果表明，在一定的柱箱溫度和載氣流量條件下，鄰苯二甲酸正戊酯與三環(huán)唑不能完全分離，在二者之間或之前沒有合適的內(nèi)標物可選。所以選用更為合適的鄰苯二甲酸正丁酯作為內(nèi)標物。

分別試用1m的SE-30、2m的OV-17和不同長度（0.5、1m）的OV-101填充柱對試樣進行分離測定，在分離程度基本相同的情況下，三環(huán)唑在OV-17上峰型拖尾現(xiàn)象明顯，而丙環(huán)唑出峰時間偏長；三環(huán)唑在0.5m的OV-101和1m的SE-30柱上出峰太快，且峰型對稱性不好。若降低初始溫度而提高升溫速率，則基線飄移，峰型不好，定量不準確。通過試驗，用一階程序升溫，試樣在1m的OV-101柱上能好地分離，峰型對稱性好，且10分鐘便可完成一次測定。

3.2 分析方法的線性相關(guān)性測定

稱取標準品三環(huán)唑0.8051g、丙環(huán)唑0.2525g（精確至0.0002g）于同一25容量瓶中，用丙酮稀釋至刻度，配制成標準儲備溶液。用移液管分別準確移取標準儲備溶液 0.5、1.0、2.0、3.0、5.0mL于5個10mL容量瓶中,分別加入內(nèi)標溶液2.0mL用丙酮稀釋至刻度，配成5組不同濃度的溶液。按前述規(guī)定的色譜條件測定，以標準品與內(nèi)標的質(zhì)量比為橫坐標，以其峰面積比為縱坐標作圖3、圖4。其線性方程分別為Y三環(huán)唑=1.0042X-0.0353，Y丙環(huán)唑=2.9186X-0.0069；相關(guān)系數(shù)分別為 r三環(huán)唑=0.9997，r丙環(huán)唑=0.9996（表1）。

表1 分析方法的線性相關(guān)性試驗數(shù)

圖3 三環(huán)唑的標準曲線圖

圖4 丙環(huán)唑的標準曲線圖

3.3 分析方法精密度測定

對同一試樣分別稱取5份，在上述色譜條件下，進行平行測定。檢測結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計，該方法的標準偏差、變異系數(shù)三環(huán)唑為0.639和0.16%，為丙環(huán)唑0.328和0.26%（表2）。

表2 分析方法的精密度試驗數(shù)據(jù)

3.4 分析方法的準確度測定

稱取已知含量的試樣5份，加入一定量的標準品，進行回收率測定，得出三環(huán)唑的回收率為98.95%～102.21%，丙環(huán)唑的回收率為 98.66%～101.89%（表3）。

表3 分析方法的準確度試驗數(shù)據(jù)

3.5 結(jié)論

試驗結(jié)果表明，該方法測定三環(huán)·丙環(huán)唑525g/L懸乳劑兩種有效成分的質(zhì)量分數(shù)，分離效果好，準確度、精密度高，線性關(guān)系好，符合定量分析要求。對不同配方規(guī)格的復配制劑，只需調(diào)整標準品和試樣的稱取量，此方法同樣適用，而且操作簡便易行，分析時間短、成本低廉，適用于企業(yè)生產(chǎn)的質(zhì)量控制及質(zhì)檢機構(gòu)農(nóng)藥產(chǎn)品質(zhì)量檢測。

[1]沈陽化工研究院有限公司.GB20701-2006.三環(huán)唑可濕性粉劑[S].北京：中國標準出版社，2007.

[2]沈陽化工研究院有限公司.GB23549-2009.丙環(huán)唑乳油[S].北京：中國標準出版社，2010.

[3]周衛(wèi)群，胡昌弟，吳志華，等.20%三環(huán)唑·異稻瘟凈的氣相色譜法分析[J].農(nóng)藥,1996（02）：27-28.

[4]程運斌，劉育清.異稻·三環(huán)唑20%可濕性粉劑的氣相色譜分析[J]農(nóng)藥科學與管理，2008，29（9）：18-20.

[5]程運斌，劉育清.30%苯醚甲·丙環(huán)唑乳油的氣相色譜分析[J]農(nóng)藥，2007,46（9）：612-613.

[6]程運斌，劉育清.唑酮·三環(huán)唑20%可濕性粉劑氣相色譜分析方法研究[J]甘肅農(nóng)業(yè)大學學報，2011，46（6）：73-76.

[7]黃映君，多菌靈與三環(huán)唑的HPLC分析[J]農(nóng)藥，2005（01）：23-24.

[8]周寧，三環(huán)唑-異稻瘟凈復合乳性懸浮劑氣相色譜分析[J]農(nóng)藥，1990,29（5）：20-22.