臍帶源間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療難治性系統(tǒng)性紅斑狼瘡

夏宇歐 王宏

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種自身免疫性疾病，臨床表現(xiàn)千變?nèi)f化［1］。特點(diǎn)是自身反應(yīng)性T細(xì)胞和B存在，導(dǎo)致B細(xì)胞多克隆活化淋巴細(xì)胞，由此產(chǎn)生的自身抗體等細(xì)胞因子釋放［2］。其中最具有臨床特征的是狼瘡性腎炎［3］。常規(guī)免疫抑制或免疫調(diào)節(jié)如糖皮質(zhì)激素治療，環(huán)磷酰胺(CYC)和霉酚酸酯(MMF)，可控制大部分疾病，但不是所有的患者狼瘡性腎炎都有效。有一部分狼瘡腎炎患者的疾病或者不敏感或復(fù)發(fā)。盡管不斷進(jìn)行化療，其預(yù)后仍然不佳［4］。在過去的十年中，造血干細(xì)胞移植(HSCT)已被報(bào)告為一個(gè)充滿希望治療，可以達(dá)到長期緩解狼瘡的目的，但復(fù)發(fā)率和毒性很高，因此，期待一種較新的治療方法，比目前的方法更有效、更安全［5-7］。

1 資料與方法

1.1 一般資料 ①入選條件:＜60歲;所有入選患者符合對SLE風(fēng)濕病學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)11項(xiàng)中的至少4項(xiàng)。該合格標(biāo)準(zhǔn)包括狼瘡活動(dòng)指標(biāo)。疾病常規(guī)治療6個(gè)月無效;病情進(jìn)展，臟器損害危及生命;移植后有可能改善生活質(zhì)量;主要臟器功能可耐受移植。②排除條件:明確感染;不能控制的心律失?；蛐牧λソ?肺功能檢查明顯異常;腎臟明顯縮小;腎皮質(zhì)厚度＜0.8 cm;血肌酐＞442μmol/L。符合條件的病例2例，男、女各1例，均合并狼瘡性腎炎Ⅳ型，這個(gè)協(xié)議經(jīng)四平市中心醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，獲得了患者的知情同意。③1例有狼瘡性腎炎、漿膜炎、白細(xì)胞減少、關(guān)節(jié)炎。另一例有狼瘡性腎炎、漿膜炎、血小板減少。狼瘡活動(dòng)性評分＞12分。

1.2 細(xì)胞來源 使用我院中心實(shí)驗(yàn)室提供的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞。

1.3 干細(xì)胞回輸 輸入前地塞米松5 mg靜脈注射，生理鹽水開路，接干細(xì)胞懸液，最后用生理鹽水沖管。輸入過程中應(yīng)反復(fù)搖勻干細(xì)胞懸液，以免出現(xiàn)凝集，堵塞管路。

1.4 療效觀察 分別在移植前和移植后1，6，12個(gè)月對患者臨床癥狀和體征的變化、體液及細(xì)胞免疫功能(CD3、CD4、CD8、CD19)、風(fēng)濕譜(ANA)進(jìn)行跟蹤隨訪，定期檢查血常規(guī)、尿常規(guī)、腎功能的變化。

2 結(jié)果

2.1 造血和免疫重建 2例患者分別在移植后6 d及7 d復(fù)查，白細(xì)胞最低點(diǎn)為3.2×109/L，血小板最低點(diǎn)為18×109/L，淋巴細(xì)胞最低點(diǎn)為0.02×109/L，血紅蛋白最低點(diǎn)為96 g/L、移植過程中未輸注紅細(xì)胞、血小板。

2.2 移植相關(guān)并發(fā)癥 移植過程中未出現(xiàn)明顯的并發(fā)癥，未出現(xiàn)發(fā)熱、出血性膀胱炎、肝靜脈閉塞綜合征、巨細(xì)胞病毒感染等。

2.3 移植后臨床癥狀變化 移植后2 d，患者的臨床癥狀開始緩解，隨訪12個(gè)月，沒有復(fù)發(fā)，均已分別恢復(fù)日常工作、學(xué)習(xí)。

2.4 移植前后有關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查的改變 移植后6個(gè)月患者狼瘡相關(guān)的抗體均逐漸轉(zhuǎn)為陰性，補(bǔ)體C3、C4在移植后升高，尿蛋白逐步降低，隨訪12個(gè)月時(shí)患者補(bǔ)體C3均升至正常，24 h尿蛋白定量降至0.15 g以下。

表1 移植前、后有關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查的改變

2.5 移植后免疫功能的變化 經(jīng)移植治療后，患者免疫功 能逐漸升高，尤以CD4、CD19最為顯著，見表1。

表2 移植前、后免疫功能的變化(%)

3 討論

系統(tǒng)性紅斑狼瘡是一種累及多器官、多系統(tǒng)，以免疫調(diào)節(jié)異常為特征的自身免疫性疾病。確切病因并不清楚，可能與遺傳背景、環(huán)境因素、內(nèi)分泌異常、免疫系統(tǒng)紊亂等多因素相關(guān)。目前治療主要手段是依靠激素和免疫抑制劑等，但只能部分控制疾病活動(dòng)，不能治愈，尤其對部分患者效果欠佳。

間充質(zhì)干細(xì)胞是一類具有顯著的自我更新和多向分化的細(xì)胞，主要存在于骨髓、臍血、臍帶、全身結(jié)締組織和器官間質(zhì)［8］。臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(umbilical cord mesenchymal stem cells，UC-MSC)是目前臨床研究和應(yīng)用較多的間充質(zhì)干細(xì)胞之一。它來源于臍帶，易于獲取，對產(chǎn)婦及新生兒均無傷害;且可在體外大量擴(kuò)增，傳代穩(wěn)定;其細(xì)胞活性、增殖能力及數(shù)量均能得到保證，即質(zhì)量、數(shù)量可控;不受倫理、道德及法律方面的爭論與限制;相對純凈，與干細(xì)胞輸注相關(guān)的病毒和病原微生物感染率遠(yuǎn)低于骨髓移植;人臍帶MSCs不表達(dá)或低表達(dá)免疫排斥相關(guān)標(biāo)記，免疫原性低，是一類低免疫原性細(xì)胞，不需經(jīng)過嚴(yán)格配對使用，適宜于不同個(gè)體之間的移植。

造血干細(xì)胞移植治療自身免疫病的原理有兩方面，一是在預(yù)處理時(shí)，通過大劑量化療或全身照射摧毀患者的異常免疫系統(tǒng)，對自身免疫病起緩解作用;二是移植的自體外周血干細(xì)胞重建正常的免疫系統(tǒng)。在免疫重建中阻斷自身抗體的產(chǎn)生或誘導(dǎo)對自身抗原的免疫耐受，后者被認(rèn)為是造血干細(xì)胞移植治療SEE并使其長期緩解的原理。

非清髓的MSCs移植(MSCT)治療自身免疫性疾病的機(jī)制可能是抑制潛在的免疫干擾，從根本上 改變免疫系統(tǒng)。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞是由原始CD4T分化而來的細(xì)胞亞群。最近十年來，關(guān)于T細(xì)胞在控制免疫活性方面進(jìn)行了大量研究。最近的研究證實(shí)，活動(dòng)期SLE患者存在T細(xì)胞功能的不足，但可以恢復(fù)。糖皮質(zhì)激素治療誘發(fā)疾病緩解。在這項(xiàng)研究中，我們觀察到臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞能明顯上調(diào) CD4的百分比。

總之，我們提供直接的證據(jù)表明，臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植對于重癥難治性系統(tǒng)性紅斑狼瘡具有重要影響，至少在短期內(nèi)是安全的，有效的。進(jìn)一步的臨床試驗(yàn)需要更多患者、長時(shí)間的隨訪，并與標(biāo)準(zhǔn)治療比較，以確定這種新型的治療方法的療效和安全性。

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