宗萬里

（威海市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所，山東 威海264209）

撲草凈為氮苯類內(nèi)吸性傳導(dǎo)除草劑，化學(xué)名稱為4,6-雙異丙胺基-2-甲硫基-1,3,5-三嗪，對人、畜、魚、蜜蜂低毒，且施藥后殘效期長，為1個(gè)月左右，此外撲草凈還有致突變作用。2012年，日本厚生省從山東省出口的3個(gè)批次活雜色蛤中檢出撲草凈，全部銷毀處理。據(jù)了解,養(yǎng)殖戶為清除養(yǎng)殖池內(nèi)的海藻，大量向水體中使用化學(xué)藥品（主要成分為撲草凈），長期積累導(dǎo)致最終產(chǎn)品中撲草凈殘留量超標(biāo)。嚴(yán)重影響了我國對外水產(chǎn)品的出口貿(mào)易，因此有必要加強(qiáng)對花色蛤中的撲草凈殘留量進(jìn)行檢測與監(jiān)控，目前測定食品撲草凈殘留量常用的檢測方法主要有氣相色譜法[1-2]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[3-9]、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[10]。本實(shí)驗(yàn)使用正己烷直接提取花色蛤中撲草凈殘留量后，經(jīng)固相萃取柱凈化，樣品處理液注入氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行分析檢測，取得了較好的分析效果，建立了一種較為快速的測定花色蛤中的撲草凈殘留量的氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

正己烷：分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；撲草凈標(biāo)準(zhǔn)品：≥99.3%，0.25g，Dr.Ehrenstorfer GmbH；30ml具塞刻度試管；漩渦振蕩器：MS3 Digital，IKA公司；料理機(jī)，九陽股份有限公司；氣質(zhì)聯(lián)用儀：GCMSQP2010 Plus，日本島津公司；毛細(xì)管色譜柱：Rxi-5ms（30mm,0.25mm,0.25μm），RESTEK；分析天平：FC204型，精度為0.1mg，上海精密科學(xué)儀器有限公司；全自動氮吹濃縮儀：XT-NS1，上海新拓分析儀器科技有限公司；固相萃取小柱，CNWBOND FLORISIL SPE TUBES，1g/6ml，上海安普。

1.2 色譜條件

載氣（氦氣）流速為 1ml/min，用恒速率控制方式，速率為36.7cm/sec；SPL進(jìn)樣口，不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣時(shí)間為1min,分流比設(shè)為5:1；SPL進(jìn)樣口溫度：200℃；柱溫箱溫度程序：初始溫度60℃，保持1min，以30℃/min升至220℃，保持10min。

1.3 質(zhì)譜條件

離子源溫度：230℃；接口溫度：280℃；溶劑延遲時(shí)間5min；檢測器電壓：使用調(diào)諧電壓；

SCAN方式質(zhì)量數(shù)范圍：50～350；sim定量方式選擇監(jiān)測離子碎片：241,226,186,104；定量離子為：241。

1.4 溶液配制

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

準(zhǔn)確稱取50mg撲草凈標(biāo)準(zhǔn)品至50ml容量瓶中，用甲醇定容，得1mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

再從1mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液中分別吸取0.5ml加入到50ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度得10μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。再從10μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液中分別吸取0.25, 0.5, 1,2.5, 5ml加入到5個(gè)不同的50ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，得0.05, 0.1,0.2,0.5,1.0μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。每個(gè)質(zhì)量濃度取1μL注入氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行分析。

1.4.2 樣品前處理

1.4.2.1 提取

準(zhǔn)確稱取經(jīng)料理機(jī)粉碎的待測花色蛤肉10g于30ml具塞刻度試管中，用30.0ml正己烷分三次提取，每次使用漩渦振蕩器充分振蕩提取樣品，收集三次提取溶液后用全自動氮吹濃縮儀于50℃濃縮至近干，再加入2ml正己烷溶解濃縮液。

1.4.2.2 凈化

取FLORISIL固相萃取小柱，加入1柱管體積正己烷對小柱活化，加入2ml樣品處理液，再加入2ml正己烷洗脫雜質(zhì)，最后用丙酮洗脫并定容至2ml。

2 結(jié)果與討論

2.1 樣品前處理

由于撲草凈易溶于正己烷等有機(jī)溶劑，且正己烷不易溶于水，本文采用正己烷直接浸泡提取花色蛤肉中撲草凈的殘留量，之后使用硅藻土固相萃取小柱對正己烷提取液進(jìn)行凈化以除去正己烷中可能會溶有的脂肪等雜質(zhì)。經(jīng)過凈化后，樣品處理液直接注入氣質(zhì)聯(lián)用儀中進(jìn)行檢測。

2.2 色譜圖

在1.2及1.3節(jié)色譜及質(zhì)譜條件下, 得到撲草凈標(biāo)準(zhǔn)樣品的scan方式下的總離子流圖，撲草凈的質(zhì)譜圖，sim方式下的總離子流圖、未知樣品的總離子流圖、加標(biāo)未知樣品的總離子流圖，如圖1～圖5所示。撲草凈的出峰時(shí)間為9.122min，加標(biāo)樣品譜圖干凈，無干擾。在該色譜條件下，實(shí)驗(yàn)結(jié)果良好。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)樣品的scan方式下的TIC色譜圖Fig.1 TIC chromatogram of prometryne standard sample

圖2 標(biāo)準(zhǔn)樣品的質(zhì)譜圖Fig.2 mass spectrum of standard sample

圖3 標(biāo)準(zhǔn)樣品SIM方式下的TIC色譜圖Fig.3 TIC chromatogram of standard sample in SIM mode

圖4 未知樣品sim方式下的TIC色譜圖Fig.4 TIC chromatogram of unknown Color clams sample in SIM mode

圖5 加標(biāo)未知樣品sim方式下的TIC色譜圖Fig.3 TIC chromatogram of unknown Color clams sample added with prometryne in SIM mode

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線和最低檢出限

在實(shí)驗(yàn)條件下，以峰面積y為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度x(μg·ml-1)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性方程，以基線噪聲3倍峰面積對應(yīng)的質(zhì)量濃度為檢出限(S／N=3)[11]，回歸方程、相關(guān)系數(shù)及檢出限見表1，線性曲線如圖6所示。

圖6 撲草凈線性曲線Fig.6 curve line of prometryn

表1 回歸曲線的基本參數(shù)Tab. 1 Basic parameter of regression equation

2.4 精密度和加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)

取不含撲草凈的花色蛤樣品進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，向5g樣品中分別添加100μg/ml撲草凈標(biāo)準(zhǔn)溶液25、50、100μL，即樣品中撲草凈含量為分別為0.5、1、2mg/kg。按上述1.4.2樣品處理方法進(jìn)行樣品處理，重復(fù)6次。按1.2及1.3節(jié)色譜及質(zhì)譜條件進(jìn)行測定，精密度和回收率計(jì)算結(jié)果見表2。由表2可知，采用本方法所得數(shù)據(jù)滿足檢測要求。

3 結(jié)論

通過實(shí)驗(yàn)建立了正己烷直接浸泡提取法測定花色蛤中撲草凈含量的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測方法,該法前處理簡單，方法的最低檢出限為0.00022mg/kg，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于國外0.01mg/kg的限量要求，測試結(jié)果穩(wěn)定且準(zhǔn)確度較高，能夠滿足檢測要求。該方法節(jié)省了檢測時(shí)間，可操作性強(qiáng)，能夠?yàn)閾洳輧舻臋z驗(yàn)與監(jiān)測提供科學(xué)依據(jù)與技術(shù)支持。

表2 樣品添加回收和精密度實(shí)驗(yàn)Tab. 2 Spiked recovery and precision

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