朱德勝 吳海嘯 吳漢

CAⅨ在腎癌中的研究進(jìn)展

朱德勝 吳海嘯 吳漢

碳酸桿酶Ⅸ（carbonic anhydraseⅨ，CAⅨ），又稱G250、MN，是新發(fā)現(xiàn)的碳酸桿酶家族的異構(gòu)體之一，基本功能為可逆性催化體內(nèi)水合反應(yīng)，被認(rèn)為是腫瘤相關(guān)抗原,具有潛在判斷腎癌預(yù)后作用的分子標(biāo)記物。筆者現(xiàn)對CAⅨ在腎癌診斷、治療及預(yù)后判斷中的應(yīng)用作一綜述。

1 CAⅨ結(jié)構(gòu)及功能

1.1 CAⅨ結(jié)構(gòu)與分布 CAIX最早發(fā)現(xiàn)于人宮頸癌HeLa細(xì)胞系，Oosterwdk等[1]于1986年首次在腎癌中發(fā)現(xiàn)CAⅨ特異性的表達(dá),其后發(fā)現(xiàn)該蛋白有與碳酸酐酶(CA)相似的結(jié)構(gòu)，并被確認(rèn)為是一種碳酸酐酶的異構(gòu)酶，命名為CAIX（又稱G250、MN）。CAIX是一種位于細(xì)胞膜表面的糖蛋白，由酸性氨基酸組成的蛋白質(zhì)，相對分子質(zhì)量為58/54KD，由459個(gè)氨基酸構(gòu)成，分別構(gòu)成細(xì)胞內(nèi)區(qū)、跨膜區(qū)和細(xì)胞外區(qū)3部分。細(xì)胞外區(qū)又分為蛋白多糖區(qū)（PG）和碳酸酐酶區(qū)（CA）兩部分。

人類CAⅨ基因位于9p12.13,共含有10 898個(gè)堿基。CAⅨ的抗體為M75和NB100-417，兩者在免疫組織化學(xué)方法中證實(shí)效價(jià)相當(dāng)[2]。近來應(yīng)用免疫組化的方法發(fā)現(xiàn)CAⅨ在多種腫瘤組織中有表達(dá)，而在正常組織中僅限于胃黏膜和膽管上皮細(xì)胞等有少量表達(dá)。姜耀東等[3]成功從腎透明細(xì)胞癌中提取DNA完成G250基因克隆測序分析，為蛋白純化提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究表明，90%以上的腎癌原發(fā)灶有CAⅨ表達(dá)，尤其是透明細(xì)胞癌全部有表達(dá)，88%的轉(zhuǎn)移灶有該抗原表達(dá)，因此CAⅨ具有良好的腫瘤特異性，是較理想的腫瘤標(biāo)記物和腎癌治療靶點(diǎn)[4]。

1.2 CAⅨ的功能 CAⅨ是碳酸桿酶家族中的一員，為含金屬離子Zn+酶，基本功能為可逆性催化體內(nèi)水合反應(yīng)，使二氧化碳催化水合成碳酸氫鹽和氫離子（CO2+ H2O＜=＞HCO3-+H+），但其確切功能還有待進(jìn)一步研究。在正常組織中表達(dá)的CAⅨ可能與以下3點(diǎn)功能有關(guān)：（1）調(diào)節(jié)細(xì)胞外的酸環(huán)境，維持電解質(zhì)和酸堿平衡；（2）CAⅨ細(xì)胞表面有活性位點(diǎn)，為各種催化生理活動中提供H+或HCO-3；（3）需要HCO3-的生物合成反應(yīng)活動中，比如電解質(zhì)的分泌、骨的溶解與鈣化、脂肪形成、糖異生等。在腫瘤細(xì)胞中除上述功能可能還與以下功能有關(guān)：（1）使腫瘤細(xì)胞適應(yīng)缺氧環(huán)境而存活；（2）阻止腫瘤細(xì)胞吸收弱堿性化學(xué)治療藥物，對化學(xué)藥物產(chǎn)生耐受；（3）存在致癌基因樣特征，在調(diào)控細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)化方面有重要的作用，可誘導(dǎo)惡性表型。

2 CAⅨ與腫瘤免疫

2.1 CAⅨ的表達(dá) CAIX的表達(dá)是由缺氧誘導(dǎo)因子-1（HIF-1）轉(zhuǎn)錄合成的，在多數(shù)腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)，但在大多數(shù)正常的組織中不表達(dá)。Lieskovska等[5]在體外研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)環(huán)境中的某些細(xì)胞因子可誘導(dǎo)CAⅨ的表達(dá)。Wykoff等[6]在體外缺氧誘導(dǎo)下，發(fā)現(xiàn)膀胱癌、子宮頸癌、肺癌等惡性腫瘤細(xì)胞中均發(fā)現(xiàn)有CAⅨ的表達(dá)。VHL基因在對CAⅨ的表達(dá)似乎有關(guān)鍵作用，在VHL突變的腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)表達(dá)率高，當(dāng)引入野生型VHL基因到同樣的腎癌細(xì)胞株，可以發(fā)現(xiàn)CAⅨ在正常氧供環(huán)境中下調(diào)表達(dá)，在缺氧環(huán)境中誘導(dǎo)上調(diào)表達(dá)。CAⅨ基因啟動子中包含缺氧應(yīng)答因子，且由HIF-1激活[6]。CAIX的表達(dá)已經(jīng)被證實(shí)由轉(zhuǎn)錄因子即HIF-1α控制[7]。在正常氧供情況下，HIF-1α羥基化，通過與VHL蛋白（pVHL）結(jié)合的遍在蛋白化(作用)阻止形成活化的HIF-1α-HIF-1β復(fù)合物。在缺氧環(huán)境中，HIF-1α與pVHL結(jié)合受到抑制，HIF-1α與HIF-1β形成復(fù)合物，活化下游轉(zhuǎn)錄合成CAⅨ[8]。CAⅨ的表達(dá)與VHL蛋白密切相關(guān)，而在腎透明細(xì)胞癌患者常常存在VHL突變，因此在腎透明細(xì)胞癌患者中均發(fā)現(xiàn)有CAⅨ的表達(dá)[9]。Shin等[10]認(rèn)為，其他惡性腫瘤，如子宮頸癌、肺癌、膀胱癌等，CAⅨ表達(dá)也是由缺氧誘導(dǎo)形成。在正常組織和腫瘤組織，CAⅨ的表達(dá)存在差別。免疫組織化學(xué)和RNA印跡技術(shù)表明在正常組織呈非常局限的表達(dá)，胃黏膜、胎兒的肺組織以及肌肉組織中有適量的表達(dá)，更多散在表達(dá)在小腸、膽道系統(tǒng)及男性生殖系統(tǒng)。相反，一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)CAIX的mRNA在腎癌細(xì)胞中被大量發(fā)現(xiàn)[11]。Bui等[12]用CAⅨ的單克隆抗體行免疫組織化學(xué)方法檢測腎癌組織標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)90%以上的腎癌患者表達(dá)CAⅨ，且這種表達(dá)隨著病理分級的提高而降低。

2.2 CAⅨ與腎癌腫瘤免疫 腎癌細(xì)胞在快速生長的過程中會產(chǎn)生局部低氧區(qū)域，多個(gè)臨床研究表明腎腫瘤細(xì)胞對放射治療或化學(xué)治療不敏感與低氧有關(guān)。實(shí)驗(yàn)表明，低氧可能促進(jìn)腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[13]，低氧與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的關(guān)系在子宮頸癌和軟組織肉瘤中已得到證實(shí)[4,14]。充足的組織細(xì)胞營養(yǎng)供給是保持細(xì)胞生理功能的基礎(chǔ)，腎癌細(xì)胞代謝旺盛，組織細(xì)胞氧供與消耗失去了平衡，通過血管再生可能是腫瘤獲得氧氣和能量的一個(gè)重要途徑。無氧代謝是另一個(gè)重要途徑，腎癌細(xì)胞在缺氧的環(huán)境中通過無氧代謝產(chǎn)生大量丙酮、乳酸等酸性代謝產(chǎn)物使內(nèi)環(huán)境呈酸性。CAⅨ在腎癌細(xì)胞中的存在提示可以通過跨膜質(zhì)子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的pH值使在酸性環(huán)境中存活[15]。

3 CAⅨ與腎癌治療

3.1 腎癌治療現(xiàn)狀 腎癌被認(rèn)為是免疫性腫瘤，它對化療、放療均不敏感[16]，所以目前手術(shù)治療仍是主要的治療手段。對于有轉(zhuǎn)移的進(jìn)展期腎癌，免疫治療是除外科手術(shù)外的重要治療方法，目前主要應(yīng)用的是IL-2和INF-α。IL-2是美國FDA批準(zhǔn)的用于晚期腎癌治療的細(xì)胞因子，也是目前國內(nèi)外公認(rèn)的治療進(jìn)展期腎癌的一線用藥之一。但目前的臨床研究表明干擾素、IL-2在進(jìn)展期腎癌中的治療作用有限。國外大量臨床隨機(jī)對照研究報(bào)道，單用IFN-α治療轉(zhuǎn)移性腎癌其有效率僅10%～20%。IFN-α和IL-2聯(lián)合并未顯示出明顯優(yōu)越性[17]。2011年中國泌尿外科腎癌指南指出，雖然IFN-α聯(lián)合IL-2可提高對轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌治療的有效率，但單獨(dú)應(yīng)用或者聯(lián)合應(yīng)用均不能延長術(shù)后患者的總生存期和疾病無進(jìn)展生存期。

目前靶向藥物在進(jìn)展期腎癌中的療效得到肯定，推薦舒尼替尼、索拉非尼分別作為治療進(jìn)展期腎癌的一線和二線治療用藥[18]。然而在臨床中發(fā)現(xiàn)部分腎癌患者對靶向治療藥物療效差甚至無效。在腎癌術(shù)后的藥物治療中，不管使用免疫治療、靶向治療，均無合適的方法挑選出藥物治療效果最佳患者，在臨床上迫切需要1種或幾種方法來判斷最適合相應(yīng)治療方案的患者，而CAⅨ是很有潛力的判斷因子。

3.2 CAⅨ與腎癌的治療 腎癌CAⅨ的特異性表達(dá)在以下治療方法上提供了基礎(chǔ)：（1）細(xì)胞因子介導(dǎo)的免疫治療；（2）抗體介導(dǎo)的放射免疫治療；（3）CAⅨ為靶點(diǎn)的靶向治療。Ramsey[19]研究發(fā)現(xiàn)，不管在局限性還是在轉(zhuǎn)移性腎癌，CAⅨ的表達(dá)均提示對IL-2和IFN-α治療的反應(yīng)性。2005年，Atkins等[20]通過對66例接受IL-2治療的患者觀察，發(fā)現(xiàn)CAⅨ表達(dá)陽性患者反應(yīng)率達(dá)78%（21/ 27），而陰性患者只有51%（20/39），且CAⅨ表達(dá)陽性的患者中位生存期顯著延長達(dá)到5年以上。因此，CAⅨ的表達(dá)可能被用于轉(zhuǎn)移性腎癌的分層，并針對不同級別的轉(zhuǎn)移性腎癌采用相應(yīng)治療方案。

目前腫瘤疫苗的策略是增強(qiáng)抗原的加工呈遞，在轉(zhuǎn)移性腎癌中，應(yīng)用帶標(biāo)記的單克隆抗體（G250 mAb）和CAⅨ致敏的樹突狀細(xì)胞的治療效果還處于臨床試驗(yàn)Ⅰ期或Ⅱ期。齊桓等[21]證實(shí)CAⅨ致敏的樹突狀細(xì)胞瘤苗體外可有效的誘導(dǎo)特異性抗腎癌細(xì)胞效應(yīng)。Lamers等[22]聯(lián)合IL-2利用鼠源性單克隆抗體制備的T細(xì)胞治療CAⅨ表達(dá)陽性腎癌患者獲得滿意效果。

自從靶向藥物應(yīng)用于轉(zhuǎn)移性腎癌的治療后，其效果驚人，但Molina[23]發(fā)現(xiàn)，部分腎癌患者對靶向治療藥物無效，可能與腫瘤不依賴靶向藥物作用點(diǎn)如VEGE等有關(guān)。由此推斷，在靶向藥物作用點(diǎn)的上游因素如封閉HIF-1α，削減CAⅨ對腫瘤的細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的適應(yīng)能力，結(jié)合免疫治療可能進(jìn)一步提高靶向藥物的療效[23]。Choueiri等[24]對118例不同組織學(xué)類型患者研究發(fā)現(xiàn)，相對于舒尼替尼，CAⅨ陽性的患者對索拉非尼具有更好的反應(yīng)性，且透明細(xì)胞亞型較其他組織學(xué)亞型具有更明顯的腫瘤縮小率。Osunkoya等[25-27]的研究發(fā)現(xiàn)，免疫組化及PCR方法均證實(shí)CAⅨ在透明細(xì)胞組織亞型中表達(dá)最高，與之前的研究結(jié)果一致。目前CAⅨ在靶向治療中的作用還缺少多中心大樣本研究，根據(jù)CAⅨ的表達(dá)情況選擇不同的靶向藥物可能是今后研究重點(diǎn)。

利用131I標(biāo)記的CAⅨ單克隆抗體（M75/NB100-417）行放射免疫治療，使抗體靶向聚集殺傷表達(dá)CAⅨ陽性的腎癌細(xì)胞，為腎癌靶向治療提供另一個(gè)突破點(diǎn)。Brouwers等[28]已經(jīng)證實(shí)，通過2個(gè)放射免疫治療周期可以有效阻止轉(zhuǎn)移性腎透明細(xì)胞癌的進(jìn)展，但在其他病理類型中的療效還有待進(jìn)一步明確。

4 CAⅨ在腎癌的診斷及預(yù)后判斷的作用

4.1 CAⅨ與腎癌的診斷 利用核素標(biāo)記的針對CAⅨ的單克隆抗體（G250 mAb）進(jìn)行腫瘤放射免疫顯像，有望用于腎癌的早期診斷及分期。使用124-I標(biāo)記的CAⅨ抗體（G250 mAb）行PET檢查能夠準(zhǔn)確判斷腎透明細(xì)胞癌，Divgi等[29]在一期臨床試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)此檢查的敏感性、特異性分別達(dá)到94%、100%。

4.2 CAⅨ與腎癌的預(yù)后關(guān)系 多數(shù)學(xué)者研究認(rèn)為，通過檢測腎癌術(shù)后CAⅨ的表達(dá)，可以更準(zhǔn)確的判斷預(yù)后。高表達(dá)CAⅨ通常提示良好的預(yù)后，CAⅨ表達(dá)陽性率與腎癌的良好預(yù)后呈正相關(guān)，并且提示對系統(tǒng)治療具有更好的反應(yīng)性。CAⅨ陽性表達(dá)可能改善了腎癌細(xì)胞中的缺氧環(huán)境，降低腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的能力。Takacova[30]發(fā)現(xiàn)隨著病理分級的增加，CAIX的陽性率逐漸下降（50%T1 vs 17%T3）。Patard[31]通過對100例腎癌患者進(jìn)一步研究證實(shí)，低表達(dá)CAIX和VHL基因的突變是獨(dú)立預(yù)后因素。Martino[32]對52例轉(zhuǎn)移性腎癌研究發(fā)現(xiàn)，高表達(dá)CAIX的腎癌患者具有更長的中位生存期（25.5個(gè)月vs8.5個(gè)月）和更好的IL-2治療反應(yīng)性（37%vs 8%）。但Leibovich[33]通過對730例腎透明細(xì)胞癌患者研究并未得出上述結(jié)論。雖然單因素分析時(shí)，低表達(dá)CAⅨ與腎癌病死率相關(guān)，當(dāng)結(jié)合腫瘤壞死、核級等多因素分析時(shí)，CAⅨ與腎癌死病率不存在相關(guān)性。導(dǎo)致與前幾項(xiàng)研究完全不同的結(jié)果可能有兩個(gè)原因：第一，在患者數(shù)量及構(gòu)成比例上不同，本研究轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌只占11%，而其他研究達(dá)40%～60%；第二，免疫組織化學(xué)分析方法不同，本研究中使用微點(diǎn)陣方法而不是定量分析方法。多數(shù)研究認(rèn)為，CAIX是一個(gè)獨(dú)立的腎癌標(biāo)志物，低表達(dá)與腎癌的病死率呈正相關(guān)。

5 展望

在原發(fā)性腎透明細(xì)胞癌中，CAⅨ的表達(dá)是腎癌患者術(shù)后生存的預(yù)后因素，且能預(yù)測對IL-2治療的反應(yīng)性。臨床上發(fā)現(xiàn)部分腎癌患者對靶向藥物無效，CAIX的表達(dá)水平是否和耐藥性相關(guān)還需要進(jìn)一步研究。未來有望利用核素標(biāo)記的G250 mAb進(jìn)行腫瘤放射免疫顯像、放射免疫治療以及腫瘤疫苗的研究。根據(jù)CAIX篩選出免疫治療及靶向治療反應(yīng)性好的腎癌患者，根據(jù)不同患者個(gè)體化選取經(jīng)濟(jì)、高效、毒副反應(yīng)小的系統(tǒng)治療方案可能是今后研究的重點(diǎn)。

[1]Oosterwdk E,Ruiter D J,Hoedemaeker P J,et al．Monoclonal antibody G 250 recognizes a determinant present in renal-cell carcinoma and absent from normal kidney[Z]．Wiley Subscription Services,Inc．,A Wiley Company,1986:38,489-494．

[2]Al-Ahmadie H A,Alden D,Qin L X,et al．Carbonic anhydrase IX expression in clear cell renal cell carcinoma:an immunohistochemical study comparing 2 antibodies[J]．Am J Surg Pathol, 2008,32(3):377-382．

[3]姜耀東,鄭少斌,王戰(zhàn)會,等．腎癌腫瘤相關(guān)抗原G250/MN/CAIX基因的克隆、表達(dá)及鑒定[J]．中華泌尿外科雜志,2006,27(2):3．

[4]Al-Ahmadie H A,Alden D,Qin L,et al．Carbonic Anhydrase IX Expression in Clear Cell Renal Cell Carcinoma:An Immunohistochemical Study Comparing 2 Antibodies[J]．The American Journal of Surgical Pathology,2008,32(3):377-382．

[5]Lieskovská J,Opavsk?R,Záciková L,et al．Study of in vitro conditions modulating expression of MN/CA IX protein in human cell lines derived from cervical carcinoma[J]．Neoplasma,1999,46 (1):17-24．

[6]Wykoff C C,Beasley N J,Watson P H,et al．Hypoxia-inducible expression of tumor-associated carbonic anhydrases[J]．Cancer research,2000,60(24):7075-7083．

[7]Kaluz S,Kaluzov M,Liao S,et al．Transcriptional control of the tumor-andhypoxia-markercarbonicanhydrase9:A one transcription factor(HIF-1)show[J]?Biochimica et Biophysica Acta(BBA) -Reviews on Cancer,2009,1795(2):162-172．

[8]Zhou G X,Ireland J,Rayman P,et al．Quantification of carbonic anhydrase IX expression in serum and tissue of renal cell carcinoma patients using enzyme-linked immunosorbent assay:prognostic and diagnostic potentials[J]．Urology,2010,75(2):257-261．

[9]Sandlund J,Oosterwijk E,Grankvist K,et al．Prognostic impact of carbonic anhydrase IX expression in human renal cell carcinoma [J]．BJU International,2007,100(3):556-560．

[10]Shin K H,Diaz-Gonzalez J A,Russell J,et al．Detecting changes in tumor hypoxia with carbonic anhydrase IX and pimonidazole [J]．Cancer Biol Ther,2007,6(1):70-75．

[11]Chiche J,Ilc K,Laferrière J,et al．Hypoxia-Inducible carbonic anhydrase IX and XII promote tumor cell growth by counteracting acidosis through the regulation of the intracellular pH[J]．Cancer Research,2009,69(1):358-368．

[12]Patard J J,Fergelot P,Karakiewicz P I,et al．Low CAIX expression and absence of VHL gene mutation are associated with tumor aggressiveness and poor survival of clear cell renal cell carcinoma[J]．Int J Cancer,2008,123(2):395-400．

[13]Pérez-Sayáns M,Supuran C T,Pastorekova S,et al．The role of carbonic anhydrase IX in hypoxia control in OSCC[J]．Journal of oral pathology&medicine:official publication of the International Association of Oral Pathologists and the American Acade-my of Oral Pathology,2012,42(1):1-8．

[14]Fyles A,Milosevic M,Pintilie M,et al．Long-term performance of interstial fluid pressure and hypoxia as prognostic factors in cervixcancer[J]．Radiotherapyand Oncology:Journal of the EuropeanSocietyfor Therapeutic RadiologyandOncology, 2006,80(2):132-137．

[15]Stillebroer A B,Mulders P F,Boerman O C,et al．Carbonic anhydrase IX in renal cell carcinoma:implications for prognosis,diagnosis,and therapy[J]．Eur Urol,2010,58(1):75-83．

[16]Staehler M,Tullmann C,Nuhn P,et al．Systemic therapy of renal cell carcinoma[J]．Urologe A,2010,49(12):1543-1550,1551．

[17]Cohen H T,McGovern F J．Renal-cell carcinoma[J]．N Engl J Med,2005,353(23):2477-2490．

[18]Pirrotta M T,Bernardeschi P,Fiorentini G．Targeted-therapy in advanced renal cell carcinoma[J]．Current medicinal chemistry, 2011,18(11):1651-1657．

[19]Ramsey S．The role of the systemic inflammatory response as a biomarker in immunotherapy for renal cell cancer[J]．Mol Diagn Ther,2009,13(5):277-281．

[20]Atkins M,Regan M,McDermott D,et al．Carbonic anhydrase IX expression predicts outcome of interleukin 2 therapy for renal cancer[J]．Clin Cancer Res,2005,11(10):3714-3721．

[21]齊桓,鄭少斌,譚萬龍,等．腎癌相關(guān)抗原G250致敏的樹突狀細(xì)胞瘤苗體外誘導(dǎo)特異性抗腎癌免疫[J]．南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2007,27(8):3．

[22]Lamers C H,Sleijfer S,Vulto A G,et al．Treatment of metastatic renal cell carcinoma with autologous T-lymphocytes genetically retargeted against carbonic anhydrase IX:first clinical experience[J]．J Clin Oncol,2006,24(13):e20-e22．

[23]Molina A M,Motzer R J．Clinical practice guidelines for the treatment of metastatic renal cell carcinoma:today and tomorrow[J]．The oncologist,2011,16（Suppl 2）:45-50．

[24]Choueiri T K,Regan M M,Rosenberg J E,et al．Carbonic anhydrase IX and pathological features as predictors of outcome in patients with metastatic clear-cell renal cell carcinoma receiving vascular endothelial growth factor-targeted therapy[J]．BJU Int, 2010,106(6):772-778．

[25]Osunkoya A O,Yin-Goen Q,Phan J H,et al．Diagnostic biomarkers for renal cell carcinoma:selection using novel bioinformaticssystemsformicroarraydata analysis[J]．Humanpathology,2009,40(12):1671-1678．

[26]Oosterwijk-Wakka J C,Boerman O C,Mulders P F,et al．Application of monoclonal antibody G250 recognizing carbonic anhydrase IX in renal cell carcinoma[J]．Int J Mol Sci,2013,14(6): 11402-11423．

[27]Salinas-Sánchez A S,Giménez-Bachs J M,Serrano-Oviedo L,et al．Role of mitogen-activated protein kinase(MAPK)in the sporadic renal cell carcinoma[J]．Actas urologicas espa～nolas, 2012,36(2):99-103．

[28]Brouwers A H,Mulders P F A,de Mulder P H M,et al．Lack of efficacy of two consecutive treatments of radioimmunotherapy with 131I-cG250 in patients with metastasized clear cell renal cell carcinoma[J]．Journal of Clinical Oncology:official journal of theAmerican SocietyofClinicalOncology,2005,23(27): 6540-6548．

[29]Divgi C R,Pandit-Taskar N,Jungbluth A A,et al．Preoperative characterisation ofclear-cellrenalcarcinoma using iodine-124-labelled antibody chimeric G250(124I-cG250)and PET in patients with renal masses:a phase I trial[J]．The lancet oncology,2007,8(4):304-310．

[30]Takacova M,Bartosova M,Skvarkova L,et al．Carbonic anhydrase IX is a clinically significant tissue and serum biomarker associated with renal cell carcinoma[J]．Oncology letters,2013,5 (1):191-197．

[31]Patard J J,Fergelot P,Karakiewicz P I,et al．Low CAIX expression and absence of VHL gene mutation are associated with tumor aggressiveness and poor survival of clear cell renal cell carcinoma[J]．Int J Cancer,2008,123(2):395-400．

[32]de Martino M,Klatte T,Seligson D B,et al．CA9 gene:single nucleotide polymorphism predicts metastatic renal cell carcinoma prognosis[J]．The Journal of urology,2009,182(2):728-734．

[33]Leibovich B C,Sheinin Y,Lohse C M,et al．Carbonic anhydrase IX is not an independent predictor of outcome for patients with clear cell renal cell carcinoma[J]．J Clin Oncol,2007,25(30): 4757-4764．

2013-03-10）

（本文編輯：歐陽卿）

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吳海嘯，E-mail：whxmjwz@yahoo.com.cn