許麗華 車小群 龐小艷 陳 碧

廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院生殖中心，廣東湛江 524000

輔助生殖技術(shù)超促排卵中血清促黃體生成素對胚胎移植中妊娠結(jié)局的影響

許麗華 車小群 龐小艷 陳 碧

廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院生殖中心，廣東湛江 524000

目的 探討超促排卵中血清促黃體生成素（LH）對胚胎移植的影響。 方法 回顧性分析2013年1月～2014年1月在本中心進行體外受精/單精子注射（IVF/ICSI）118個新鮮周期的患者臨床資料，將患者注射絨毛膜促性腺激素（HCG）日測定結(jié)果分為A組（LH≥0.5 U/L，75例）和B組（LH<0.5 U/L，43例）。對兩組患者的重組人促卵泡激素（rhFSH）用藥量、受精率、臨床妊娠率、臨床流產(chǎn)率進行比較。 結(jié)果 A組Gn用藥量[（26.89±4.35）支]明顯少于 B 組[（30.67±7.68）支]，兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。 A 組的受精率（84.0%）與 B 組（82.7%）比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。A組的臨床妊娠率（54.7%）與B組（53.5%）比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。A組的臨床流產(chǎn)率（6.7%）明顯低于B組（11.6%），兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 在超促排卵中血清LH<0.5 U/L時，rhFSH用藥量增加，臨床流產(chǎn)率增加，對受精率和臨床妊娠率無影響。

促黃體生成素；受精；胚胎移植；臨床妊娠率

促黃體生成素（LH）是由垂體產(chǎn)生的一種激素，排卵前的峰值在卵母細胞最終成熟和排卵中起標(biāo)志性作用，是輔助生殖技術(shù)臨床決策的重要依據(jù)，在女性中有刺激卵巢分泌女性雌激素的作用[1]。LH的產(chǎn)生受下丘腦促性腺釋放激素的控制，同時受卵巢的正、負反饋調(diào)控。在月經(jīng)周期LH的釋放高峰與卵巢排卵有密切關(guān)系，LH高峰一經(jīng)出現(xiàn)，預(yù)示24～36 h卵巢排卵，因此可以在月經(jīng)周期中監(jiān)測血清LH峰值，以確定最佳受孕時間[2]。由于早期卵泡顆粒細胞缺乏LH受體表達，因此在早期卵泡LH主要作用于膜細胞，合體雄激素；顆粒細胞則在FSH作用下將雄激素轉(zhuǎn)換成雌激素。在卵泡持續(xù)生長過程中，顆粒細胞也會逐漸表達LH受體，此時LH主要是刺激顆粒細胞局部產(chǎn)生各種因子，從而促進顆粒細胞的生長。本研究回顧性分析118例患者的臨床資料，以探究卵泡中期內(nèi)源性LH對胚胎移植中卵巢反應(yīng)和妊娠結(jié)局的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年1月～2014年1月在本中心進行體外受精/單精子注射（IVF/ICSI）的 118例患者，年齡24～40 歲，平均（34.45±1.50）歲，不育年限 3～8 年。 將患者按照注射絨毛膜促性腺激素（HCG）日測定結(jié)果分為A組和B組，其中A組75例患者，平均年齡（30.3±4.3）歲，LH≥0.5 U/L；B 組 43 例患者，平均年齡（30.2±3.2）歲，LH<0.5 U/L。118例患者符合以下條件：年齡＜40歲，月經(jīng)周期正常，不孕原因：輸卵管因素、子宮內(nèi)膜異位癥、男方因素，采用黃體期長方案。兩組患者的一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

所有患者的超促排卵均采用促性腺激素釋放激素激動劑（GnRH-a）長方案，經(jīng)B超或血清孕酮水平證實已排卵，于黃體中期注射醋酸曲普瑞林[進口藥品注冊證號：H20100365；規(guī)格：0.1mg/支，生產(chǎn)廠家：輝凌（德國）制藥有限公司]0.05～0.1 mg，降調(diào)節(jié)后14 d檢查，達到垂頭完全降調(diào)節(jié)（卵泡直徑達≤5 mm；子宮內(nèi)膜≤5 mm；血 E2<50 ng/L、FSH<5 U/L、LH<5 U/L），采用 rhFSH（瑞士 Serono）促排卵，啟動劑 150～225 U/L，依據(jù)患者的年齡、基礎(chǔ)FSH、竇卵泡數(shù)個體化。于刺激第7天B超測定卵泡直徑并檢測血清LH、E2水平，必要時調(diào)整rhFSH的劑量?；颊呗雅萦?個直徑達19 mm或者是有2個直徑>18 mm時，停止注射醋酸曲普瑞林或rhFSH，予以4000～10 000 IU的hCG注射，取卵、受精、胚胎移植、黃體期的支持按本中心的常規(guī)進行。移植后2周檢測尿和血hCG，4周行B超，見到孕囊和原始心管搏動為臨床妊娠。

1.3 觀察指標(biāo)

對兩組患者的rhFSH用藥量、受精率、臨床妊娠率、臨床流產(chǎn)率進行比較。臨床妊娠率=臨床妊娠總數(shù)/移植周期數(shù)×100%；流產(chǎn)率=流產(chǎn)數(shù)/妊娠數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

所得數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料用±s表示，采用t檢驗，計數(shù)資料用檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

A組的受精率與B組的受精率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；A組的Gn用藥量明顯少于B組兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義 （P<0.05）；A組的臨床妊娠率明顯高于B組，兩組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；A組的臨床流產(chǎn)率明顯低于B組，兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表 1）。

表1 兩組患者一般資料和臨床情況的比較

3 討論

目前，大量研究已表明，LH對卵泡發(fā)育成熟的完成和卵母細胞發(fā)育潛力的獲得有重要作用[3]。FSH和LH是調(diào)控生理狀態(tài)下卵泡發(fā)育過程中的主要因素。由垂體前葉所分泌的兩種促性腺激素FSH和LH分別作用于卵巢卵泡顆粒細胞受體和卵泡膜細胞受體而發(fā)揮其生理效應(yīng)，調(diào)控正常卵泡的發(fā)育和卵巢類固醇激素的合成，LH是由垂體產(chǎn)生的一種激素，排卵前的峰值在卵母細胞最終成熟和排卵中起標(biāo)志性作用，是輔助生殖技術(shù)臨床決策的重要依據(jù)，在女性中有刺激卵巢分泌女性雌激素的作用。天然LH在垂體前葉合成，以高于FSH的幅度脈沖式釋放[4]。盡管單FSH就可維持卵泡發(fā)育，但仍需小劑量LH存在才能獲得足夠量的類固醇激素生成維持排卵前乃至轉(zhuǎn)化成黃體[5]。卵泡期血中LH的作用主要是為雌激素的合成提供底物雄烯二酮，在卵泡發(fā)育的中、晚期LH還刺激主導(dǎo)卵泡顆粒細胞上的孕激素受體的表達，能夠促進黃素化和孕激素的產(chǎn)生，以減緩顆粒細胞的增殖，同時孕激素還有增強雄激素的正反饋作用，促進在月經(jīng)周期LH峰值的形成。LH與卵巢膜細胞上特異性膜受體結(jié)合，LH結(jié)合的結(jié)果是包括腺嘌呤核苷酸環(huán)化酶和cAMP的生化途徑類固醇合成增加，其作用為刺激膜細胞產(chǎn)生雄激素，觸發(fā)排卵并支持黃體。LH受體亦可在卵泡發(fā)育最后階段有FSH刺激的顆粒細胞中表達。隨著LH分泌的增多，卵泡在其作用下逐漸發(fā)育、成熟、雌激素的分泌逐日增多[6]。LH對卵泡發(fā)育和卵母細胞質(zhì)量有重要作用，由于早期卵泡顆粒細胞缺乏LH受體表達，因此在早期卵泡LH主要作用于膜細胞，合體雄激素；顆粒細胞則在FSH作用下將雄激素轉(zhuǎn)換成雌激素。在卵泡持續(xù)生長過程中，顆粒細胞也會逐漸表達LH受體，此時LH主要是刺激顆粒細胞局部產(chǎn)生各種因子，從而促進顆粒細胞的生長[7]。

LH過高或過低對卵母細胞均有不良影響，過高的LH可使卵泡膜細胞分泌雄激素增加，這種卵泡內(nèi)高雄激素的微環(huán)境可導(dǎo)致顆粒細胞凋亡、卵泡發(fā)育閉鎖。過低LH 又使雌激素生成不足[6]。2001 年Balasch提出了“LH 治療窗”的概念，指出如果血中LH 水平未達到閾值，卵泡發(fā)育和內(nèi)膜增殖所需的雌激素水平產(chǎn)生將會不足[8-9]。只有在適宜范圍內(nèi)，LH 才可維持卵泡內(nèi)正常水平的雄激素，提高卵泡發(fā)育和卵母細胞質(zhì)量[10-11]。但是LH 閾值及上限各家報道不一。2002 年Humaidan 等報道，在激動劑周期中，LH 介于0.51～1.5 U/L的患者獲卵率、受精率、胚胎種植率及妊娠率更好，提示在激動劑長方案中晚卵泡期LH 的閾值可能為0.5 U/L，而其上限可能為1.5 U/L[12-13]。

本研究結(jié)果顯示， 控制性超促排卵周期中血清LH＜0.5 U/L，可使用rhFSH 劑量增加，與低濃度LH使卵母細胞成熟延遲有關(guān)。LH≥0.5 U/L 可縮短rhFSH的使用時間，減輕患者的經(jīng)濟負擔(dān)，臨床流產(chǎn)率更低，臨床結(jié)局更好。但本研究病例數(shù)不多，還需要更大樣本量的臨床資料進行進一步研究。

[1] 李軼，魏莉娜，熊永嶗，等.不同黃體生成素與卵泡刺激素比值的多囊卵巢綜合征患者抗苗勒管激素分泌特點及卵泡發(fā)育障礙機制[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2010，45（8）：131.

[2] 陳雷寧，全松，李紅，等.重組卵泡刺激素預(yù)充注射筆在控制性超促排卵中的臨床應(yīng)用[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2009，29（1）：100-104.

[3] Balasch J，F(xiàn)obregues F.Pregnancy after administration of highdosa recombinant human LH alone to support final stagesof follicular maturation in a woman with long -standinghypogonadotrophic hypogonadism[J].Reprod Biomed Online，2003，6（4）：427-431.

[4] 葉虹.高黃體生成素水平與早發(fā)黃體生成素峰的概念[J].生殖醫(yī)學(xué)雜志，2010，19（3）：15.

[5] 何冰，成俊萍，黃莉，等.促黃體生成素在卵泡發(fā)育及輔助生殖促排卵中的作用[J].中國臨床新醫(yī)學(xué)，2012，5（7）：656-659.

[6] 陳雪梅.不同藥物預(yù)處理多囊卵巢綜合征并不孕患者的療效及副反應(yīng)分析[J].實用醫(yī)學(xué)雜志，2011，27（15）：125-124.

[7] 路英麗，李蓉，喬杰，等.短方案超促排卵后卵泡晚期黃體生成激素對體外受精結(jié)局影響的研究[J].中國實用婦科與產(chǎn)科雜志，2008，24（5）：363-365.

[8] Balasch J，Vidal E，Penarrubia J，et al.Suppression of LHduring ovarian stmulation：analysing threshold values andeffects on ovarian respense and the outcome of assisted reproductionin down-regulated women stomulated with recombiantFSH[J].Hum Reprod，2001，16（8）：1636.

[9] Guimera M，Morales-Ruiz M，Jimenez W，et al.LH/HCG stimulationof VECF and adrenomedullin production by follicularfluid macrophages and luteinized granulose cells [J].Reprod Biomed Online，2009，18（6）：743-749.

[10] 陳玲琴. 促性腺激素釋放激素拮抗劑聯(lián)合卵巢溫和刺激在輔助生殖領(lǐng)域的應(yīng)用價值探討[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展，2012，21（10）：812-814.

[11] 宋文妍，孫瑩璞，金海霞，等.成熟卵母細胞玻璃化冷凍時機及解凍方法對輔助生殖結(jié)局的影響[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2010，45（8）：578-582.

[12] 湯江靜，邵敬於，段濤，等.輔助生殖技術(shù)中卵母細胞線粒體功能對胚胎發(fā)育的影響[J].國際生殖健康計劃生育雜志，2013，9（6）：464-467.

[13] 莊廣倫.必須重視輔助生殖技術(shù)可能風(fēng)險的防治[J].國際生殖健康/計劃生育雜志，2011，30（4）：263-264.

Impact of assisted reproductive technology of super ovulation in serum luteinizing hormone effects on pregnancy outcome in embryo transplantation

XU Li-hua CHE Xiao-qun PANG Xiao-yan CHEN Bi
Reproductive Center of the Affiliated Hospital of Guangdong Medical College,Zhanjiang 524000,China

ObjectiveTo explore the effect of super ovulation in serum luteinizing hormone(LH)on the embryo transplantation.Methods Retrospectively analysis was performed on the clinical data of patients with 118 fresh cycle of IVF/ICSI in our center from January of 2013 to January of 2014.Patients were divided into group A (LH≥0.5 U/L,75 cases)and group B(LH<0.5 U/L,43 cases)according to the determination results after the injection of human chorionic gonadotropin (HCG).The rhFSH dosage,fertilization rate,clinical pregnancy rate,abortion rate of two groups were compared.ResultsThe Gn dosage of patients in group A[(26.89±4.35)doses]was lower than that of group B[(30.67±7.68)doses],the difference was statistically significant between two groups(P<0.05).The fertilization rate of group A(84.0%)and group B(82.7%)had no statistical significance(P>0.05).The clinical pregnancy rate of two groups had no statistical significance (54.7%vs 53.5%,P>0.05).The clinical abortion rate of patients in group A (6.7%)was lower than that in group B(11.6%),the difference was statistically significant(P<0.05).ConclusionThe LH concentration of serum in the super ovulation less than 0.5 U/L can increase the rhFSH dosage and clinical abortion,and has no effect on the fertilization rate and clinical pregnancy rate.

Luteinizing hormone;Fertilization;Embryo transfer;Pregnancy rate

R711

B

1674-4721（2014）04（c）-0184-03

2014-03-17 本文編輯：林利利）