王東升，張世棟，董書偉，鄺曉嬌，魏立琴，嚴(yán)作廷

（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所，甘肅省中獸藥工程技術(shù)研究中心，蘭州 730050）

我國(guó)奶牛腐蹄病防治研究進(jìn)展

王東升，張世棟，董書偉，鄺曉嬌，魏立琴，嚴(yán)作廷

（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所，甘肅省中獸藥工程技術(shù)研究中心，蘭州 730050）

奶牛腐蹄病是影響我國(guó)奶業(yè)發(fā)展的重要疾病，常給奶業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重制約了奶業(yè)的健康快速發(fā)展。文章從我國(guó)奶牛腐蹄病的流行病學(xué)、診斷、預(yù)防和治療幾個(gè)方面進(jìn)行了綜述。

奶牛；腐蹄??；診斷；防治

腐蹄病是由壞死梭桿菌和節(jié)瘤擬桿菌混合感染引起的反芻動(dòng)物趾間皮膚及深層軟組織化膿壞死的一種高度接觸性傳染病，臨床上以動(dòng)物蹄部組織化膿壞死性分解、腐敗惡臭和角質(zhì)形成受阻為特征。目前，我國(guó)每年由于腐蹄病被迫過(guò)早淘汰的奶牛占淘汰總數(shù)的15%～30%，淘汰率占總淘汰率的19%，比其他疾病的淘汰率高4%～6%［1］。腐蹄病常導(dǎo)致奶牛產(chǎn)奶量降低，發(fā)情延遲或停止，治療費(fèi)用增加，過(guò)早淘汰，給奶牛養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重影響了我國(guó)奶牛的健康養(yǎng)殖。

1 腐蹄病的流行病學(xué)

隨著奶牛養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，奶牛肢蹄病已上升為僅次于乳房炎的第二大類疾病。我國(guó)不同地區(qū)奶牛腐蹄病的發(fā)病率不同，陜西舍飼牛群為30%～40%［2］，河北省為1.214%［3］，山東煙臺(tái)地區(qū)為5.7%［4］，黑龍江省為8.75%［5］，湖南省平均在50%左右［6］，南寧市為29.41%［7］。

我國(guó)奶牛腐蹄病多發(fā)生在潮濕多雨的夏秋季節(jié)，這是由于夏秋季節(jié)高溫潮濕，牛床衛(wèi)生條件差所致。南寧市腐蹄病的發(fā)病高峰期在5—8月，湖南地區(qū)在春、夏兩季發(fā)病的牛約占年群體發(fā)病率的77.8%。河北省廊坊市奶牛腐蹄病的發(fā)病高峰期為夏末秋初時(shí)節(jié)，每年7—9月發(fā)病數(shù)占全年的45.0%～48.6%［8］。但在奶牛養(yǎng)殖小區(qū)，春、夏、秋三季都有發(fā)生，有時(shí)發(fā)病比例高達(dá)40%以上［9］。

奶牛腐蹄病可發(fā)生于各個(gè)年齡階段。鄧益峰等［10］調(diào)查發(fā)現(xiàn)，奶牛蹄病發(fā)生率隨胎次不同而不同，以2～4胎的發(fā)病率最高，而且腐蹄病的發(fā)生率與品種有著緊密聯(lián)系，摩拉水牛、皮埃蒙特牛、德國(guó)黃牛和利木贊牛不易發(fā)病，而短角牛、荷斯坦牛、西門塔爾牛則多發(fā)。

2 腐蹄病的診斷

2.1 臨床診斷

根據(jù)腐蹄病的特征性臨床癥狀和病理變化（如趾間皮膚或皮下組織化膿、壞死、發(fā)出惡臭氣味等）可以作出初步診斷。

2.2 診斷技術(shù)

近年來(lái)，國(guó)內(nèi)一些學(xué)者開(kāi)展了奶牛腐蹄病診斷技術(shù)的研究，提出了一些新的診斷方法，極大地提高了該病的診斷水平。

2.2.1 PCR診斷方法 該方法操作簡(jiǎn)單、快速、特異性和敏感性高，在動(dòng)物病原診斷中應(yīng)用廣泛。邵西群等［11］根據(jù)節(jié)瘤擬桿菌已知纖毛蛋白基因序列，設(shè)計(jì)了依據(jù)I、Ⅱ

菌群的保守序列，建立了一種簡(jiǎn)單區(qū)分該菌菌群的PCR方法，可用于節(jié)瘤擬桿菌血清群流行病學(xué)調(diào)查。用該方法檢測(cè)臨床樣品發(fā)現(xiàn)，采自趾叉皮炎的16份臨床樣品PCR檢測(cè)呈陽(yáng)性，而采自其它蹄病后期癥狀臨床樣品PCR檢測(cè)均為陰性，表明該P(yáng)CR方法適宜于腐蹄病的早期診斷。

2.2.2 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）診斷法 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)是利用能識(shí)別靶序列上6個(gè)位點(diǎn)的4條特異性引物和一種具有鏈置換活性的Bst DNA聚合酶，在恒溫條件下快速擴(kuò)增DNA的一種新型體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。Sun等［12-13］建立了檢測(cè)奶牛腐蹄病壞死桿菌和節(jié)瘤擬桿菌的環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增方法（Fn-LAMP和Dn-LAMP）。Fn-LAMP與Dn-LAMP對(duì)壞死桿菌的檢測(cè)能力為1 CFU/mL，其與PCR法的符合率為92.0%，用Fn-LAMP和Dn-LAMP方法對(duì)189頭腐蹄病病牛進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果在189頭牛中，9頭為節(jié)瘤擬桿菌陽(yáng)性，95頭為壞死桿菌陽(yáng)性。Fn-LAMP和Dn-LAMP組合可用于奶牛腐蹄病的流行病學(xué)調(diào)查。

2.2.3 ELISA診斷方法 Guo等［14］利用壞死桿菌白細(xì)胞毒素PL2重組蛋白作為診斷抗原，建立了用于奶牛腐蹄病壞死桿菌抗體檢測(cè)的ELISA方法（rL-ELISA）。在rL-ELISA方法中，重組蛋白PL2與牛傳染性鼻氣管炎病毒、牛病毒性腹瀉病毒、輪狀病毒A型、大腸埃希氏菌和沙門氏菌的陽(yáng)性血清無(wú)交叉反應(yīng)。當(dāng)壞死桿菌感染牛7 d后，rL-ELISA診斷方法能夠檢測(cè)到壞死桿菌白細(xì)胞毒素陽(yáng)性抗體。通過(guò)臨床300份牛血清樣品，對(duì)以PL2重組蛋白為抗原的rL-ELISA和以壞死桿菌天然白細(xì)胞毒素為抗原的nL-ELISA進(jìn)行了對(duì)比分析，發(fā)現(xiàn)rL-ELISA與nL-ELISA具有較高的相關(guān)性，rL-ELISA相對(duì)于nL-ELISA的敏感性和特異性分別為96.43%和94.26%。表明rL-ELISA對(duì)于壞死桿菌感染引起的腐蹄病的早期診斷具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。

3 腐蹄病的治療

3.1 局部療法

腐蹄病主要采用局部治療，一般是先將患蹄局部清洗干凈后，在患部撒布或填塞高錳酸鉀粉或者中藥粉等，外敷松餾油或魚石脂，再用繃帶包扎患蹄。若病變延至深部組織，用雙氧水沖洗患部，對(duì)不易沖洗的可擴(kuò)創(chuàng)后再清洗，涂上消毒藥，并在保護(hù)蹄部干燥的同時(shí)進(jìn)行全身性治療。對(duì)重癥病例，除局部治療之外，還應(yīng)進(jìn)行全身抗生素治療。若疼痛嚴(yán)重者可于蹄部關(guān)節(jié)處以0.5%鹽酸普魯卡因青霉素50 mL注射封閉。

3.2 中獸醫(yī)治療

3.2.1 中藥療法 主要采用外治法。蔡榮珍等［15］用枯礬500 g，陳石灰500 g，熟石膏400 g，沒(méi)藥400 g，血竭250 g，乳香250 g，黃丹50 g，冰片50 g，輕粉50 g，共為極細(xì)末。填塞病牛蹄部膿腔，用繃帶包扎蹄，連用3劑，治療8例有效。逯克慶［16］用雄鴉礬散（雄黃10 g，鴨膽子10 g，枯礬30 g）適量涂布于創(chuàng)面上，外用5層魚石脂紗布條和繃帶固定，治療牛腐蹄病18例，治愈16例。金霞等［17］用腐蹄散、腐蹄膏治療奶牛腐蹄病18頭，用藥一次痊愈2頭，用藥2次痊愈7頭，用藥3次痊愈9頭，治愈率100%。謝仰民［18］用雄黃1份，百草霜1份，風(fēng)化石灰10份，混合研末，治療80頭病牛，治愈71頭，治愈率達(dá)88.8%。姚佃賓等［19］用中藥“枯礬散”（枯礬、龍骨、雄黃各等份，共為細(xì)末）治療病牛17例，1次治愈率達(dá)95%以上。

3.2.2 針灸和穴位注射療法 初期應(yīng)用寸子針，針刺毛邊穴、蹄頭穴、寸子穴等穴位，以減輕淤血，促進(jìn)血液循環(huán)，消除腫脹。也可用穴位注射進(jìn)行治療。梁新成等［20］局部涂抹硫酸銅或磺胺粉末后，并在蹄頭（前后）、纏腕（前后）、涌泉、滴水穴，分別注入青霉素160萬(wàn)IU，鏈霉素100萬(wàn)IU，0.25%～0.50%普魯卡因3～5 mL，治療奶牛腐蹄病效果好。

3.3 其他療法

3.3.1 液氮冷凍療法 用棉球蘸取液氮，迅速放在增生物上，使整個(gè)病變部接觸液氮連續(xù)幾次直至病變發(fā)生凍結(jié)為止，治療該病取得良好效果［21］。

3.3.2 封閉療法 王楓等［22］取新鮮雞蛋清20 mL，注射用水10 mL，混合均勻后，稀釋160萬(wàn)IU青霉素2支，分點(diǎn)注射在患部，隔日1次，治療奶牛腐蹄病100余例，治愈率達(dá)100%。賈素娟等［23］用氫化可的松30 mL、青霉素300萬(wàn)IU、普魯卡因5 mL混合，在腕關(guān)節(jié)前上方或跗關(guān)節(jié)外上方，做人字形皮下封閉注射，隔日1次，連用2次，治療該病療效顯著。

4 腐蹄病的預(yù)防

4.1 藥浴

用防腐劑進(jìn)行浴蹄對(duì)該病有較好的預(yù)防作用。據(jù)報(bào)道用硫酸銅和硫酸鋅可以防治奶牛腐蹄病。張澤強(qiáng)等［24］研究了10%硫酸鋅、10%硫酸銅和10%薄荷混合噴霧的方法治療該病的效果，結(jié)果表明硫酸鋅、硫酸銅和薄荷混合處理組的有效率和治愈率均較高。宋亞攀等［25］比較了10%硫酸鋅溶液、10%硫酸銅溶液、5%硫酸鋅與5%硫酸銅混合溶液、異戊二烯消毒液治療腐蹄病的效果。結(jié)果5%硫酸鋅和5%硫酸銅混合溶液處理組的有效率和治愈率均明顯優(yōu)于其他治療方法。

4.2 添加硫酸鋅

齊長(zhǎng)明等［26］于飼料中添加硫酸鋅，每頭每日添加2 g，再加上修蹄、4%硫酸銅浴蹄等措施，使蹄病的發(fā)病率從

31.7%下降到8.8%。此外，采用較大劑量的硫酸鋅(每日每頭12 g，分3次喂給）治療蹄底潰瘍和腐蹄病，療效甚佳。王猛等［27］發(fā)現(xiàn)在相同的飼養(yǎng)管理和環(huán)境條件下，在采取一致的修蹄、浴蹄等預(yù)防措施的基礎(chǔ)上，在飼料中添加適量硫酸鋅防治奶牛腐蹄病效果好。

4.3 疫苗預(yù)防

疫苗是防治奶牛腐蹄病最有效的方法，用疫苗防治該病取得了較好成效。王克堅(jiān)等［28］成功地研制出E型節(jié)瘤擬桿菌纖毛蛋白基因工程苗，還通過(guò)大腸桿菌宿主表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)了E型節(jié)瘤擬桿菌纖毛蛋白與綿羊IL-2融合基因纖毛蛋白，研制出了E型節(jié)瘤擬桿菌纖毛蛋白與綿羊IL-2融合基因工程苗。劉艷環(huán)等［29］研制出C型節(jié)瘤擬桿菌基因工程苗，這些基因工程苗對(duì)家兔和綿羊具有較好的免疫應(yīng)答和免疫保護(hù)性。郭華東［30］克隆了壞死梭桿菌白細(xì)胞毒素全長(zhǎng)基因后，利用原核表達(dá)系統(tǒng)成功地表達(dá)了含有壞死梭桿菌白細(xì)胞毒素蛋白主要抗原表位區(qū)的5個(gè)片段，動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果表明，5個(gè)重組白細(xì)胞毒素蛋白免疫的鼠能夠抵抗強(qiáng)毒株壞死梭桿菌A25的攻擊，同時(shí)，這5個(gè)重組白細(xì)胞毒素蛋白對(duì)鼠的免疫保護(hù)作用均優(yōu)于天然的白細(xì)胞毒素蛋白。

5 展望

綜上所述，隨著對(duì)國(guó)內(nèi)外奶牛腐蹄病的研究，對(duì)此病的病因及臨床癥狀以及造成的危害有了深入的了解，除了搞好奶牛的飼養(yǎng)管理和環(huán)境衛(wèi)生，提供全價(jià)營(yíng)養(yǎng)日糧，做好修蹄和護(hù)蹄等日常工作外，控制和降低該病的發(fā)病率還要在以下幾方面開(kāi)展研究工作。一是加強(qiáng)腐蹄病的快速、特異性診斷技術(shù)的研究，為該病的診斷提供技術(shù)支撐。二是利用現(xiàn)代生物技術(shù)，研究新型高效安全疫苗將是今后的研究重點(diǎn)，這將有助于預(yù)防本病的發(fā)生。三是利用現(xiàn)代生物技術(shù)、制藥技術(shù)，研制高效、安全、療程短以及使用方便的新獸藥，包括中獸藥膏劑、生物制劑、飼料添加劑等，這是今后的研究重點(diǎn)之一。利用這些技術(shù)措施防治腐蹄病，將有利于減少該病對(duì)奶牛養(yǎng)殖業(yè)造成的經(jīng)濟(jì)損失。

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Overview on Diagnosis and Prevention of Footrot in Dairy Cows

WangDong-sheng，ZhangShi-dong，Yan Zuo-ting，et al
（Lanzhou Institute ofHusbandryand Pharmaceutical Sciences ofCAAS，Engineering&TechnologyResearchCenterofTraditionalChineseVeterinaryMedicineofGansuProvince，Lanzhou730050，China）

Foot rot is a major disease affecting the dairy industry，which has caused large economic losses and seriously impeded rapid development of dairy industry in China.This article reviewed the epidemiology，diagnosis，prevention and treatment of foot rot in dairycows.

dairycow；foot rot；diagnosis；treatment

S858.23

A

2095-3887（2014）04-0066-03

10.3969/j.issn.2095-3887.2014.04.017

2014-04-22

"十二五"國(guó)家科技支撐計(jì)劃（2012BAD12B03）；中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程項(xiàng)目（1610322014028）

王東升（1979-），男，助理研究員，碩士。

嚴(yán)作廷（1962-），男，研究員，博士，主要從事奶牛疾病防治的研究。