黃飛燕，李干鵬，吳健君，張應(yīng)紅，唐榮平

（1. 臨滄師范高等?？茖W(xué)校 數(shù)理系，云南 臨滄 677000；2. 云南民族大學(xué) 化學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院 民族藥資源化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650500；3. 臨滄市鎮(zhèn)康縣忙丙中學(xué)，云南 臨滄 677000）

西南獐牙菜化學(xué)成分研究Ⅱ

黃飛燕1，李干鵬2，吳健君3，張應(yīng)紅1，唐榮平1

（1. 臨滄師范高等專科學(xué)校 數(shù)理系，云南 臨滄 677000；2. 云南民族大學(xué) 化學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院 民族藥資源化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650500；3. 臨滄市鎮(zhèn)康縣忙丙中學(xué)，云南 臨滄 677000）

西南獐牙菜為龍膽科獐牙菜屬植物，具有清熱解毒，利膽退黃的功效。采用現(xiàn)代分離分析技術(shù)從西南獐牙菜80%甲醇提取物的水溶部分中分離得到3個(gè)化合物，分別為異牡荊素、異紅草素、6''-阿拉伯糖基-異牡荊素，3種化合物均為首次從該屬植物中分離得到。

西南獐牙菜；黃酮類；HPLC；

西南獐牙菜系龍膽科、獐牙菜屬植物［1］。在云貴地區(qū)常用于治療肝炎、黃疸型肝炎、肝膽類疾?。?］。國外對于西南獐牙菜的化學(xué)成分及藥理研究報(bào)道較少。Goutam Brahmachari［3］，引用高光躍等［4］的研究證實(shí)西南獐牙菜中存在獐牙菜苷、龍膽苦苷和獐牙菜苦苷；RIOS J L［5］的綜述中提及西南獐牙菜提取物有抗炎及抗?jié)B出的作用；薛春迎、何廷農(nóng)、李德銖［6］報(bào)道了西南獐牙菜的大、小孢子發(fā)生及雌、雄配子體發(fā)育過程, 同時(shí)討論了獐牙菜屬寬絲組和多枝組的分類等級和系統(tǒng)演化關(guān)系；張俊巍、茅青［7］較早對其化學(xué)成分進(jìn)行了研究，從中分離得到5個(gè)化合物，分別為谷甾醇、齊墩果酸、山植酸、1,3，7,8-四羥基口山酮及獐牙菜皂甙（swericinctoside)，同時(shí)通過反相高效液相色譜法進(jìn)一步證實(shí)西南獐牙菜中含有龍膽苦苷、獐牙菜苷、獐牙菜苦苷；紀(jì)蘭菊、保怡、孫洪發(fā)等［8］研究結(jié)果中表明西南獐牙菜中存在大量的口山酮（xanthones）和裂環(huán)烯醚萜（secoiridoids）；耿家玲、耿長安、陳紀(jì)軍［9］的研究中，報(bào)道了15個(gè)化合物，首次分離得到(-)龍膽內(nèi)酯、angelone、3-表-蒲公英賽醇、間羥基苯甲醇、鄰苯二甲酸二甲酯、鄰苯二甲酸二異丁酯、3,4-二羥基苯甲酸和正三十一烷醇；筆者所在的課題組前期報(bào)道了10個(gè)環(huán)烯醚萜類化合物［10-11］，其中含3個(gè)新裂環(huán)烯醚萜類化合物：3,4,5,6-tetrahydro-8-hydroxy-6-(hydroxymethyl)pyrano［3,4-c］pyran-1(8H)-one 、3,4,5,6-tetrahydro-8-hydroxy-6-methylpyrano［3,4-c］pyran-1(8H)-one 、5,6-dihydro-4-(1,3-dihydroxybutan-2-yl)-3-(hydroxymethyl)pyran-2-one，首次從該屬植物中分離得到6′-O-葡萄糖基－獐牙菜苷，septemfidoside、馬錢苷酸、6′-O-葡萄糖基－獐牙菜苦苷。

為了研究其化學(xué)成分，筆者繼續(xù)對該植物80%甲醇提取物的水溶部分進(jìn)行分離純化，采用高效液相制備色譜、質(zhì)譜和核磁共振波譜等技術(shù)，進(jìn)一步從水溶性部分中分離、鑒定得到3個(gè)黃酮類化合物，3個(gè)化合物均為首次從該植物中分離得到。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 材料與儀器

Agilent 1200型高效液相色譜，XDB-C18(21.2× 250 mm)半制備柱，艾杰爾半制備柱（Venusil XBP-C18(10×250 mm)）；Bruker DRX-400型超導(dǎo)核磁共振儀（TMS為內(nèi)標(biāo)）；質(zhì)譜用API QSTARPulsar液相色譜/四極桿/飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜儀測定；MCI材料（Merck公司）；提取用甲醇為工業(yè)純（重蒸）；娃哈哈純凈水（過濾），二氯甲烷及其他試劑為分析純。

西南獐牙菜植物樣品于2009年10月采自云南玉溪新平縣哀牢山，經(jīng)云南中醫(yī)學(xué)院楊禮攀博士鑒定為西南獐牙菜，植物標(biāo)本（NO. 0601007）存于云南民族大學(xué)民族藥資源化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本室。

1.2 提取及分離

花期采集的西南獐牙菜全草在室內(nèi)陰干，稱重（4.5 kg）后粉碎至80目，用80 %的甲醇（料液比1:2）加熱超聲提取，共8次，每次4 h，提取液過濾、濃縮（甲醇回收）合并得棕色浸膏約880g，加水至懸浮狀，用二氯甲烷多次萃取。水溶部分經(jīng)過MCI脫色（甲醇洗脫）后經(jīng)大孔樹脂脫糖（甲醇:水）洗脫，得到水部分156 g、甲醇∶水部分273 g、甲醇部分45 g；取甲醇（70%）部分浸膏56 g用HPLC制備色譜進(jìn)行制備（色譜條件：制備色譜柱：XDB-C18(21.2×250 mm)；進(jìn)樣量：250 μL；洗脫劑：V甲醇∶V水∶V甲酸=35∶65∶0.5；流速：8 mL/min,按出峰情況劃段，旋蒸得到Fr1-5，然后用艾杰爾半制備柱（Venusil XBPC18（10×250 mm））進(jìn)行分離；進(jìn)樣量：80 μL；洗脫劑：V甲醇∶V水=35:65；流速：2 mL/min）進(jìn)行純化制備，分別得到化合物1（28.6 mg）、化合物2（17.2 mg）、化合物3（12.0 mg）。

2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 黃色粉末, 分子式:C21H21O101H-NMR (400 MHz, CD3OD) δH:7.84 (2H, d, J=7.2 Hz, H-2’, 6’), 6.93 (2H, d, J=7.7 Hz, H-3’, 5’), 6.60 (1H, s, H-3), 6.51(1H, s, H-8), 4.62 (1H, d, J=8.0 Hz, H-1’’), 4.20 (1H,dd, J=8.4, 9.8 Hz, H-2), 3.90 (1H, d, J=7.2 Hz,H-6’’), 3.75 (1H, dd, J=4.8, 12.0 Hz, H-6’’), 3.47(1H, m, H-3’’), 3.45 (1H, m, H-5’’), 3.38 (1H, m, H-4’’);13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δC:184.1 (C-4), 166.2 (C-2), 165.0 (C-7), 162.8 (C-40), 162.1 (C-5), 158.7 (C-9), 129.5 (C-2’,6’), 123.1 (C-10), 117.0 (C-3’, 5’ ), 109.2 (C-6), 105.2 (C-1’ ),103.9 (C-3 ), 95.2 (C-8 ), 82.7 (C-5’’), 80.1 (C-3’’), 75.3 (C-1’’), 72.5 (C-4’’), 71.8 (C-2’’), 62.8 (C-6’’).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)值［12］對照基本一致，化合物1鑒定為異牡荊素(Isovitexin)。

化合物2 黃色粉末, 分子式:C26H28O141H-NMR (400 MHz, CD3OD) δH: 7.87 (2H, d, J=7.2 Hz, H-2’, 6’), 6.94 (2H, d, J=7.7 Hz, H-3’ , 5’), 6.70 (1H, s, H-3), 6.45(1H, s, H-8), 4.98(1H, s, H-1’’’), 4.61 (1H, d, J=8.0 Hz, H-1’’), 4.23 (1H,dd, J=8.4, 9.8 Hz, H-2), 3.94 (1H, d, J=7.2 Hz,H-6’’), 3.74 (1H, s, H-2’’’), 3.72 (1H, dd, J=4.8, 10.8 Hz, H-6’’), 3.49 (1H, s, H-3’’’), 3.46 (1H, m, H-4’’’), 3.45(1H, m, H-3’’), 3.45 (1H, m, H-5’’), 3.88 (1H, dd, J=4.8, 11.2 Hz, H-5’’’), 3.64 (1H, dd, J=6.0, 12.0 Hz, H-5’’’), 3.32 (1H, s, H-4’’);13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δC: 183.9 (C-4), 166.1 (C-2), 165.0(C-7), 162.7 (C-40), 162.1 (C-5), 158.7 (C-9), 129.4 (C-2’,6’), 123.0 (C-10), 117.1 (C-3’, 5’), 108.9 (C-6), 105.2 (C-1’), 105.1 (C-1’’’), 103.3 (C-3), 95.4 (C-8), 81.3 (C-5’’), 79.9 (C-3’’),75.4 (C-1’’), 74.2 (C-2’’’), 72.6 (C-4’’), 72.4 (C-3’’’), 71.9 (C-2’’), 70.2 (C-5’’’）, 69.6 (C-4’’’), 66.3 (C-6’’). 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)值［12］對照基本一致，僅在6''多了一個(gè)阿拉伯糖基，化合物2鑒定為6’’-阿拉伯糖基-異牡荊素(6''-Arabinosyl-Isovitexin)。

化合物 3 黃色粉末,分子式: C21H21O111H-NMR (400 MHz, C5D5N) δH: 7.44 (1H, dd, J = 2.0 Hz, 8.4 Hz, H-6’), 7.25 (1H, d, J = 8.4 Hz, H-2’), 6.87 (1H, s, H-5’), 6.67 (1H, S, H-3), 4.58(1H, d, J = 10.0 Hz, H-1’’).13C-NMR (400 MHz, C5D5N) δC: 183.3 (C-4)165.2 (C-2), 165.1 (C-7), 162.5 (C-5), 158.0 (C-9), 152.2 (C-4’), 148.3 (C-3’), 123.3 (C-1’), 120.0 (C-6’), 117.3 (C-5’), 115.1 (C-2’), 110.5 (C-6), 105.3 (C-10), 104.4 (C-3), 95.1 (C-8), 83.4 (C-5’’), 81.0 (C-3’’), 76.0 (C-1’’), 73.4 (C-2’’), 72.4 (C-4’’), 63.2 (C-6’’). 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)值［13］對照基本一致，化合物3鑒定為異紅草素(Isoorientin)。

3 討論

我國獐牙菜屬植物種類較多，分布面積廣，儲(chǔ)量大，但列入藥典作為藥用和保健的品種很少，因此很有必要加大對該屬植物的研究力度。云南省獐牙菜屬植物資源豐富，但化學(xué)成分及藥理研究工作還比較薄弱。試驗(yàn)對采自云南的西南獐牙菜進(jìn)行化學(xué)成分研究，采用高效液相色譜技術(shù)及現(xiàn)代波譜技術(shù)，從該植物水溶部分分離、鑒定了3個(gè)黃酮類化合物，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，該類化合物具有一定的抗癌活性。為更好地開發(fā)和利用云南豐富的獐牙菜屬植物藥資源，筆者將繼續(xù)展開研究，進(jìn)一步改進(jìn)提取和分離方法，以期得到更多的同類化合物和新的活性成分。同時(shí)對分離得到的化合物進(jìn)行活性測試，通過高效液相色譜分析，比較不同品種之間的化學(xué)成分差異，有助于辨認(rèn)藥材品質(zhì)和尋找習(xí)用藥材的替代品，對于植物分類學(xué)研究具有一定的參考價(jià)值，也為該屬植物藥理藥效相關(guān)學(xué)科的研究提供參考依據(jù)。

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The Second Study of Chemical Compositions of South-east Swertia Plant

HUANG Fei-yan1, LI Gan-peng2, WU Jian-jun3, ZHANG Ying-hong1, TANG Rong-ping1
(1. Department of Mathematics and Physics, Lincang Teachers College, Lincang 677000, China; 2. Key Lab of Ethnic Medical Resources in School of Chemistry and Biology Technology, Yunnan Nationality University, Kunming 650500, China; 3. Mangbin Middle School in Zhenkang, Lincang 677000, China)

South-east swertia plant belongs to gentianaceae swertia genus with the functions of heat-clearing, detoxicating, cholagogic and anti-inflammatory. From water soluble part of 80% methanol extracts of southwest swertia plant three compounds, isovitexin, Homoorientin, 6''-arabinose isovitexin, are isolated using modern separation and analysis techniques, which are first extracted from the plant.

South-east swertia plant; flavonoids; HPLC

R284.2

A

1674-9200（2014）03-0031-03

（責(zé)任編輯 張 鐵）

2014-03-18

教育部科學(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項(xiàng)目“云南產(chǎn)獐牙菜屬植物藥的活性成分研究”（208132）；臨滄師范高等?？茖W(xué)校資助項(xiàng)目“西南獐牙菜化學(xué)成分研究”（LCSZL201204）。

黃飛燕（1984-），男，湖南郴州人，臨滄師范高等?？茖W(xué)校數(shù)理系講師，碩士，主要從事天然藥物化學(xué)研究。