徐桂杰 蘇乙拉 內(nèi)蒙古錫林郭勒職業(yè)學(xué)院 026000

目前，犬布魯氏菌病在全球多個國家和地區(qū)都有發(fā)生，而且發(fā)病數(shù)量逐年上升，由犬布魯氏菌病感染人的病例報道也日益增多。因此犬布魯氏菌病的控制和根除對人類健康和公共衛(wèi)生安全具有重要意義。開展錫盟地區(qū)犬感染布魯氏菌病的血清學(xué)調(diào)查，可以了解犬布病在本地區(qū)的流行情況，并且能為預(yù)防和控制人間犬布魯氏菌感染提供參考。

1 實驗方法

1.1 試驗材料

從錫盟地區(qū)隨機采集145 只犬的血樣。

1.2 試驗方法

無菌采集受檢犬的靜脈血1.0～1.5mL，離心析出血清-20℃冷凍備用。進行虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗。

（1）虎紅平板凝集試驗∶于潔凈陶瓷板上滴加30uL 抗原，隨后加入30ul 受檢血清，攪拌混勻，同時設(shè)立陽性和陰性血清對照。

（2）試管凝集試驗∶對平板凝集試驗顯示陽性的血清抗體進行半定量檢測。

(1)于96 孔板第一孔加入200uL0.5%石炭酸，以后每孔加人100uL0.5%石炭酸。

(2)于第一孔中加入受檢血清20ul，混合均勻后吸取20uL 加入第二孔中，依次做倍比稀釋。即從第1 至第12 孔血清稀釋度分別為1∶10、1∶20、1∶40、l∶80、1∶160、1∶320、1∶640……。

(3)將100 uL20 倍稀釋的抗原加入各血清中，振蕩混勻，此時血清稀釋度分別為1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640、1∶1280……。

(4)同時設(shè)立陽性血清和陰性血清對照。

(5)置于濕盒中放入3 度溫箱，24h 后取出讀取結(jié)果。

1.3 結(jié)果判定

(1)虎紅平板凝集試驗：在陽性和陰性對照成立的前提下，受檢血清在4min 內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象者判為陽性(+)，無凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色者判為陰性(一)。

(2)試管凝集試驗：在陽性和陰性對照成立的前提下，以出現(xiàn)50%以上凝集現(xiàn)象的最高稀釋度判為血清抗體效價。血清效價l∶80 以上判為陽性；1∶20和1∶40 判為疑似反應(yīng)；無凝集現(xiàn)象，液體均勻渾濁者判為陰性。

2 結(jié)果分析

(1)用虎紅平板凝集試驗，從錫盟地區(qū)采集的145份受檢血清中檢出陽性血清7 份，陽性率為4.82%。

(2)對7 份陽性血清進行的試管凝集試驗顯示：陽性血清2 份(抗體效價為1∶80)，陰性血清3 份，疑似血清2 份。

(3)通過血清學(xué)檢測可判為布魯氏菌感染犬2例，占總樣本數(shù)的1.37%。

(4)試管凝集試驗驗證平板凝集試驗，其符合率為28.5%(2／7)。

3 討論

使用平板凝集試驗不能對布魯氏菌病進行確診，可作為篩選試驗,結(jié)合患犬發(fā)病情況，試管凝集試驗的特異性較高。通過血清學(xué)檢測可判定布魯氏菌感染率為1.37%。

4 預(yù)防

養(yǎng)犬業(yè)的發(fā)展給公共衛(wèi)生帶來了許多問題，狗咬傷人同時能傳染很多種人畜共患的傳染病,其中犬布病應(yīng)引起重視。隨著城市家養(yǎng)寵物犬的逐年增多，寵物犬中本病的流行情況也是一個值得研究的問題。在牧區(qū)，犬多因進食患病動物臟器而感染本病。人與病犬密切接觸,病犬的分泌物中帶有的布氏桿菌極有可能使人感染。因此要加強犬的管理,防止其感染布氏桿菌病。定期對其進行血清學(xué)檢查,一旦發(fā)現(xiàn)后及時進行無害處理,將犬尸藥物消毒、焚燒或深埋處理。養(yǎng)犬者應(yīng)提高警惕，須經(jīng)常對環(huán)境及犬進行藥物消毒,以防布氏桿菌病傳染給人。