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      1950MHz GSM-Talk信號(hào)對(duì)睪丸支持細(xì)胞增殖和分泌功能的影響

      2014-03-27 01:58:12林艷云柏強(qiáng)善安廣洲丁桂榮郭國(guó)禎中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)軍事預(yù)防醫(yī)學(xué)院放射醫(yī)學(xué)教研室西安7003
      關(guān)鍵詞:睪丸試管射頻

      杜 樂 周 艷 林艷云 柏強(qiáng)善 張 彬 安廣洲 苗 霞 丁桂榮 郭國(guó)禎(中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)軍事預(yù)防醫(yī)學(xué)院放射醫(yī)學(xué)教研室 西安 7003)

      2(中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)員旅 西安 710032)

      隨著無線通訊事業(yè)的飛速發(fā)展和移動(dòng)電話在全世界范圍內(nèi)的普及,射頻輻射對(duì)人類健康的影響已經(jīng)成為生物電磁學(xué)和環(huán)境醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)問題[1-3]。研究表明,睪丸是電磁輻射的敏感靶器官之一。一定參數(shù)的射頻輻射可以引起睪丸結(jié)構(gòu)和功能的損傷,造成性功能和生育能力下降[4]。

      支持細(xì)胞(Sertoli 細(xì)胞)是位于生精上皮的壁細(xì)胞,該細(xì)胞位于管壁基底膜并延伸至曲細(xì)精管管腔,沿著支持細(xì)胞胞體,精原細(xì)胞發(fā)育至成熟精子的所有形態(tài)、生理變化過程都在此發(fā)生。作為與生精細(xì)胞接觸的惟一體細(xì)胞,支持細(xì)胞在生精過程中發(fā)揮至關(guān)重要的調(diào)控作用[5]。其主要作用是在精子生成過程中,Sertoli細(xì)胞為精子發(fā)生提供物理支撐和穩(wěn)定的微環(huán)境,并為精細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)和發(fā)育所需的細(xì)胞因子[6]。研究表明,支持細(xì)胞能分泌多種細(xì)胞因子,其中研究較多的是干細(xì)胞因子(SCF)和膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)生長(zhǎng)因子(GDNF)。據(jù)報(bào)道,SCF和GDNF能夠促進(jìn)精原干細(xì)胞的增殖與分化[7-11]。

      本研究以建系的小鼠睪丸支持細(xì)胞(TM4)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,對(duì)其進(jìn)行連續(xù)5 d的1950 MHz GSM信號(hào)輻照,探討該條件下射頻輻射對(duì)TM4細(xì)胞增殖和分泌功能的影響,為明確射頻輻射對(duì)人類生殖健康的影響提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1 材料

      HERAcell 240i 細(xì)胞培養(yǎng)箱(Thermo),DMEM/F12 1:1(Thermo),胎牛血清(杭州四季青),T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶(Nunc),96 孔細(xì)胞培養(yǎng)板(Nest),電熱恒溫水浴箱(上海醫(yī)療器械廠),CCK-8(碧云天),Model680 酶標(biāo)儀(Bio-Rad),BrdU試劑盒(merk),兔抗小鼠Ki67抗體(Abcam),山羊抗兔熒光二抗(博士德),熒光倒置顯微鏡(Leica),ELISA試劑盒(Bio-Swamp),美國(guó)Bection Dickinson公司流式細(xì)胞儀(BD FACSAria),光學(xué)顯微鏡(Olympus),臺(tái)式低溫高速離心機(jī)(Zentrifugen),超凈工作臺(tái)(蘇州凈化設(shè)備公司)。

      1.2 TM4細(xì)胞培養(yǎng)及傳代

      TM4細(xì)胞由第四軍醫(yī)大學(xué)病理生理學(xué)教研室的張遠(yuǎn)強(qiáng)教授惠贈(zèng)。細(xì)胞于37 ℃、5% CO2孵箱中培養(yǎng),培養(yǎng)液為DMEM/F12 1:1(含10%胎牛血清、100 μg·mL?1青霉素、100 μg·mL?1鏈霉素、2.50 mmol·L?1谷氨酰胺和15 mmol·L?1HEPES),每2 d換液一次。當(dāng)細(xì)胞密度為80%?90%時(shí),用胰酶消化傳代。

      1.3 射頻電磁場(chǎng)輻照系統(tǒng)

      輻照系統(tǒng)(sXc-1950 MHz)購(gòu)自瑞士IT’IS公司,主要包括4部分:一個(gè)射頻輻射發(fā)生器,一個(gè)專制的功能發(fā)生器,一個(gè)狹窄的帶狀放大器和兩個(gè)矩形的波導(dǎo)腔。每個(gè)波導(dǎo)腔可放置6個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)皿(直徑35 mm),一個(gè)波導(dǎo)腔產(chǎn)生射頻電磁場(chǎng),用于細(xì)胞輻照;另一個(gè)波導(dǎo)腔不產(chǎn)生射頻電磁場(chǎng),用于細(xì)胞假輻照。通過計(jì)算機(jī)隨機(jī)選擇輻照組和假輻照組,并對(duì)整個(gè)細(xì)胞暴露系統(tǒng)進(jìn)行比吸收率(0?4.0 W·kg?1)定量和全反饋控制。該系統(tǒng)以1950 MHz頻率穩(wěn)定運(yùn)轉(zhuǎn)。整個(gè)輻照過程中,細(xì)胞處于(37±0.1) ℃、5%CO2的環(huán)境中。輻照組和假輻照組溫度差控制在0.1 ℃以內(nèi)。

      1.4 輻照程序

      將TM4細(xì)胞制備成1.5×103個(gè)·mL?1的細(xì)胞懸液,接種于35 mm培養(yǎng)皿,每皿接種3 mL。細(xì)胞接種后24 h,更換新鮮培養(yǎng)液,并將其隨機(jī)分為2組,分別置于輻照裝置的兩個(gè)小室中:一個(gè)小室產(chǎn)生GSM信號(hào),用于細(xì)胞輻照;另一個(gè)小室不產(chǎn)生GSM信號(hào),用于假輻照。輻照參數(shù)為:GSM-Talk信號(hào),1950 MHz連續(xù)波,比吸收率為3 W·kg?1,輻照時(shí)間為5 d。

      1.5 CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖情況

      TM4細(xì)胞輻照結(jié)束后,細(xì)胞用 0.25%胰酶消化為單細(xì)胞懸液,離心(800 r·min?1, 5 min),收集細(xì)胞沉淀,用含10%血清的DMEM/F12 1:1 培養(yǎng)液重懸,制成單細(xì)胞懸液后進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),將細(xì)胞密度調(diào)整至1×104個(gè)·mL?1。用移液器吸取100 μL稀釋后的細(xì)胞懸液接種到96 孔板上,每組8個(gè)復(fù)孔,總共接種5塊96孔板,分別檢測(cè)細(xì)胞輻照后1?5 d的增殖情況。將接種后的96孔板置于37 ℃、5%CO2孵箱中,于培養(yǎng)24 h后,取一塊96孔板,每孔加入10 μL CCK-8溶液,低速震蕩10 min,37 ℃孵育4 h后,在酶標(biāo)儀上,選擇450 nm波長(zhǎng),測(cè)定各孔吸光度值(OD值)。后面4 d的加試劑時(shí)間,試劑量,測(cè)定方法同第1 d。計(jì)算每組OD值,算術(shù)平均數(shù)繪制折線圖。

      1.6 BrdU檢測(cè)細(xì)胞增殖情況

      按照BrdU試劑盒說明進(jìn)行操作。根據(jù)CCK-8檢測(cè)結(jié)果,選取輻照后1 d和3 d的細(xì)胞(輻照組和假輻照組)進(jìn)一步檢測(cè)細(xì)胞輻照后增殖情況,在輻照后1 d,每組取兩個(gè)皿,0.25%胰酶消化為單細(xì)胞懸液,離心(800 r·min?1, 5 min),收集細(xì)胞沉淀,用含10%血清的DMEM/F12 1:1 培養(yǎng)液重懸,制成單細(xì)胞懸液后進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),將細(xì)胞密度調(diào)整至1×105個(gè)·mL?1,每組接種100 μL于96孔板中,每組設(shè)3個(gè)樣品復(fù)孔,1個(gè)空白對(duì)照和1個(gè)背景孔。空白對(duì)照孔只加100 μL培養(yǎng)液(不加細(xì)胞懸液),背景孔只加100 μL細(xì)胞懸液(不加BrdU標(biāo)記物)。在每個(gè)樣品孔中加20 μL BrdU工作貯存液。在孵箱中溫育2?24 h。去除孔中內(nèi)容物:將96孔板顛倒并用紙巾輕輕將殘液除去。在每孔中加200 μL固定液。室溫下溫育30 min。去除孔中內(nèi)容物:將96孔板顛倒,在紙巾上扣擊板將殘液除去。然后將板置于4 ℃條件下1周。用抗體稀釋液將100×抗BrdU抗體稀釋100倍,在每孔中加100 μL稀釋后的溶液,室溫下溫育1 h。在每孔中加滿1×洗劑液洗3次。在紙巾上輕輕去除殘液。在每孔加 100 μL共軛稀釋液,室溫下溫育30 min。洗劑同前。在所有板孔中加滿dH2O,將96孔板顛倒,在紙巾上扣擊板將殘液除去。在每孔中加100 μL底物溶液,室溫避光溫育15 min。在每孔中加100 μL終止液,加樣順序同加底物順序。用分光光度計(jì)在雙波長(zhǎng)450?540 nm(或450?595 nm)下測(cè)定每孔的吸光度(OD值)。每組OD值=樣品孔的平均OD值?空白孔OD值?背景孔OD值。

      1.7 免疫熒光檢測(cè)細(xì)胞增殖標(biāo)志物表達(dá)情況

      輻照后,將細(xì)胞接種于12孔板內(nèi)的無菌蓋玻片上,接種量為800個(gè)細(xì)胞/孔,在輻照后第3 d,此時(shí)每孔的細(xì)胞量大約為50%?60%,用多聚甲醛室溫固定30 min;PBS洗3次,每次5 min;0.15%TritonX-100室溫透化10?15 min;PBS洗3次,每次5 min ;5%山羊血清室溫封閉15?20 min;PBS洗3次,每次5 min ;加一抗:兔抗小鼠Ki67(用PBS稀釋Ki67,稀釋比為1: 50),放入濕玻璃皿中4 ℃孵育過夜。取出濕玻璃皿至常溫復(fù)溫0.5 h,PBS洗3次,每次5 min;常溫、避光條件下孵育二抗:山羊抗兔488(用PBS稀釋二抗,稀釋比為1:500)1 h;PBS洗3次,每次5 min;常溫避光條件下孵育DAPI(用PBS稀釋DAPI,稀釋比為1:20) 5 min;PBS洗2次,每次5 min;在熒光顯微鏡下觀察和拍攝圖片。

      1.8 ELISA檢測(cè)TM4細(xì)胞分泌因子表達(dá)情況

      輻照結(jié)束后,收取1?5 d的細(xì)胞上清,檢測(cè)TM4細(xì)胞輻照后1?5 d分泌SCF(或GDNF)的濃度。標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:準(zhǔn)備小試管6只,依次編好號(hào)碼,先在各小試管中加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100 μL,然后取原濃度標(biāo)準(zhǔn)品100 μL加入一只已編好號(hào)的試管中,充分混勻;再在該試管中取100 μL加入第二支試管中,充分混勻;再在該試管中取100 μL加入第三只試管中,充分混勻;再在該試管中取100 μL加入第四只試管中,充分混勻;再在該試管中取100 μL加入第五只試管中,充分混勻;然后在該試管中取100 μL,棄掉。第六只試管作為0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋后各管濃度分別為2400、1200、600、300、150 和0 pg·mL?1。在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,依次加入不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品50 μL(每個(gè)濃度做2個(gè)復(fù)孔)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品、酶標(biāo)試劑及生物素標(biāo)記的抗SCF(或GDNF)抗體,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品40 μL,然后再加生物素標(biāo)記的抗SCF(或GDNF)抗體10 μL。加樣:將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37 ℃溫育30 min。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 s后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50 μL,空白孔除外。溫育:操作同前。洗滌:操作同前。顯色:每孔先加入顯色劑A 50 μL,再加入顯色劑B 50 μL,輕輕震蕩混勻,37 ℃避光顯色15 min。終止:每孔加終止液50 μL,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測(cè)定:以空白孔調(diào)零,在450 nm波長(zhǎng)處,依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15 min以內(nèi)進(jìn)行。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算TM4細(xì)胞(樣品孔)分泌SCF(或GDNF)的濃度。

      1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

      實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS17.0軟件包分析,樣本描述用±s表示,兩組間樣本均數(shù)比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),p<0.05或p<0.01時(shí)認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

      2 結(jié)果

      2.1 CCK-8檢測(cè)GSM-Talk信號(hào)連續(xù)輻照5d對(duì)TM4細(xì)胞增殖的影響

      與假輻照組相比,GSM-Talk信號(hào)連續(xù)輻照細(xì)胞5 d后, TM4細(xì)胞增殖在輻照后2?5 d受到明顯抑制,具體見圖1。

      圖1 輻照后不同時(shí)間TM4細(xì)胞增殖情況**, p<0.01, 與假輻照組相比Fig.1 TM4 cell proliferation at different time points after radiation(**, p<0.01, vs.control group)

      2.2 BrdU檢測(cè)GSM-Talk信號(hào)連續(xù)輻照5d對(duì)TM4細(xì)胞增殖的影響

      BrdU檢測(cè)結(jié)果表明,TM4細(xì)胞連續(xù)暴露于GSM-Talk信號(hào)5 d后,細(xì)胞增殖受到抑制,輻照后3 d兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05),見圖2。

      圖2 輻照后第1 天和第3 天TM4細(xì)胞增殖情況Fig.2 TM4 cell proliferation at 1 d and 3 d after radiation

      2.3 GSM-Talk信號(hào)連續(xù)輻照5d對(duì)TM4細(xì)胞增殖標(biāo)志物Ki67表達(dá)的影響

      射頻輻照后第3 d,免疫熒光結(jié)果顯示,輻照組TM4細(xì)胞增殖標(biāo)志物Ki67的表達(dá)較對(duì)照組減弱,見圖3和圖4。

      圖3 輻照后第3 d TM4細(xì)胞Ki67免疫熒光染色結(jié)果 (×200)Fig.3 Ki67 immunofluorescence staining results at 3 d after TM4 cell radiation (×200)

      圖4 輻照后第3 天TM4細(xì)胞Ki67熒光強(qiáng)度結(jié)果Fig.4 Ki67 fluorescence intensity results at 3 d after TM4 cell radiation

      2.4 GSM-Talk信號(hào)連續(xù)輻照5d后TM4細(xì)胞上清中細(xì)胞因子水平變化

      TM4細(xì)胞輻照后2?5 d,細(xì)胞上清中SCF濃度明顯低于假輻照組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05),輻照后第1 d和第3 d,輻照組細(xì)胞上清中GDNF的濃度明顯高于假輻照組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05),見圖5和圖6, 提示該條件下的射頻輻射可影響TM4細(xì)胞的分泌功能。

      圖5 輻照后不同時(shí)間TM4細(xì)胞上清中SCF濃度變化Fig.5 The concentration of SCF in TM4 cell supernatant at different time points after radiation

      圖6 輻照后不同時(shí)間TM4細(xì)胞上清中GDNF濃度變化Fig.6 The concentration of GDNF in TM4 cell supernatant at different time points after radiation

      3 討論

      睪丸支持細(xì)胞是生精上皮的支持結(jié)構(gòu),貫穿生精上皮的全層。研究表明,支持細(xì)胞在精子發(fā)生中發(fā)揮著重要作用。據(jù)報(bào)道,一定參數(shù)的射頻電磁輻射能夠影響睪丸支持細(xì)胞的增殖和細(xì)胞結(jié)構(gòu)等。高曉芳等[12]將體外培養(yǎng)的睪丸支持細(xì)胞暴露于功率密度分別為0、30和100 mW·cm?2的微波輻射中各5 min,結(jié)果顯示,輻照后支持細(xì)胞生長(zhǎng)出現(xiàn)抑制,表現(xiàn)為G0-G1期細(xì)胞數(shù)量增加,G2-M和S期細(xì)胞數(shù)量減少,凋亡和死亡細(xì)胞增加,細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增加。作者認(rèn)為細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的增加是微波誘導(dǎo)支持細(xì)胞損傷的機(jī)制之一。吳惠等[13]為探討不同波段電磁輻射對(duì)大鼠睪丸支持細(xì)胞損傷效應(yīng)的異同,將原代培養(yǎng)的Sertoli細(xì)胞經(jīng)場(chǎng)強(qiáng) 6×104V·m?1的電磁脈沖(Electromagnetic pulse, EMP),平均功率密度為100 mW·cm?2的S-波段高功率微波(S-band high power microwave, S-HPM)和X-波段高功率微波輻射( X-band high power microwave, X-HPM),結(jié)果顯示,3種波段電磁輻射后,Sertoli細(xì)胞的晚期凋亡和壞死率增加;細(xì)胞代謝活性降低,且超寬譜波段的EMP致Sertoli細(xì)胞的損傷最明顯。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,1950 MHz GSM-Talk信號(hào)連續(xù)輻照TM4細(xì)胞5 d后, TM4細(xì)胞增殖受到明顯抑制,CCK-8、BrdU和Ki67免疫熒光檢測(cè)結(jié)果均證實(shí)了這一現(xiàn)象,該結(jié)果與高曉芳等的報(bào)道結(jié)果一致。此外,還有學(xué)者研究了射頻輻射對(duì)睪丸組織超微結(jié)構(gòu)的影響。Serkan ?elik等[14]將雄性Wistar-Kyoto大鼠暴露于SAR為1.58 W·kg?1的手機(jī)輻射中3個(gè)月后,透射顯微鏡下觀察睪丸的超微結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)輻照組睪丸支持細(xì)胞胞漿有空泡和高電子密度結(jié)構(gòu)形成以及大量脂滴存在,提示手機(jī)輻射可能引起支持細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變。吳惠等[13]研究表明三種不同波段的電磁輻射可致原代培養(yǎng)的大鼠睪丸支持細(xì)胞胞漿顆粒增多且空泡變性;超微結(jié)構(gòu)主要為線粒體腫脹、空化,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張。本科室前期研究表明[15]2450 MHz微波局部照射BALB/c小鼠睪丸后,各級(jí)生精細(xì)胞出現(xiàn)以濁腫為主的病理學(xué)改變,支持細(xì)胞病變的特異表現(xiàn)為萎縮變性,出現(xiàn)細(xì)胞體積明顯縮小,如突起回縮,由直立位變?yōu)闄M臥位,或成為緊靠基膜的薄層部分,染色加深。

      研究表明,射頻輻射除對(duì)睪丸支持細(xì)胞的增殖和細(xì)胞結(jié)構(gòu)造成影響外,還可導(dǎo)致細(xì)胞(包括睪丸支持細(xì)胞)分泌功能的改變[16-18]。支持細(xì)胞是唯一與生精細(xì)胞接觸的體細(xì)胞,在精子發(fā)生過程中,支持細(xì)胞可分泌多種細(xì)胞因子,調(diào)節(jié)精原干細(xì)胞自我更新和分化,精母細(xì)胞減數(shù)分裂以及圓形精子細(xì)胞轉(zhuǎn)化為精子[19]。其中研究較多的細(xì)胞因子是SCF和GDNF。SCF又稱c-kit配體,肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(MGF)。研究表明,SCF能夠促進(jìn)小鼠精原細(xì)胞分化為圓形精子細(xì)胞[20],而且可誘導(dǎo)小鼠A1-A4型精原細(xì)胞的增殖和分化[21]。GDNF是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β超家族的一個(gè)相關(guān)成員。它的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)受體復(fù)合物包括酪氨酸激酶 Ret 受體和 GDNF 家族受體α1。據(jù)報(bào)道,GDNF可促進(jìn)未分化型精原細(xì)胞(包括精原干細(xì)胞)的增殖[22-23]。本實(shí)驗(yàn),我們對(duì)射頻輻照后支持細(xì)胞上清中的SCF和GDNF水平進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果顯示,1950 MHz GSM-Talk信號(hào)連續(xù)輻照5 d后的第2 d到第5 d,細(xì)胞上清中SCF濃度明顯降低,輻照后第1 d和第3 d,細(xì)胞上清中GDNF濃度顯著增加。除探討電磁輻射引起Sertoli細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu),增殖和分泌功能改變外,電磁輻射致Sertoli細(xì)胞的損傷會(huì)對(duì)精子發(fā)生產(chǎn)生何種影響呢?研究表明[24],Sertoli細(xì)胞經(jīng)γ射線照射后,細(xì)胞因子IL6的表達(dá)增強(qiáng)。Wu等[16]將睪丸支持細(xì)胞進(jìn)行微波輻照后,發(fā)現(xiàn)其分泌因子:腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)增加,這些上調(diào)的分泌因子能夠誘導(dǎo)生殖細(xì)胞的凋亡和生殖細(xì)胞膜的脂質(zhì)過氧化。作者推測(cè),射頻輻照后SCF和GDNF這兩種細(xì)胞因子水平的改變也將對(duì)精子的正常發(fā)生產(chǎn)生影響。

      截止目前,關(guān)于射頻輻射對(duì)睪丸支持細(xì)胞分泌因子GDNF、SCF表達(dá)的影響研究尚未見報(bào)道,僅檢索到一些關(guān)于電離輻射對(duì)睪丸支持細(xì)胞分泌功能影響的研究文獻(xiàn)。Mauduit等[25]報(bào)道,成年雄性小鼠接受X線(4 Gy)照射72 h后,支持細(xì)胞中SCF的表達(dá)未見明顯改變。Albuquerque等[26]將成年雄性小鼠用6 Gy γ60Co射線照射,發(fā)現(xiàn)輻照后支持細(xì)胞數(shù)量、結(jié)構(gòu)及分泌SCF和GDNF的能力沒有改變。提示,不同性質(zhì)的物理因子對(duì)睪丸支持細(xì)胞分泌功能的影響也存在差異。其主要原因可能與各研究機(jī)構(gòu)之間使用的射頻輻射源的種類,實(shí)驗(yàn)條件及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的不同有關(guān)。

      本研究首次報(bào)道了1950 MHz GSM-Talk信號(hào)對(duì)睪丸支持細(xì)胞增殖及分泌功能的影響,結(jié)果提示,1950 MHz GSM-Talk信號(hào)連續(xù)輻照5 d可抑制TM4細(xì)胞的增殖并影響其分泌功能。睪丸支持細(xì)胞對(duì)精子正常發(fā)生起著至關(guān)重要的作用,射頻輻射致睪丸支持細(xì)胞的效應(yīng)可能影響精子的正常發(fā)生,最終導(dǎo)致生殖功能異常。本研究為正確評(píng)估手機(jī)射頻輻射對(duì)生殖健康的影響及衛(wèi)生防護(hù)提供了理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。關(guān)于射頻輻射影響支持細(xì)胞增殖及分泌功能的分子機(jī)制,有待進(jìn)一步研究。

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