膠體金法與ELISA法在檢測(cè)丙型肝炎病毒抗體中的比較

涂業(yè)桃

(瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院輸血科，四川 瀘州 646000)

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)是以肝臟病變?yōu)橹鞯膫魅拘约膊?，目前我?guó)約有1000萬(wàn)例HCV感染者，根據(jù)中國(guó)疾病預(yù)防控制中心公布的2012年法定傳染病報(bào)告的統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，2012年HCV的報(bào)告人數(shù)占病毒性肝炎報(bào)告總?cè)藬?shù)的14.6%，并且近年來(lái)HCV發(fā)病率仍然呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)[1]。同時(shí)HCV感染后慢性化傾向嚴(yán)重，慢性HCV感染更易轉(zhuǎn)化為肝硬化甚至肝癌。因此，早期發(fā)現(xiàn)HCV感染，對(duì)于HCV早期診斷和臨床治療的意義重大。運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法檢測(cè)HCV抗體具有較高的靈敏度和特異度，并且穩(wěn)定性也較高，是目前各醫(yī)療機(jī)構(gòu)廣泛應(yīng)用的一種HCV抗體檢測(cè)方法。膠體金法是一種新的快速檢測(cè)技術(shù)，近年來(lái)已被廣泛應(yīng)用于免疫檢測(cè)的各領(lǐng)域，因此本研究主要比較膠體金法與ELISA法在HCV抗體檢測(cè)中的差異?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2012年3月至2013年3月瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院收治的HCV患者860例，男500例(58.12%)、女360例(41.88%)，年齡18～65(42.5±2.5)歲。

1.2試劑與儀器 膠體金法試劑由英科新創(chuàng)科技有限公司生產(chǎn)，試劑在規(guī)定的使用有效期內(nèi)。采用ELX808型號(hào)的酶標(biāo)儀，洗板機(jī)為ELX50，所使用的試劑是由北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，試劑包裝完好，在規(guī)定的有效使用期內(nèi)。

1.3檢測(cè)方法 抽取患者晨起空腹血4 mL，標(biāo)記好姓名和編號(hào)及相關(guān)信息后送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行離心分離，以離心半徑15 cm，3000 r/min離心10 min。將分析出的血清分為兩份，一份血清用膠體金法進(jìn)行HCV抗體檢測(cè)，另一份用ELISA法進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)時(shí)嚴(yán)格按照試劑的使用說(shuō)明進(jìn)行，膠體金法進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，在測(cè)試區(qū)內(nèi)出現(xiàn)一條紫紅色的條帶，判斷為HCV抗體陽(yáng)性，否則判為陰性。ELISA法檢測(cè)結(jié)果，當(dāng)樣本的A值≥Cut-off，此時(shí)判為HCV抗體檢測(cè)陽(yáng)性，當(dāng)A值

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SAS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

860例血清樣本中，膠體金法的HCV抗體陽(yáng)性檢出率為3.60%，ELISA法檢測(cè)HCV抗體陽(yáng)性率為3.72%，兩種方法陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.33，P>0.05)。兩種方法的符合率為99.65%(Kappa=0.95)。以ELISA法作為檢測(cè)HCV抗體陽(yáng)性的金標(biāo)準(zhǔn)，膠體金法對(duì)于HCV抗體檢測(cè)的靈敏度為93.75%，特異度為99.88%(表1)。

表1 膠體金法和ELISA法檢測(cè)HCV抗體的結(jié)果

3 討 論

HCV主要是通過(guò)血液傳播和性接觸傳播，其中獻(xiàn)血人員作為傳染源的意義十分重大，目前對(duì)于HCV并沒(méi)有有效的疫苗可以預(yù)防，因此實(shí)現(xiàn)HCV快速有效的檢測(cè)，對(duì)于HCV的預(yù)防控制具有重要意義。目前對(duì)于HCV病毒檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)是HCV病毒核酸檢測(cè)，但是由于設(shè)備和技術(shù)原因，核酸檢測(cè)目前并未在各級(jí)醫(yī)院實(shí)現(xiàn)，因此主要是通過(guò)HCV抗體檢測(cè)來(lái)證明HCV病毒感染，目前應(yīng)用最廣泛，并且被一致認(rèn)為比較可靠的是ELISA法進(jìn)行HCV抗體的檢測(cè)。膠體金法作為一種新的快速檢測(cè)技術(shù)，近年來(lái)已被廣泛應(yīng)用于免疫檢測(cè)的各領(lǐng)域，關(guān)于膠體金法用于HCV抗體檢測(cè)與ELISA法的比較，目前國(guó)內(nèi)的研究并不完全一致。

王紅[2]的研究認(rèn)為，膠體金法檢測(cè)HCV抗體陽(yáng)性率略低于ELISA法。本研究結(jié)果顯示，膠體金法與ELISA法相比較，兩種方法HCV抗體陽(yáng)性檢出率比較并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并且這兩種HCV抗體檢測(cè)方法對(duì)于HCV抗體陽(yáng)性檢測(cè)具有較高的一致性，符合率達(dá)99.65%。這與徐德全[3]和王華玲[4]的研究結(jié)果一致。與楊榮昌[5]的研究相比，本研究假設(shè)以ELISA法作為檢測(cè)HCV抗體的金標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算膠體金法作為HCV抗體檢測(cè)的靈敏度高，特異度略低于楊榮昌[5]的研究結(jié)果。其原因可能是本研究的樣本量大，且HCV抗體陽(yáng)性所占的比例接近人群HCV的感染率。因此，本研究結(jié)果用于評(píng)價(jià)人群中HCV抗體的檢測(cè)方法具有更好的可靠性。

ELISA法容易受到加樣、洗滌以及儀器設(shè)備等因素而影響檢測(cè)結(jié)果。與ELISA法相比，膠體金法檢測(cè)具有快速、簡(jiǎn)便、樣本用量少，且不依賴于儀器設(shè)備等特點(diǎn)，并且膠體金法檢測(cè)試劑均為單人份獨(dú)立包裝，非常適合于檢測(cè)樣本量少的基層醫(yī)院。只要在檢測(cè)過(guò)程中檢測(cè)人員嚴(yán)格按照操作規(guī)范進(jìn)行，試劑的使用在規(guī)定的有效期內(nèi)，膠體金法對(duì)于HCV抗體檢測(cè)是一項(xiàng)快速簡(jiǎn)單可靠地手段。王榮香等[6]的研究認(rèn)為，膠體金法可以用于醫(yī)院門(mén)診患者進(jìn)行創(chuàng)傷性操作前HCV檢測(cè)，可以大大減少醫(yī)源性經(jīng)血液傳播HCV。

總之，膠體金法進(jìn)行HCV抗體檢測(cè)值得在臨床進(jìn)一步的推廣應(yīng)用，以利于HCV的預(yù)防，并且為臨床診斷和治療提供可靠依據(jù)。

[1] 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心.2012年度全國(guó)法定傳染病報(bào)告發(fā)病、死亡統(tǒng)計(jì)表[EB/OL].http://www.chinacdc.cn/tjsj/fdcrbbg/201303/t20130327_79057.htm

[2] 王紅.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)丙型肝炎病毒抗體在酶標(biāo)儀應(yīng)用中的探索[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,9(10):1234-1235.

[3] 徐德全.酶聯(lián)免疫和膠體金法對(duì)丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)的對(duì)比分析[J].航空航天醫(yī)學(xué)雜志,2012,23(5):556-557.

[4] 王華玲.膠體金法與ELISA法檢測(cè)丙肝病毒抗體結(jié)果比較[J].醫(yī)學(xué)信息,2011,24(10):6594-6595.

[5] 楊榮昌.丙型肝炎病毒抗體兩種檢測(cè)方法的比較[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2010,7(3):263-264.

[6] 王榮香,祝建軍,王祖芳.膠體金法快速檢測(cè)血HBV、HIV、HCV、TP在門(mén)診患者創(chuàng)傷性操作前檢測(cè)的意義[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2010,20(6):1419-1420.