一例鴨坦布蘇病毒病的綜合診斷及防控

劉 昆 （山東省昌樂縣畜牧獸醫(yī)局 262400）

一例鴨坦布蘇病毒病的綜合診斷及防控

劉 昆 （山東省昌樂縣畜牧獸醫(yī)局 262400）

鴨坦布蘇病毒隸屬于黃病毒科黃病毒屬恩塔亞病毒群的坦布蘇病毒。在分離早期，由于對本病了解有限，常稱為―黃病毒病”。鴨坦布蘇病毒病自2010年在我國南方暴發(fā)以來，迅速蔓延至福建、浙江、江蘇、江西、廣東、廣西、安徽、山東、河南、河北、北京等地區(qū)，給我國養(yǎng)鴨業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。該病對各種鴨特別易感，且在傳播流行中病毒發(fā)生分子變異，現(xiàn)已可從雞、鵝體內(nèi)分離到該病毒，并且證實(shí)其可對雞、鵝致病。

2013年6月，本單位實(shí)驗(yàn)室收到臨沂某鴨場送檢測一些病鴨。該種鴨場飼養(yǎng)種鴨5000套，250日齡。主訴該鴨群產(chǎn)蛋下降，產(chǎn)蛋蛋殼無光澤且蛋重減少，但鴨群死亡較少。筆者對其進(jìn)行了綜合診斷。

1 方法

1.1 臨床及剖檢觀察 對送檢的發(fā)病種鴨先進(jìn)行詳細(xì)的體表、精神觀察，剖檢觀察內(nèi)臟器官的病理變化。

1.2 病理組織學(xué)檢查 取病種鴨各組織器官，修成小塊，浸泡于10%的福爾馬林中固定，48h后脫水，透明，包埋后制作石蠟切片，并進(jìn)行HE染色，鏡檢。

1.3 病毒分離及分子生物學(xué)檢測 對來自山東某發(fā)病鴨場的病料進(jìn)行研磨，加入PBS勻漿，-70℃反復(fù)凍融3次，8000g/min離心5min，吸取上清液，用0.22μm一次性濾器過濾除菌后將濾液裝于凍存管中備用。將凍存管中備用濾液以0.1ml/胚，平行接種于3枚9～11日齡鴨胚，37℃進(jìn)行孵育，每隔8h進(jìn)行觀察，棄掉24h以內(nèi)死亡胚，72h后將接種鴨胚放入4℃，1h后無菌收獲尿囊液。將收取的尿囊液進(jìn)行病毒總RNA提取，通過RT-PCR方法檢測。使用鴨黃病毒特異性引物DFLA-F：AGACTGCTGGTGCAAT GAGAC和DFLA-R: CGTCGTTCCCAGATTCCA檢測。

2 結(jié)果

2.1 臨床觀察 多只患病鴨表現(xiàn)出腳麻痹、頭頸歪斜等運(yùn)動機(jī)能失調(diào)的神經(jīng)癥狀，排便質(zhì)地稀松呈草綠色，鴨群整體產(chǎn)蛋量急劇下降，所產(chǎn)蛋蛋殼薄且無光澤、蛋的重量減小。

2.2 剖檢變化 剖檢可見心臟官有出血點(diǎn)，有神經(jīng)癥狀的鴨腦充血、出血，卵巢可見明顯的充血出血，有的甚至出現(xiàn)卵泡破裂，部分鴨出現(xiàn)卵巢萎縮；輸卵管有滲出，并輕度萎縮。

2.3 病理組織學(xué)檢測 發(fā)現(xiàn)卵泡膜充血、出血，卵泡內(nèi)充滿大量的紅細(xì)胞，同時有巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤；肝臟見淋巴細(xì)胞浸潤，間質(zhì)充滿嗜酸性粒細(xì)胞；脾臟內(nèi)白髓體積減小，淋巴細(xì)胞數(shù)量減少；心肌出血，心肌纖維壞死，心肌內(nèi)散在大量的炎性細(xì)胞；表現(xiàn)神經(jīng)癥狀的病鴨腦膜充血水腫，大腦皮質(zhì)部局部壞死，小腦軟化壞死，且均伴有神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增生。

2.4 病毒分離與分子生物學(xué)檢測 結(jié)果發(fā)現(xiàn)72h無菌收獲SPF鴨胚尿囊液。觀察可見胚體有頸部、背部、頭部有明顯出血點(diǎn)，切接種后的鴨胚普遍發(fā)育遲緩，較正常鴨胚體積小。經(jīng)RT-PCR特異性檢測為陽性。片段大小為1500bp。

3 分析

通過綜合診斷，證明該鴨場感染坦布蘇病毒。坦布蘇病毒可自然感染多種品種的蛋鴨、肉種鴨和野鴨等。目前本病的傳播途徑仍然不完全清楚，在自然條件下，黃病毒屬的成員主要經(jīng)節(jié)肢動物傳播，其中恩塔亞病毒群的病毒均是蟲媒傳播。坦布蘇病毒在秋季大面積流行，推測可能與蚊蟲有關(guān)，但是進(jìn)入冬季之后本病仍有發(fā)生，說明其流行與傳播并不完全依賴吸血昆蟲。臨床上，從鴨場內(nèi)死亡麻雀體內(nèi)檢出坦布蘇病毒，提示鳥類在病毒的越冬機(jī)制和傳播過程中有重要作用。同時，從泄殖腔可分離到病毒，表明該病毒可通過糞便排毒，污染環(huán)境、飼料、飲水、器具等造成疾病的水平傳播。其傳播途徑廣泛，對鴨坦布蘇病毒病的防控帶來困難。

4 防控

病毒之所以可以傳播必須具備病原、傳播途徑、易感動物三個重要環(huán)節(jié)?，F(xiàn)已有報道鴨坦布蘇病毒油乳劑滅活疫苗可對鴨坦布蘇病毒產(chǎn)生良好的免疫保護(hù)力，該疫苗尚未投入生產(chǎn)，但這也為今后疫苗防控打下基礎(chǔ)?，F(xiàn)階段治療鴨坦布蘇病毒最主要的方法就是對癥治療，使用板藍(lán)根、金銀花等清熱解毒的中草藥配以頭孢抗菌素、舒巴坦鈉等抗菌消炎藥共同施治，可一定程度控制病情。最主要的防控鴨坦布蘇病毒病的方式就是加強(qiáng)飼養(yǎng)管理人員對該病毒的認(rèn)識做到提前預(yù)防，飼養(yǎng)環(huán)境、飼養(yǎng)器具、運(yùn)輸車輛都要嚴(yán)格消毒，杜絕發(fā)病鴨場與健康鴨場間不必要的接觸，病鴨場的動物尸體一定要生物無害化處理，病鴨接觸過的地方一定要全面消毒，消除其作為傳染源的可能性。要盡量減少該病爆發(fā)對養(yǎng)殖業(yè)造成的損失，就要以防為主以治為輔，防治結(jié)合，再加以科研輔佐，做到對該病的深了解慎防控。

S858.32

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1007-1733(2014)06-0048-01

2014–03–31）