犍為姜黃不同采收期姜黃素類成分差異探析

宋玉丹，王書林，余 弦

(成都中藥大學(xué) 峨眉學(xué)院，四川 峨眉山 614201)

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犍為姜黃不同采收期姜黃素類成分差異探析

宋玉丹，王書林*，余 弦

(成都中藥大學(xué) 峨眉學(xué)院，四川 峨眉山 614201)

目的：通過實(shí)驗(yàn)的方法確定犍為姜黃的最佳采收期。方法：采用HPLC法，使用流動(dòng)相為乙腈-0.3%磷酸水溶液(40∶60)測定不同采收期犍為姜黃中姜黃素類成分(姜黃素、去甲氧基姜黃素、雙去甲氧基姜黃素)的含量。結(jié)果與結(jié)論：12月份所采的姜黃中所含姜黃素類成分最高，確定12月份為姜黃的最佳采收期。

犍為姜黃； HPLC；姜黃素類成分；采收期；含量

姜黃是一味廣泛應(yīng)用的中藥， 2010年版中國藥典收載，姜黃為姜科植物姜黃(CurcumalongaL.)的地下根莖部分[1]，又名黃姜、寶鼎香等。姜黃味辛、苦，性溫，據(jù)本草上記載，姜黃能行氣破瘀、通經(jīng)止痛，主治胸腹脹痛、肩臂痹痛、月經(jīng)不調(diào)、閉經(jīng)、跌打損傷等。近年來研究表明，姜黃能夠逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的耐藥性，有效增強(qiáng)放射線對腫瘤的作用，所以其對肝癌、肺癌、結(jié)腸癌、宮頸癌、卵巢癌、乳腺癌有一定的抑制作用，而主要起作用的是姜黃中姜黃素類成分。姜黃素類是以醇溶性二苯基庚烴類化合物姜黃素、去甲氧基姜黃素和雙去甲氧基姜黃素等三種組分為主的混合物，而姜黃素類成分的含量也是評價(jià)姜黃質(zhì)量的重要指標(biāo)。四川犍為是姜黃的道地產(chǎn)區(qū)，有幾百年的種植歷史，當(dāng)?shù)氐乃庌r(nóng)只是根據(jù)自己的經(jīng)驗(yàn)，在姜黃地上部分枯萎后將其采收，本研究通過HPLC方法確定姜黃的最佳采收期，以確保其質(zhì)量。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑與儀器

姜黃素對照品(純度≥99%)：去甲氧基姜黃素對照品(純度≥99%)：雙去甲氧姜黃素對照品，購于成都貝斯特試劑有限公司。水為UP級純水，乙腈為色譜純；姜黃藥材采集于犍為縣新民鎮(zhèn)，經(jīng)四川省食品藥品學(xué)校王書林教授鑒定為姜科植物姜黃。

Waters2695高效液相色譜儀，Waters2996紫外檢測器(天津市瑞譜電子儀器公司)，超聲波清洗儀，高速中藥粉碎機(jī)(HX-500A，浙江省永康市溪岸五金藥具廠)，數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱(GZX-9140MBE，上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 色譜條件 Aglilent Bxtend C18(5μm,4.6mm×150mm)色譜柱；柱溫：25℃；流速：0.8mLmin；進(jìn)樣量：10μL；流動(dòng)相：乙腈-0.3%磷酸水溶液(40∶60)；檢測波長：254nm，在此條件下姜黃素類成分能夠很好地分開。

1.2.2 對照品溶液制備 取姜黃素、去甲氧基姜黃素、雙去甲氧基姜黃素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含10μL的溶液，即得。

1.2.3 供試品溶液制備 將5個(gè)不同采收期所采集的姜黃藥材于60℃烘箱中干燥，粉碎，過5號篩，精密稱定過篩后的細(xì)粉約0.2g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10mL，稱定重量，超聲30min(20℃，70Hz)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，離心，精密量取上清液1mL，置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

1.2.4 線性關(guān)系考察 將姜黃素、去甲氧基姜黃素、雙去甲氧基姜黃素對照品分別用甲醇稀釋成0.01、0.02、0.04、0.06、0.08(mgmL)，按上述色譜條件，進(jìn)樣10μL，測定其峰面積。以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行回歸處理，得其三種對照品的回歸方程分別為Y=1 585.7X-428.6，R2=0.999 1；Y=2 018.4X-257.3，R2=0.999 3；Y=1 320.3X-568.1，R2=0.999 8，結(jié)果表明，姜黃素、去甲氧基姜黃素、雙去甲氧基姜黃素在10～80μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

1.2.5 穩(wěn)定性考察 取姜黃素類化合物對照品溶液，按上述色譜條件，分別在0、2、4、6、8、10h，進(jìn)樣10μL，測得其峰面積，三種對照品溶液測得的RSD分別為1.12%、1.05%、0.98%(n=5)，結(jié)果表明，三種物質(zhì)在10h內(nèi)穩(wěn)定。

1.2.6 精密度考察 精密吸取姜黃素類化合物對照品溶液，按上述色譜條件，重復(fù)進(jìn)樣5次，進(jìn)樣量為10μL，測定其峰面積積分值，RSD分別為0.98%、1.04%、1.12%，表明精密度良好。

1.2.7 重現(xiàn)性考察 取同一批姜黃樣品，按“1.2.2”的方法制備供試品溶液5份，按上述色譜條件測定，觀察各色譜峰保留時(shí)間的一致性，姜黃素、去甲氧基姜黃素、雙去甲氧基姜黃素各色譜峰保留時(shí)間的RSD均小于2%，說明提取方法和檢測方法重現(xiàn)性良好。

1.2.8 不同采收期含量測定 將不同采收期所制得的供試品溶液按上述色譜條件進(jìn)樣，所得色譜如圖1-圖4所示，按外標(biāo)一點(diǎn)法由各峰面積計(jì)算得出不同采收期樣品中姜黃素類成分的含量。見表1、圖5。

圖1 姜黃素對照品色譜

圖2 去甲氧基姜黃素對照品色譜

圖3 雙去甲氧基姜黃素對照品色譜

圖4 姜黃樣品色譜(1：雙去甲氧基姜黃

樣品編號姜黃素含量(mg/g)去甲氧基姜黃含量(mg/g)雙去甲氧基姜黃素量(mg/g)總含量(mg/g)采集時(shí)間13.771.410.926.112013.10.2224.331.821.267.442013.11.1534.612.221.398.192013.12.2540.770.760.382.892014.01.0451.610.560.422.592014.02.11

圖5 姜黃素類成分總含量變化趨勢

由圖5可知姜黃素類成分在12月下旬達(dá)最大值，所以姜黃的最佳采收期為12月下旬。

2 討論

根據(jù)實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)，姜黃最佳采收期為12月下旬，而當(dāng)?shù)厮庌r(nóng)的采收時(shí)間一般為冬至過后，這與實(shí)驗(yàn)所得最佳采收期12月下旬時(shí)間無較大差異，而次年采收的姜黃質(zhì)量并沒有當(dāng)年12月下旬采收的質(zhì)量好。此實(shí)驗(yàn)讓藥農(nóng)更清楚采收的期限，保證姜黃的質(zhì)量。

[1] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典[M].一部.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010.

(責(zé)任編輯：魏 曉)

Difference Analysis of Curcumin Content of Jianwei Turmeric at Different Harvest Time

Song Yudan,Wang Shulin,Yu Xian

(Sichan Food and Durg School,E’meishan 614201,China)

Objective:determining the optimal harvest time of jianwei Curcuma.Methods:Using HPLC to determine the content of Ingredients like curcumin (curcumin, Demethoxycurcumin, Bisdemethoxycurcumin) of the different harvest time of jianwei Curcuma, determining the optimal harvest time of jianwei Curcuma.Results and Conclusion:The highest curcumin turmeric ingredients contained therein adopted in December, determining that the December is the best harvest time ofCurcumalongaL.

Jianwei Curcuma；HPLC；Ingredients Like Curcumin；Harvest Time；Content

2014-05-04

樂山市2013年重點(diǎn)科技計(jì)劃項(xiàng)目(13SZD141)

宋玉丹(1989-)，女，成都中藥大學(xué)峨眉學(xué)院碩士研究生，研究方向?yàn)橹兴幤贩N、質(zhì)量與資源開發(fā)。

王書林(1951-)，男，成都中藥大學(xué)峨眉學(xué)院教授、博士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)橹兴幤贩N、質(zhì)量與資源開發(fā)。E-mailwslgap@163.com。

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A

1673-2197(2014)18-0006-02