高宏偉

摘 要：文章對硫酸氯吡格雷片溶出度測定方法進(jìn)行驗證，硫酸氯吡格雷片溶出度測定方法參照2010版中國藥典二部附錄XC第二法溶出測定法分別以pH2.0鹽酸緩沖液、pH1.0鹽酸溶液、pH4.5磷酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液和水為溶出介質(zhì)測定2種硫酸氫氯吡格雷片的體外溶出曲線，同時采用f2相似因子法考察兩者的相似性，以評價自制硫酸氫氯吡格雷片的質(zhì)量。

關(guān)鍵詞：硫酸氫氯吡格雷片；溶出曲線；f2相似因子

硫酸氫氯吡格雷是新一代血小板聚集抑制劑，其選擇性地抑制二磷酸腺苷（ADP）與其血小板受體的結(jié)合及繼發(fā)的ADP介導(dǎo)的糖蛋白GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物的活化，從而抑制血小板的聚集[1]。市售進(jìn)口硫酸氫氯吡格雷片（Plavix），由法國賽諾菲公司于1986年研制成功，原料藥為Ⅱ晶型?？紤]到專利保護及原料藥熱力學(xué)穩(wěn)定性和溶解度的關(guān)系，文章選用Ⅰ晶型硫酸氫氯吡格雷為原料藥，以市售片Plavix為參比制劑，制備出與Plavix有相同釋藥速率和穩(wěn)定性的硫酸氫氯吡格雷片。

1 材料

ZRS-8G型智能溶出儀（天津大學(xué)無線電廠）；ZRS-8G智能溶出儀；PHS-3C酸度計（上海雷磁儀器廠）；Adventurer電子分析天平AR1140（上海奧豪斯國際貿(mào)易有限公司）；硫酸氫氯吡格雷片（規(guī)格：75mg以氯吡格雷計）自制；波立維（規(guī)格：75mg以氯吡格雷計），硫酸氫氯吡格雷對照品（中國藥品生物制品檢定所），試劑均為分析純。

2 方法

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別精密移取1.0mg/ml的儲備液1.25ml、2.5ml、5.0ml、10.0ml、20.0ml置于200ml容量瓶中，溶出介質(zhì)定容，得到濃度分別是7.25μg/ml、12.5μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別測定吸光度。以硫酸氫氯吡格雷濃度C為橫坐標(biāo)，以吸光度A為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，回歸方程為：A=0.0192C-0.0314R=0.9998。結(jié)果表明硫酸氫氯吡格雷在7.25～100μg/ml濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.2 精密度

精密稱取硫酸氫氯吡格雷適量，甲醇溶解后，pH2.0鹽酸緩沖液稀釋成氯吡格雷濃度約為25μg/ml對照溶液。連續(xù)進(jìn)樣6次，測定吸光度，計算RSD，結(jié)果表明，RSD為0.89%，符合方法學(xué)要求，系統(tǒng)精密度良好。

2.3 方法回收率

分別精密量取硫酸氫氯吡格雷對照品儲備液（氯吡格雷濃度約為1mg/ml）2.0ml、2.5ml、3.0ml于100ml量瓶中，加入空白輔料，溶出介質(zhì)，搖勻后過濾，作為供試品溶液；精密量取硫酸氫氯吡格雷對照品儲備液（氯吡格雷濃度約為1mg/ml）2.5ml至100ml量瓶中，用溶出介質(zhì)稀釋至刻度，得每1ml中約含氯吡格雷25？滋g的溶液，作為對照品溶液；取上述溶液按照分光光度法測定，計算平均回收率。結(jié)果表明，平均回收率為99.81，RSD%為1.90。該方法回收率較高，能夠準(zhǔn)確測定溶出度的樣品濃度。

2.4 方法穩(wěn)定性

將氯吡格雷濃度為25μg/ml的溶液對照品分別在0、2、4、6、8、10、12h時取樣測定吸光度A，結(jié)果表明在室溫條件下，供試品溶液12h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.5 溶出度測定方法

參照2010版中國藥典二部附錄XC第二法溶出測定法中有關(guān)硫酸氫氯吡格雷溶出的測定方法，采用槳法裝置，以1000mlpH2.0鹽酸緩沖溶液作為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50rpm，分別在5、10、20、30、45、60min取出溶出杯中的溶液各10ml（同時補加等量新鮮同溫的溶出介質(zhì)），過濾，測定吸光度；另取硫酸氫氯吡格雷原料藥適量，加入甲醇20ml溶解，加入pH2.0鹽酸緩沖溶液配置成濃度為25μg/ml的對照溶液，同法測定，采用外標(biāo)法計算不同時間點的累積釋放度[2]。

2.6 釋放度數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析

文章采用FDA推薦的相似因子法評價溶出度[3]，以確定仿制品與對照藥品的溶出差異性。其公式如下[4]：

f2=50lg{[1+（1/n）Σ（Rt-Tt）2]-0.5×100}

其中Rt和Tt分別為參比制劑和實驗制劑在t時間的累計釋放百分率，n是取樣點數(shù)。相似因子f2值趨近于100，說明曲線的相似性越好。一般f2值大于50，就可以判斷參比制劑和自制制劑釋放行為相似。

3 市售與自制在不同pH溶出介質(zhì)下的溶出曲線對比圖

為進(jìn)一步考察自制片體外溶出與市售片Plavix的差異性，文章采用“2.8”溶出度測定方法項下內(nèi)容，分別考察了市售Plavix與自制樣品在pH1.0鹽酸溶液、pH2.0鹽酸緩沖液、pH4.5醋酸緩沖液、pH6.8磷酸緩沖液和蒸餾水的體外釋放情況，分別測定自制片與市售片Plavix的溶出曲線。

結(jié)果表明，自制硫酸氫氯吡格雷片與市售片在pH1.0鹽酸溶液、pH2.0鹽酸緩沖液、pH4.5醋酸緩沖液、pH6.8磷酸緩沖液和蒸餾水中相似因子分別為63，69，81，77，64。

4 結(jié)束語

結(jié)果表明，在pH1.0與pH2.0鹽酸緩沖液下釋放度相似因子均大于50；由于硫酸氫氯吡格雷在堿性條件下的溶解度差，因此市售片和自制片在pH4.5、pH6.8和水中并不能完全溶出。通過在pH1.0和pH2.0鹽酸緩沖液中的自制片與市售片釋放行為比較可以看出，自制片與市售片體外釋放基本相同。

參考文獻(xiàn)

[1]朱海彥，孫杰，張曼紅.硫酸氫氯吡格雷的臨床應(yīng)用進(jìn)展[J].齊魯藥事，2010，29（11）：674-676.

[2]WS1-（X-475）-2003Z國家食品藥品監(jiān)督管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn).國家藥品標(biāo)準(zhǔn)新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)47冊.

[3]2011藥典征求意見稿.氯吡格雷片.

[4]夏錦輝，劉昌孝.固體藥物制劑的體外溶出度的統(tǒng)計學(xué)評價分析[J].中國藥學(xué)雜志，2000，35（2）：130-131.