冒衛(wèi)華 薛正俊 謝翠華 張秀紅 陳曉燕

（江蘇省如皋市中醫(yī)院，江蘇 如皋 226500）

通脈活血散治療兔急性下肢靜脈血栓的實(shí)驗(yàn)研究*

冒衛(wèi)華 薛正俊 謝翠華 張秀紅 陳曉燕

（江蘇省如皋市中醫(yī)院，江蘇 如皋 226500）

目的觀察通脈活血散治療兔急性下肢靜脈血栓的有效性及安全性。方法新西蘭大白兔48只建立急性下肢靜脈血栓模型后隨機(jī)分為尿激酶聯(lián)合肝素組（A組）、通脈活血散外敷組（B組），每組24只。各組在血栓形成3 d后給藥，分別在用藥后3、7、14 d檢測(cè)各組凝血指標(biāo)，評(píng)估其安全性，通過(guò)靜脈彩超評(píng)估其有效性。結(jié)果B組的凝血酶原時(shí)間（PT）延長(zhǎng)時(shí)間較A組短（P＜0.05），纖維蛋白原（FBG）較A組?。≒＜0.05），A組和B組的D-二聚體值（D-D）均逐漸降至正常，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。A組和B組的溶栓效果均較好，其差異性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論通脈活血散治療兔急性下肢靜脈血栓是有效的，具有較高的安全性。

疾病模型 動(dòng)物 靜脈血栓形成 通脈活血散 抗凝藥

深靜脈血栓形成與纖溶功能低下有密切聯(lián)系?？鼓?、溶栓是治療下肢深靜脈血栓形成重要的治療方法之一，但抗凝、溶栓藥物存在出血的副作用［1］。通脈活血散是本院長(zhǎng)期臨床應(yīng)用的有效方劑，具有清營(yíng)涼血、活血化瘀、溶栓通脈的作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)通脈活血散治療兔急性下肢靜脈血栓，對(duì)比尿激酶聯(lián)合肝素治療方案的實(shí)驗(yàn)研究，觀察脈活血散治療兔急性下肢靜脈血栓的有效性及安全性。

1 材料與方法

1.1 材料 健康新西蘭大白兔48只，6月齡，體質(zhì)量2500～3000 g，雌雄不拘，由南通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。通脈活血散1200 g（由徐長(zhǎng)卿、當(dāng)歸、丹參、雞血藤、葛根、延胡索、桃仁、川芎、姜黃、郁金、血竭、乳香、沒(méi)藥、五靈脂、木香、白檀香、蒲黃、王不留行、三七、穿山甲、樟腦、冰片、白芥子、降香各、麝香、細(xì)辛等組成，由本院制劑室提供）；肝素鈉（河北常山生化藥業(yè)股份有限公司，生產(chǎn)批號(hào)130211）；尿激酶（天津生物化學(xué)制藥公司，生產(chǎn)批號(hào)20130101）；血常規(guī)分析儀（日本，Sysmex公司，XE-2100型）；凝血分析儀（日本，Sysmex公司，CA-1500型）；彩超（美國(guó)，飛利浦公司，IU-22型）。

1.2 急性下肢靜脈血栓形成模型的制作 3％苯巴比妥鈉40 mg/kg靜脈麻醉，固定于兔臺(tái)上，左下肢及腹股溝區(qū)備皮，常規(guī)消毒，在腹股溝區(qū)以股動(dòng)脈為中心稍偏內(nèi)側(cè)作一長(zhǎng)約2 cm切口，于股動(dòng)脈內(nèi)側(cè)解剖并游離出股靜脈約3 cm，直視下置無(wú)損傷血管夾于其近端，在靜脈充盈狀態(tài)下，再與遠(yuǎn)端置無(wú)損傷血管夾，暫時(shí)阻斷股靜脈1.5 h，經(jīng)25 G細(xì)針穿刺無(wú)血液流出，證實(shí)該段靜脈內(nèi)血栓已形成，去除血管夾，并在近心端先前阻斷處，繞以1號(hào)醫(yī)用絲線(xiàn)，不完全結(jié)扎，縮窄血管腔約1/3，以防止血栓脫落。造模后不用抗凝藥物，自由飲水、進(jìn)食。血栓形成模型制作成功率為100％。

1.3 動(dòng)物分組 48只新西蘭大白兔，隨機(jī)分為尿激酶聯(lián)合肝素組（A組）和通脈活血散治療組（B組），每組24只。A、B組再分為用藥后3、7、14 d 3個(gè)時(shí)相亞組，每個(gè)亞組段8只兔。

1.4 藥物治療 成功建模后3 d，A組給予耳緣靜脈注入尿激酶10000 U/kg和皮下肝素鈉500 U/kg，用藥量參照人和動(dòng)物體表面積劑量換算法［2］。B組給予通脈活血散每只10 g，用蜂蜜調(diào)制后，外敷整只患肢，外用專(zhuān)制護(hù)套保護(hù)，每2日換藥1次。

1.5 觀察指標(biāo) 血栓形成3 d后開(kāi)始用藥，為了便于整個(gè)治療療程的連續(xù)觀察，分別于用藥后的第3、7、14日進(jìn)行觀察和檢測(cè)，療程為14 d。（1）血液學(xué)指標(biāo)包括治療前及治療后3、7、14 d檢測(cè)凝血酶原時(shí)間（PT），纖維蛋白原（FBG），D-二聚體（D-D）。（2）靜脈血栓的溶栓效果：血栓形成后的第3日及用藥后的3、7、14 d行下肢靜脈彩超檢查，了解血栓再通情況。

1.6 療效標(biāo)準(zhǔn) 以采超結(jié)果評(píng)定。顯效：下肢靜脈完全通暢。有效：下肢靜脈部分通暢。無(wú)效：下肢靜脈不通暢。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 血液學(xué)指標(biāo)采用單因素方差分析（SNK-q檢驗(yàn)），靜脈血栓的溶栓效果以等級(jí)資料表示，采用多個(gè)樣本兩兩比較的軼和檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血液指標(biāo)變化比較 見(jiàn)表1。溶栓后A組和B組相比較，在不同的時(shí)間段均出現(xiàn)PT值延長(zhǎng)、FBG值降低（P＜0.01），A組和B組的值在用藥后的第3日差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），A組和B組在用藥后的第7、14日D-D值逐漸降至正常，組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 兩組不同時(shí)間凝血酶原PT、FBG值比較s）

表1 兩組不同時(shí)間凝血酶原PT、FBG值比較s）

與A組比較，*P＜0.05。

組 別D-D（μg/L）A組 血栓形成第3日 0.015±0.004（n＝24）用藥后第3日 0.029±0.005用藥后第7日 0.018±0.003 7.17±0.19* 4.42±0.17*（n＝24）用藥后第3日 8.64±0.14* 4.13±0.17* 0.033±0.004*用藥后第7日 10.80±0.23 3.96±0.21 0.027±0.003 PT（s） FBG（g/L）7.20±0.15 4.47±0.20 11.71±0.18 3.26±0.15 12.56±0.30 2.73±0.19 B組 血栓形成第3日 0.016±0.003*

2.2 兩組靜脈血栓的溶栓效果比較 見(jiàn)表2。在用藥后第3、7日，A、B組的溶栓效果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），第14日時(shí)，兩組溶栓效果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表2 兩組不同時(shí)間溶栓效果比較（n）

3 討論

抗凝、溶栓治療是目前治療急性下肢深靜脈血栓的主要方法，但外周靜脈溶栓治療也加大了大出血的風(fēng)險(xiǎn)［3］。下肢深靜脈血栓形成是靜脈回流障礙性疾病，Virehow提出其病因與患肢局部血流緩慢、血管內(nèi)膜損傷、血液高凝狀態(tài)3大因素有關(guān)［4］。各種手術(shù)后、創(chuàng)傷與骨折、產(chǎn)后、惡性腫瘤及長(zhǎng)期臥床的慢性疾病，是導(dǎo)致該病形成的主要誘因?？鼓委熓悄壳爸委熒铎o脈血栓的基石［5］，肝素是最普遍的抗凝藥物。本病屬于中醫(yī)學(xué)“脈痹”、“血痹”等范疇，其發(fā)生與濕熱、氣滯、寒凝、血瘀等因素有關(guān)，以瘀血阻滯、脈絡(luò)不通為主要病理機(jī)制［6］，故活血化瘀為基本法則而貫穿于治療的始終，并根據(jù)辨證結(jié)合清熱利濕、理氣行滯、溫陽(yáng)通脈等，可有效提高治療的針對(duì)性和療效。本方以中藥局部外敷為主，遵吳師機(jī)“外治之理，即內(nèi)治之理，外治之藥，即內(nèi)治之藥，所異者法耳”之說(shuō)。中藥經(jīng)皮膚，腧穴、五官、九竅滲透吸收，達(dá)到治療目的，有簡(jiǎn)、便、廉、驗(yàn)等特點(diǎn)和無(wú)胃腸道反應(yīng)及肝腎損害等毒副作用，為國(guó)內(nèi)外醫(yī)藥界所矚目。正基于此，本實(shí)驗(yàn)就“通脈活血散”治療兔急性下肢靜脈血栓的有效性及安全性進(jìn)行探討。

本實(shí)驗(yàn)證實(shí)通脈活血散可以有效的溶解血栓，起到抗栓的作用，出血風(fēng)險(xiǎn)低，具有相對(duì)較高的安全性。血液學(xué)指標(biāo)檢測(cè)表明，溶栓后的3 d、7 d、14 d，A組和B組相比，A組的PT延長(zhǎng)時(shí)間大于B組，A組的FBG值較B組小；PT延長(zhǎng)、FBG值降低說(shuō)明溶栓有效，但是隨著PT延長(zhǎng)、FBG值降低伴隨而來(lái)的出血的風(fēng)險(xiǎn)性也會(huì)增加，可見(jiàn)A組出血的危險(xiǎn)性較B組大，這可能與尿激酶激活全身纖溶系統(tǒng)有關(guān)，由此提示通脈活血散治療組的安全性較高。目前，尿激酶治療劑量無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)有增大劑量的趨勢(shì)［7］。尿激酶劑量過(guò)大可引起全身纖溶系統(tǒng)激活而導(dǎo)致嚴(yán)重出血等并發(fā)癥，所以不能通過(guò)不斷追加劑量來(lái)維持溶栓效果。另外，尿激酶和肝素的主要副作用是出血，兩者同時(shí)應(yīng)用更容易發(fā)。而從本方配伍及治療來(lái)看有如下特點(diǎn)。（1）本方均以益氣活血為主，特別是活血通絡(luò)更為重要，活血化瘀之品數(shù)量多且量較大，如當(dāng)歸、丹參、玄胡、桃仁、川芎、姜黃、郁金、血竭、乳香、沒(méi)藥、五靈脂、蒲黃、王不留行、三七、穿山甲、降香等具有行氣活血、破瘀之功效；徐長(zhǎng)卿為活血解毒、利水消腫；葛根生用能破血治瘡、散郁火；白芥子豁痰利氣、散結(jié)通絡(luò)止痛；雞血藤補(bǔ)血活血、舒筋通絡(luò)；白檀香有辛溫行散、利氣之功效。（2）為了促進(jìn)敷于局部的藥物對(duì)皮膚的穿透力，本方中還配伍了大量芳香性藥物，如樟腦、冰片、細(xì)辛、麝香等。據(jù)離體皮膚實(shí)驗(yàn)表明，芳香類(lèi)藥物敷于局部，可使皮質(zhì)層透皮能力提高6～8倍。（3）藥物直接作用病變部位，并以蜂蜜為基質(zhì)，使藥力更加持久，治療效果更加顯著。（4）本方治療下肢靜脈血栓形成既放寬了手術(shù)及抗凝藥物溶栓對(duì)發(fā)病時(shí)間的嚴(yán)格要求，又避免了出血等并發(fā)癥的發(fā)生率，同時(shí)減少了監(jiān)測(cè)凝血功能的檢驗(yàn)次數(shù)，為患者節(jié)省了住院時(shí)間和費(fèi)用。（5）藥物配置及使用方法比較簡(jiǎn)潔，適合基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)推廣使用。參考文獻(xiàn)

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An Experimental Study on Tongmaihuoxue Powder Treating Rabbits w ith Acute Venous Thrombosis ofLower Limb

MAO Wei-hua，XUE Zheng-jun，XIE Cui-hua，et al. Rugao Hospital of Traditional ChineseMedicine in Jiangsu Province，Jiangsu，Rugao 226500，China

Objective：To investigate the effectiveness and safety of Tongmaihuoxue powder treating rabbits with acute venous thrombosis of lower limb.M ethods：The acute venous thrombosis model was established with 48 rabbits and they were random ly divided into two groups：combination of urokinase and heparin group （A）and Tongmai huoxue powder group（B），each group including 24 rabbits.Drugs were administrated 3 days after thrombosis.Coagulation index was tested to assess the safety.Doppler ultrasound was used to assess the effectiveness on day 3，day 7，and day 14.Results：The prolongation of prothmmbin time（PT）in group B was shorter than that in group A（P＜0.05）.Fibrinogen（FBG）value in group B was lower than that in group A（P＜0.05）.D-dimer（D-D）value in group A and group B gradually returned to normal range.There was no difference between two groups（P＞0.05）.The thrombolytic effect was better but was not statistically different between group A and group B（P＞0.05）.Conclusion：Tongmaihuoxue powder treating rabbits with acute deep venous thrombosis is effective and safe.

Disease model，Animal；Venous thrombosis；Tongmaihuoxue powder；Anticoagulants

R285.5

A

1004-745X（2014）04-0635-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2014.04.030

江蘇省南通市科技社會(huì)發(fā)展計(jì)劃資助項(xiàng)目（No.S11938）

2013-12-22）