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      5種傘形科植物提取物對(duì)斜紋夜蛾的生物活性

      2014-07-16 14:55:34宋萍萍等
      江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年3期

      宋萍萍等

      摘要:以蛇床子不同溶劑提取物為陽性對(duì)照,利用浸漬葉碟法測(cè)定白芷、防風(fēng)、獨(dú)活及胡蘿卜籽等幾種傘形科植物不同溶劑提取物對(duì)3齡斜紋夜蛾幼蟲的生物活性。結(jié)果表明,5種植物提取物對(duì)斜紋夜蛾均有一定的拒食活性;胡蘿卜籽石油醚提取物和乙酸乙酯提取物、防風(fēng)石油醚提取物和乙酸乙酯提取物分別處理 48 h 后,斜紋夜蛾幼蟲拒食率相對(duì)較高,分別為92.40%和81.27%、82.27%和77.49%;獨(dú)活乙酸乙酯提取物及胡蘿卜籽甲醇提取物胃毒活性相對(duì)較高,校正死亡率為40.00%。

      關(guān)鍵詞:傘形科;斜紋夜蛾;拒食活性;觸殺活性

      中圖分類號(hào): S433.4 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號(hào):1002-1302(2014)03-0076-02

      近年來,開發(fā)天然資源物質(zhì),創(chuàng)制新型、高效、低毒殺蟲劑倍受人們重視,特別是利用天然植物活性成分作為殺蟲劑更是引人注目。目前,已開發(fā)了煙堿、苦參堿、魚藤酮、茵蒿素、黎蘆堿、茶皂素、川楝素、印楝素、蛇床子素等十幾種植物源殺蟲劑,在防治多種害蟲方面表現(xiàn)出良好的效果[2-4]。蛇床子素為近年來由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院開發(fā)的植物源農(nóng)藥,來源于傘形科植物蛇床子中,已有文獻(xiàn)報(bào)道蛇床子提取物具有殺蟲活性[5]。本試驗(yàn)以蛇床子不同溶劑提取物為陽性對(duì)照,測(cè)定了白芷、防風(fēng)、獨(dú)活和胡蘿卜籽等4種傘形科植物不同溶劑提取物對(duì)斜紋夜蛾的活性,為傘形科植物作為植物源農(nóng)藥在有害生物治理中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1 供試材料

      1.1.1 供試蟲源 將田間采集的斜紋夜蛾帶回室內(nèi),用未施藥、新鮮干凈的甘藍(lán)葉繼代飼養(yǎng)、穩(wěn)定繁殖,挑選健壯、大小一致的3齡幼蟲用于生物活性測(cè)定。

      1.1.2 供試中藥材 蛇床子、白芷、防風(fēng)、獨(dú)活飲片均購于安徽省亳州市中藥材市場(chǎng),由亳州市中藥飲片廠生產(chǎn);胡蘿卜種子“大禹特級(jí)三紅(五寸參)”由河北大禹種業(yè)有限公司生產(chǎn)。供試植物產(chǎn)地或來源、使用部位等信息見表1。

      1.2 試驗(yàn)方法

      1.2.1 樣品制備 將各供試植物材料在40 ℃烘箱內(nèi)烘干,取出,用粉碎機(jī)充分粉碎,制成干粉;分別稱取500 g干粉,用95%乙醇熱回流提取3次,回收溶劑的浸膏;浸膏用水溶解后,先用石油醚萃取至顏色較淡,再用乙酸乙酯萃取至顏色較淺,剩余部分用甲醇溶解;將石油醚萃取液、乙酸乙酯萃取液及甲醇提取液分別回收,溶劑用丙酮溶解后再用水稀釋,同時(shí)加入幾滴吐溫80作乳化劑,稀釋成一定濃度的溶液作為供試樣品備用。

      1.2.2 采用浸漬葉碟法進(jìn)行活性測(cè)定[6] 將新鮮甘藍(lán)葉片剪成20 mm×20 mm的葉碟,放入供試樣品內(nèi)浸2~3 s,取出晾干,放入置有保濕濾紙的培養(yǎng)皿中,每個(gè)培養(yǎng)皿中放2片處理葉碟,接入斜紋夜蛾3齡幼蟲,將培養(yǎng)皿放入(25±1)℃、光/暗周期為14 h/10 h的養(yǎng)蟲籠內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。每處理重復(fù)3次,每重復(fù)10頭幼蟲,以少量丙酮加水處理為對(duì)照,于48 h后用坐標(biāo)紙測(cè)量取食葉面積,利用SAS專業(yè)統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算平均取食面積、拒食率及死亡率。試蟲死亡標(biāo)準(zhǔn):蟲體失水皺縮,觸之不動(dòng)。計(jì)算方法:拒食率=(對(duì)照組取食面積-處理組取食面積)/對(duì)照組取食面積×100%;死亡率=死亡蟲數(shù)/供試總蟲數(shù)×100%;校正死亡率=(處理組死亡率-對(duì)照組死亡率)/(1-對(duì)照組死亡率)×100%。

      2 結(jié)果與分析

      由表2可見,白芷、防風(fēng)、獨(dú)活等5種傘形科植物提取物,對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲均有一定的拒食效果;在提取物濃度 20 g/L 處理48 h后,陽性對(duì)照品蛇床子的拒食效果最好;5種傘形科植物提取物拒食活性大小排序?yàn)椋荷叽沧右宜嵋阴ヌ崛∥铮?00%)>蛇床子石油醚提取物(99.10%)>胡蘿卜籽石油醚提取物(92.40%)>防風(fēng)石油醚提取物(82.27%)> 胡蘿卜籽乙酸乙酯提取物(81.27%)>防風(fēng)乙酸乙酯提取物(77.49%)>白芷石油醚提取物(75.08%)>獨(dú)活石油醚提取物(71.23%)>防風(fēng)甲醇提取物(70.47%)>獨(dú)活乙酸乙酯提取物(68.50%)>白芷乙酸乙酯提取物(36.03%)>胡蘿卜籽甲醇提取物(30.98%)>獨(dú)活甲醇提取物(1986%)>白芷甲醇提取物(14.76%)>蛇床子甲醇提取物(11.63%)。

      比較5種植物提取物對(duì)3齡斜紋夜蛾幼蟲的胃毒活性,結(jié)果表明,在20 g/L處理濃度下,5種植物提取物對(duì)斜紋夜蛾的毒殺活性都不是很強(qiáng),相比陽性對(duì)照品蛇床子,獨(dú)活乙酸乙酯提取物及胡蘿卜籽甲醇提取物毒殺活性相對(duì)較高,校正死亡率為40.00%。

      3 小結(jié)與討論

      白芷、防風(fēng)、獨(dú)活等5種傘形科植物提取物對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲均有一定的拒食效果。胡蘿卜籽石油醚提取物和乙酸乙酯提取物、防風(fēng)石油醚提取物和乙酸乙酯提取物拒食率相對(duì)較高,分別為92.40%和81.27%、82.27%和77.49%。供試植物石油醚提取物拒食活性強(qiáng),可能與大多數(shù)中藥材都有一定氣味有關(guān),也有可能與環(huán)境因素有關(guān),具體原因有待進(jìn)一步研究。供試植物乙酸乙酯提取物較甲醇提取物拒食活性強(qiáng),部分植物還具有一定的胃毒作用,這是因?yàn)橐宜嵋阴ヌ崛∥锟赡芎邢愣顾鼗衔颷7-9]。香豆素化合物對(duì)昆蟲具有拒食和觸殺作用,作為一大類植物次生代謝產(chǎn)物在農(nóng)業(yè)上有著廣泛的應(yīng)用,包括對(duì)植物的生長調(diào)節(jié)作用、作為植保素對(duì)病原微生物(細(xì)菌、病毒等)的作用等[10],如香豆素、蛇床子素已經(jīng)開發(fā)為殺蟲型、殺菌型植物源農(nóng)藥。

      白芷、防風(fēng)、獨(dú)活等5種傘形科植物提取物對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲的胃毒作用不是很好,獨(dú)活乙酸乙酯提取物及胡蘿卜籽甲醇提取物毒殺活性較高,校正死亡率為40.00%,與濃度為500 g/L的蛇床子丙酮、乙酸乙酯、氯仿、石油醚提取液處理菜青蟲3齡幼蟲24 h,校正死亡率分別為95%、90%、60%、55%[5]相比,死亡率偏小,這可能是因?yàn)楸驹囼?yàn)提取物濃度為20 g/L,試驗(yàn)濃度相對(duì)較低,活性成分發(fā)揮作用不明顯,另外也有可能與斜紋夜蛾的耐藥性較強(qiáng)有關(guān)。

      白芷、獨(dú)活、防風(fēng)和胡蘿卜籽不僅具有藥用價(jià)值,對(duì)農(nóng)業(yè)害蟲也具有拒食活性和殺蟲活性,可作為植物源農(nóng)藥資源進(jìn)行利用。有關(guān)這5種傘形科植物殺蟲作用、生物活性物質(zhì)有效成分分析及作用機(jī)理等有待進(jìn)一步研究。

      參考文獻(xiàn):

      [1]周 真,訾 婷,李麗春,等. 不同種類殺蟲劑防治斜紋夜蛾藥效試驗(yàn)初報(bào)[J]. 農(nóng)藥,2010,49(4):293-294.

      [2]羅萬春,慕立義,李云壽. 植物源生物堿的殺蟲作用[J]. 農(nóng)藥,1997,36(7):8-12.

      [3]張 興,楊崇珍,王興林. 西北地區(qū)殺蟲植物的篩選[J]. 西北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1999,27(2):21-27.

      [4]郝乃斌,戈巧英. 中國植物源殺蟲劑的研制與應(yīng)用[J]. 植物學(xué)通報(bào),1999,16(5):495-503.

      [5]侯奕充,王 超,王國夫 .蛇床子提取液的殺蟲活性研究[J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,51(8):1589-1590.

      [6]紀(jì)明山,范艷菊,祁之秋,等. 30種中藥材提取物對(duì)小菜蛾生物活性測(cè)定[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(2):115-116.

      [7]盧 嘉,金 麗,金永生,等. 中藥杭白芷化學(xué)成分的研究[J]. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2007,28(3):294-298.

      [8]趙 博,楊鑫寶,楊秀偉,等. 防風(fēng)化學(xué)成分的研究[J]. 中國中藥雜志,2010,35(12):1569-1572.

      [9]張才煜,張本剛,楊秀偉. 獨(dú)活化學(xué)成分的研究[J]. 解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào),2007,23(4):241-245.

      [10]朱述鈞,王春梅,沈壽國,等. 香豆素類化合物在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2006,18(2):97-100.

      摘要:以蛇床子不同溶劑提取物為陽性對(duì)照,利用浸漬葉碟法測(cè)定白芷、防風(fēng)、獨(dú)活及胡蘿卜籽等幾種傘形科植物不同溶劑提取物對(duì)3齡斜紋夜蛾幼蟲的生物活性。結(jié)果表明,5種植物提取物對(duì)斜紋夜蛾均有一定的拒食活性;胡蘿卜籽石油醚提取物和乙酸乙酯提取物、防風(fēng)石油醚提取物和乙酸乙酯提取物分別處理 48 h 后,斜紋夜蛾幼蟲拒食率相對(duì)較高,分別為92.40%和81.27%、82.27%和77.49%;獨(dú)活乙酸乙酯提取物及胡蘿卜籽甲醇提取物胃毒活性相對(duì)較高,校正死亡率為40.00%。

      關(guān)鍵詞:傘形科;斜紋夜蛾;拒食活性;觸殺活性

      中圖分類號(hào): S433.4 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號(hào):1002-1302(2014)03-0076-02

      近年來,開發(fā)天然資源物質(zhì),創(chuàng)制新型、高效、低毒殺蟲劑倍受人們重視,特別是利用天然植物活性成分作為殺蟲劑更是引人注目。目前,已開發(fā)了煙堿、苦參堿、魚藤酮、茵蒿素、黎蘆堿、茶皂素、川楝素、印楝素、蛇床子素等十幾種植物源殺蟲劑,在防治多種害蟲方面表現(xiàn)出良好的效果[2-4]。蛇床子素為近年來由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院開發(fā)的植物源農(nóng)藥,來源于傘形科植物蛇床子中,已有文獻(xiàn)報(bào)道蛇床子提取物具有殺蟲活性[5]。本試驗(yàn)以蛇床子不同溶劑提取物為陽性對(duì)照,測(cè)定了白芷、防風(fēng)、獨(dú)活和胡蘿卜籽等4種傘形科植物不同溶劑提取物對(duì)斜紋夜蛾的活性,為傘形科植物作為植物源農(nóng)藥在有害生物治理中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1 供試材料

      1.1.1 供試蟲源 將田間采集的斜紋夜蛾帶回室內(nèi),用未施藥、新鮮干凈的甘藍(lán)葉繼代飼養(yǎng)、穩(wěn)定繁殖,挑選健壯、大小一致的3齡幼蟲用于生物活性測(cè)定。

      1.1.2 供試中藥材 蛇床子、白芷、防風(fēng)、獨(dú)活飲片均購于安徽省亳州市中藥材市場(chǎng),由亳州市中藥飲片廠生產(chǎn);胡蘿卜種子“大禹特級(jí)三紅(五寸參)”由河北大禹種業(yè)有限公司生產(chǎn)。供試植物產(chǎn)地或來源、使用部位等信息見表1。

      1.2 試驗(yàn)方法

      1.2.1 樣品制備 將各供試植物材料在40 ℃烘箱內(nèi)烘干,取出,用粉碎機(jī)充分粉碎,制成干粉;分別稱取500 g干粉,用95%乙醇熱回流提取3次,回收溶劑的浸膏;浸膏用水溶解后,先用石油醚萃取至顏色較淡,再用乙酸乙酯萃取至顏色較淺,剩余部分用甲醇溶解;將石油醚萃取液、乙酸乙酯萃取液及甲醇提取液分別回收,溶劑用丙酮溶解后再用水稀釋,同時(shí)加入幾滴吐溫80作乳化劑,稀釋成一定濃度的溶液作為供試樣品備用。

      1.2.2 采用浸漬葉碟法進(jìn)行活性測(cè)定[6] 將新鮮甘藍(lán)葉片剪成20 mm×20 mm的葉碟,放入供試樣品內(nèi)浸2~3 s,取出晾干,放入置有保濕濾紙的培養(yǎng)皿中,每個(gè)培養(yǎng)皿中放2片處理葉碟,接入斜紋夜蛾3齡幼蟲,將培養(yǎng)皿放入(25±1)℃、光/暗周期為14 h/10 h的養(yǎng)蟲籠內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。每處理重復(fù)3次,每重復(fù)10頭幼蟲,以少量丙酮加水處理為對(duì)照,于48 h后用坐標(biāo)紙測(cè)量取食葉面積,利用SAS專業(yè)統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算平均取食面積、拒食率及死亡率。試蟲死亡標(biāo)準(zhǔn):蟲體失水皺縮,觸之不動(dòng)。計(jì)算方法:拒食率=(對(duì)照組取食面積-處理組取食面積)/對(duì)照組取食面積×100%;死亡率=死亡蟲數(shù)/供試總蟲數(shù)×100%;校正死亡率=(處理組死亡率-對(duì)照組死亡率)/(1-對(duì)照組死亡率)×100%。

      2 結(jié)果與分析

      由表2可見,白芷、防風(fēng)、獨(dú)活等5種傘形科植物提取物,對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲均有一定的拒食效果;在提取物濃度 20 g/L 處理48 h后,陽性對(duì)照品蛇床子的拒食效果最好;5種傘形科植物提取物拒食活性大小排序?yàn)椋荷叽沧右宜嵋阴ヌ崛∥铮?00%)>蛇床子石油醚提取物(99.10%)>胡蘿卜籽石油醚提取物(92.40%)>防風(fēng)石油醚提取物(82.27%)> 胡蘿卜籽乙酸乙酯提取物(81.27%)>防風(fēng)乙酸乙酯提取物(77.49%)>白芷石油醚提取物(75.08%)>獨(dú)活石油醚提取物(71.23%)>防風(fēng)甲醇提取物(70.47%)>獨(dú)活乙酸乙酯提取物(68.50%)>白芷乙酸乙酯提取物(36.03%)>胡蘿卜籽甲醇提取物(30.98%)>獨(dú)活甲醇提取物(1986%)>白芷甲醇提取物(14.76%)>蛇床子甲醇提取物(11.63%)。

      比較5種植物提取物對(duì)3齡斜紋夜蛾幼蟲的胃毒活性,結(jié)果表明,在20 g/L處理濃度下,5種植物提取物對(duì)斜紋夜蛾的毒殺活性都不是很強(qiáng),相比陽性對(duì)照品蛇床子,獨(dú)活乙酸乙酯提取物及胡蘿卜籽甲醇提取物毒殺活性相對(duì)較高,校正死亡率為40.00%。

      3 小結(jié)與討論

      白芷、防風(fēng)、獨(dú)活等5種傘形科植物提取物對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲均有一定的拒食效果。胡蘿卜籽石油醚提取物和乙酸乙酯提取物、防風(fēng)石油醚提取物和乙酸乙酯提取物拒食率相對(duì)較高,分別為92.40%和81.27%、82.27%和77.49%。供試植物石油醚提取物拒食活性強(qiáng),可能與大多數(shù)中藥材都有一定氣味有關(guān),也有可能與環(huán)境因素有關(guān),具體原因有待進(jìn)一步研究。供試植物乙酸乙酯提取物較甲醇提取物拒食活性強(qiáng),部分植物還具有一定的胃毒作用,這是因?yàn)橐宜嵋阴ヌ崛∥锟赡芎邢愣顾鼗衔颷7-9]。香豆素化合物對(duì)昆蟲具有拒食和觸殺作用,作為一大類植物次生代謝產(chǎn)物在農(nóng)業(yè)上有著廣泛的應(yīng)用,包括對(duì)植物的生長調(diào)節(jié)作用、作為植保素對(duì)病原微生物(細(xì)菌、病毒等)的作用等[10],如香豆素、蛇床子素已經(jīng)開發(fā)為殺蟲型、殺菌型植物源農(nóng)藥。

      白芷、防風(fēng)、獨(dú)活等5種傘形科植物提取物對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲的胃毒作用不是很好,獨(dú)活乙酸乙酯提取物及胡蘿卜籽甲醇提取物毒殺活性較高,校正死亡率為40.00%,與濃度為500 g/L的蛇床子丙酮、乙酸乙酯、氯仿、石油醚提取液處理菜青蟲3齡幼蟲24 h,校正死亡率分別為95%、90%、60%、55%[5]相比,死亡率偏小,這可能是因?yàn)楸驹囼?yàn)提取物濃度為20 g/L,試驗(yàn)濃度相對(duì)較低,活性成分發(fā)揮作用不明顯,另外也有可能與斜紋夜蛾的耐藥性較強(qiáng)有關(guān)。

      白芷、獨(dú)活、防風(fēng)和胡蘿卜籽不僅具有藥用價(jià)值,對(duì)農(nóng)業(yè)害蟲也具有拒食活性和殺蟲活性,可作為植物源農(nóng)藥資源進(jìn)行利用。有關(guān)這5種傘形科植物殺蟲作用、生物活性物質(zhì)有效成分分析及作用機(jī)理等有待進(jìn)一步研究。

      參考文獻(xiàn):

      [1]周 真,訾 婷,李麗春,等. 不同種類殺蟲劑防治斜紋夜蛾藥效試驗(yàn)初報(bào)[J]. 農(nóng)藥,2010,49(4):293-294.

      [2]羅萬春,慕立義,李云壽. 植物源生物堿的殺蟲作用[J]. 農(nóng)藥,1997,36(7):8-12.

      [3]張 興,楊崇珍,王興林. 西北地區(qū)殺蟲植物的篩選[J]. 西北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1999,27(2):21-27.

      [4]郝乃斌,戈巧英. 中國植物源殺蟲劑的研制與應(yīng)用[J]. 植物學(xué)通報(bào),1999,16(5):495-503.

      [5]侯奕充,王 超,王國夫 .蛇床子提取液的殺蟲活性研究[J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,51(8):1589-1590.

      [6]紀(jì)明山,范艷菊,祁之秋,等. 30種中藥材提取物對(duì)小菜蛾生物活性測(cè)定[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(2):115-116.

      [7]盧 嘉,金 麗,金永生,等. 中藥杭白芷化學(xué)成分的研究[J]. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2007,28(3):294-298.

      [8]趙 博,楊鑫寶,楊秀偉,等. 防風(fēng)化學(xué)成分的研究[J]. 中國中藥雜志,2010,35(12):1569-1572.

      [9]張才煜,張本剛,楊秀偉. 獨(dú)活化學(xué)成分的研究[J]. 解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào),2007,23(4):241-245.

      [10]朱述鈞,王春梅,沈壽國,等. 香豆素類化合物在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2006,18(2):97-100.

      摘要:以蛇床子不同溶劑提取物為陽性對(duì)照,利用浸漬葉碟法測(cè)定白芷、防風(fēng)、獨(dú)活及胡蘿卜籽等幾種傘形科植物不同溶劑提取物對(duì)3齡斜紋夜蛾幼蟲的生物活性。結(jié)果表明,5種植物提取物對(duì)斜紋夜蛾均有一定的拒食活性;胡蘿卜籽石油醚提取物和乙酸乙酯提取物、防風(fēng)石油醚提取物和乙酸乙酯提取物分別處理 48 h 后,斜紋夜蛾幼蟲拒食率相對(duì)較高,分別為92.40%和81.27%、82.27%和77.49%;獨(dú)活乙酸乙酯提取物及胡蘿卜籽甲醇提取物胃毒活性相對(duì)較高,校正死亡率為40.00%。

      關(guān)鍵詞:傘形科;斜紋夜蛾;拒食活性;觸殺活性

      中圖分類號(hào): S433.4 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號(hào):1002-1302(2014)03-0076-02

      近年來,開發(fā)天然資源物質(zhì),創(chuàng)制新型、高效、低毒殺蟲劑倍受人們重視,特別是利用天然植物活性成分作為殺蟲劑更是引人注目。目前,已開發(fā)了煙堿、苦參堿、魚藤酮、茵蒿素、黎蘆堿、茶皂素、川楝素、印楝素、蛇床子素等十幾種植物源殺蟲劑,在防治多種害蟲方面表現(xiàn)出良好的效果[2-4]。蛇床子素為近年來由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院開發(fā)的植物源農(nóng)藥,來源于傘形科植物蛇床子中,已有文獻(xiàn)報(bào)道蛇床子提取物具有殺蟲活性[5]。本試驗(yàn)以蛇床子不同溶劑提取物為陽性對(duì)照,測(cè)定了白芷、防風(fēng)、獨(dú)活和胡蘿卜籽等4種傘形科植物不同溶劑提取物對(duì)斜紋夜蛾的活性,為傘形科植物作為植物源農(nóng)藥在有害生物治理中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1 供試材料

      1.1.1 供試蟲源 將田間采集的斜紋夜蛾帶回室內(nèi),用未施藥、新鮮干凈的甘藍(lán)葉繼代飼養(yǎng)、穩(wěn)定繁殖,挑選健壯、大小一致的3齡幼蟲用于生物活性測(cè)定。

      1.1.2 供試中藥材 蛇床子、白芷、防風(fēng)、獨(dú)活飲片均購于安徽省亳州市中藥材市場(chǎng),由亳州市中藥飲片廠生產(chǎn);胡蘿卜種子“大禹特級(jí)三紅(五寸參)”由河北大禹種業(yè)有限公司生產(chǎn)。供試植物產(chǎn)地或來源、使用部位等信息見表1。

      1.2 試驗(yàn)方法

      1.2.1 樣品制備 將各供試植物材料在40 ℃烘箱內(nèi)烘干,取出,用粉碎機(jī)充分粉碎,制成干粉;分別稱取500 g干粉,用95%乙醇熱回流提取3次,回收溶劑的浸膏;浸膏用水溶解后,先用石油醚萃取至顏色較淡,再用乙酸乙酯萃取至顏色較淺,剩余部分用甲醇溶解;將石油醚萃取液、乙酸乙酯萃取液及甲醇提取液分別回收,溶劑用丙酮溶解后再用水稀釋,同時(shí)加入幾滴吐溫80作乳化劑,稀釋成一定濃度的溶液作為供試樣品備用。

      1.2.2 采用浸漬葉碟法進(jìn)行活性測(cè)定[6] 將新鮮甘藍(lán)葉片剪成20 mm×20 mm的葉碟,放入供試樣品內(nèi)浸2~3 s,取出晾干,放入置有保濕濾紙的培養(yǎng)皿中,每個(gè)培養(yǎng)皿中放2片處理葉碟,接入斜紋夜蛾3齡幼蟲,將培養(yǎng)皿放入(25±1)℃、光/暗周期為14 h/10 h的養(yǎng)蟲籠內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。每處理重復(fù)3次,每重復(fù)10頭幼蟲,以少量丙酮加水處理為對(duì)照,于48 h后用坐標(biāo)紙測(cè)量取食葉面積,利用SAS專業(yè)統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算平均取食面積、拒食率及死亡率。試蟲死亡標(biāo)準(zhǔn):蟲體失水皺縮,觸之不動(dòng)。計(jì)算方法:拒食率=(對(duì)照組取食面積-處理組取食面積)/對(duì)照組取食面積×100%;死亡率=死亡蟲數(shù)/供試總蟲數(shù)×100%;校正死亡率=(處理組死亡率-對(duì)照組死亡率)/(1-對(duì)照組死亡率)×100%。

      2 結(jié)果與分析

      由表2可見,白芷、防風(fēng)、獨(dú)活等5種傘形科植物提取物,對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲均有一定的拒食效果;在提取物濃度 20 g/L 處理48 h后,陽性對(duì)照品蛇床子的拒食效果最好;5種傘形科植物提取物拒食活性大小排序?yàn)椋荷叽沧右宜嵋阴ヌ崛∥铮?00%)>蛇床子石油醚提取物(99.10%)>胡蘿卜籽石油醚提取物(92.40%)>防風(fēng)石油醚提取物(82.27%)> 胡蘿卜籽乙酸乙酯提取物(81.27%)>防風(fēng)乙酸乙酯提取物(77.49%)>白芷石油醚提取物(75.08%)>獨(dú)活石油醚提取物(71.23%)>防風(fēng)甲醇提取物(70.47%)>獨(dú)活乙酸乙酯提取物(68.50%)>白芷乙酸乙酯提取物(36.03%)>胡蘿卜籽甲醇提取物(30.98%)>獨(dú)活甲醇提取物(1986%)>白芷甲醇提取物(14.76%)>蛇床子甲醇提取物(11.63%)。

      比較5種植物提取物對(duì)3齡斜紋夜蛾幼蟲的胃毒活性,結(jié)果表明,在20 g/L處理濃度下,5種植物提取物對(duì)斜紋夜蛾的毒殺活性都不是很強(qiáng),相比陽性對(duì)照品蛇床子,獨(dú)活乙酸乙酯提取物及胡蘿卜籽甲醇提取物毒殺活性相對(duì)較高,校正死亡率為40.00%。

      3 小結(jié)與討論

      白芷、防風(fēng)、獨(dú)活等5種傘形科植物提取物對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲均有一定的拒食效果。胡蘿卜籽石油醚提取物和乙酸乙酯提取物、防風(fēng)石油醚提取物和乙酸乙酯提取物拒食率相對(duì)較高,分別為92.40%和81.27%、82.27%和77.49%。供試植物石油醚提取物拒食活性強(qiáng),可能與大多數(shù)中藥材都有一定氣味有關(guān),也有可能與環(huán)境因素有關(guān),具體原因有待進(jìn)一步研究。供試植物乙酸乙酯提取物較甲醇提取物拒食活性強(qiáng),部分植物還具有一定的胃毒作用,這是因?yàn)橐宜嵋阴ヌ崛∥锟赡芎邢愣顾鼗衔颷7-9]。香豆素化合物對(duì)昆蟲具有拒食和觸殺作用,作為一大類植物次生代謝產(chǎn)物在農(nóng)業(yè)上有著廣泛的應(yīng)用,包括對(duì)植物的生長調(diào)節(jié)作用、作為植保素對(duì)病原微生物(細(xì)菌、病毒等)的作用等[10],如香豆素、蛇床子素已經(jīng)開發(fā)為殺蟲型、殺菌型植物源農(nóng)藥。

      白芷、防風(fēng)、獨(dú)活等5種傘形科植物提取物對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲的胃毒作用不是很好,獨(dú)活乙酸乙酯提取物及胡蘿卜籽甲醇提取物毒殺活性較高,校正死亡率為40.00%,與濃度為500 g/L的蛇床子丙酮、乙酸乙酯、氯仿、石油醚提取液處理菜青蟲3齡幼蟲24 h,校正死亡率分別為95%、90%、60%、55%[5]相比,死亡率偏小,這可能是因?yàn)楸驹囼?yàn)提取物濃度為20 g/L,試驗(yàn)濃度相對(duì)較低,活性成分發(fā)揮作用不明顯,另外也有可能與斜紋夜蛾的耐藥性較強(qiáng)有關(guān)。

      白芷、獨(dú)活、防風(fēng)和胡蘿卜籽不僅具有藥用價(jià)值,對(duì)農(nóng)業(yè)害蟲也具有拒食活性和殺蟲活性,可作為植物源農(nóng)藥資源進(jìn)行利用。有關(guān)這5種傘形科植物殺蟲作用、生物活性物質(zhì)有效成分分析及作用機(jī)理等有待進(jìn)一步研究。

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