嚴(yán)俊

抗苗勒管激素及其2型受體在子宮內(nèi)膜樣腺癌中的表達(dá)

嚴(yán)俊

目的分析研究抗苗勒管激素(AMH)及其Ⅱ型受體對于子宮內(nèi)膜樣腺癌的作用, 探討其分布表達(dá)情況。方法60例子宮內(nèi)膜樣腺癌患者, 根據(jù)其分化級別進(jìn)行分組, 包括低分化組(Ⅲ級)15例、中分化組(Ⅱ級)30例和高分化組(Ⅰ級)15例, 對患者腺癌組織進(jìn)行免疫組化分析, 統(tǒng)計對比三組患者AMH以及AMHR-Ⅱ得到陽性率。結(jié)果資料中所有患者子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中均檢測到AMH以及AMHR-Ⅱ的陽性表達(dá), 高分化組患者AMH陽性率及AMHR-Ⅱ陽性率高于中低分化組, 陽性率隨著分化程度的升高而增高, 三組患者陽性率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論隨著子宮內(nèi)膜樣腺癌患者分化程度的升高, 患者AMH以及AMHR-Ⅱ陽性率呈現(xiàn)上升趨勢, 其表達(dá)與患者腺癌的發(fā)生密切相關(guān)。

子宮內(nèi)膜樣腺癌；免疫組織化學(xué)；抗苗勒管激素；抗苗勒管激素Ⅱ型受體

苗勒管抑制物, 即抗苗勒管激素(AMH), 是β-轉(zhuǎn)化生長因子的一種, 具有一定調(diào)節(jié)細(xì)胞生長發(fā)育的作用, 并對于許多腫瘤尤其是女性生殖系統(tǒng)腫瘤可起到抗增殖作用［1］。該因子通過與其受體AMHR結(jié)合而作用, 其受體包括AMHR-Ⅰ及AMHR-Ⅱ。研究發(fā)現(xiàn)女性生殖系統(tǒng)常見腫瘤子宮內(nèi)膜樣腺癌上有AMH以及AMHR-Ⅱ的表達(dá), 子宮內(nèi)膜樣腺癌的分化程度或與該表達(dá)相關(guān)［2］。為探討該相關(guān)性, 分析AMH在子宮內(nèi)膜樣腺癌發(fā)病中作用, 采用免疫組化法對本院該類患者病理組織進(jìn)行監(jiān)測分析, 報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 本文中選取自2009年2月～2014年2月于張家港市第一人民醫(yī)院治療的子宮內(nèi)膜樣腺癌患者60例作為研究對象, 以其手術(shù)切除的腺癌組織為樣本。資料中患者均經(jīng)組織病理學(xué)檢查確認(rèn)為子宮內(nèi)膜樣腺癌根據(jù)分化組別分組, 包括低分化組(Ⅲ級)15例、中分化組(Ⅱ級)30例和高分化組(Ⅰ級)15例, 年齡29～70歲, 中位年齡57歲, 且術(shù)前均無化療和放療治療歷史。子宮內(nèi)膜樣腺癌按2006年WHO組織學(xué)分類標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病理分級。多克隆抗體均購自生工生物工程(上海)股份有限公司, 均為即用型試劑。

1.2方法及觀察指標(biāo) 采用免疫組織化學(xué)法對所有組織樣本進(jìn)行檢測, 分析樣本中AMH以及AMHR-Ⅱ的表達(dá)情況。操作步驟取常規(guī)石蠟組織切成約4 μm厚的切片, 貼附與鉻礬明膠載玻片。嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行檢測, 采用二甲苯對切片進(jìn)行3次脫蠟, 并采用梯度乙醇進(jìn)行水化, PBS3次洗滌后30 min 3 mol/L尿素消化。PBS再度洗滌3次后加入甲醇-過氧化氫30 min, 之后加入檸檬酸鈉液5～8 min修復(fù)抗原。之后滴加A液并予以15 min室溫封閉, 分別滴加第一抗體AMHR-Ⅰ及AMHR-Ⅱ, 冰箱過夜再次PBS洗滌后滴加B液, 50 min孵育后PBS洗滌。滴加試劑C并于37℃下30 min孵育, PBS洗滌后采用DAB進(jìn)行顯色, 蘇木素復(fù)染, 脫水透明后封片。另作陰性對照組, 對照組第一抗體取代PBS。

檢測后采用相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)對免疫組化結(jié)果進(jìn)行判定, 胞漿無顯色為陰性, 胞漿中出現(xiàn)淡黃色顆粒為陽性, 胞漿中出現(xiàn)棕黃色顆粒為強(qiáng)陽性, 根據(jù)顯色深淺及顯色細(xì)胞比例判定為陽性或強(qiáng)陽性。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法 所得結(jié)果數(shù)據(jù)采用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理。計數(shù)資料采用χ2檢驗。以 P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1資料中所有患者子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中均檢測到AMH以及AMHR-Ⅱ的陽性表達(dá), 陰性組均為陰性。高分化組(Ⅰ級)患者中分別有14例表現(xiàn)為AMH陽性, 13例表現(xiàn)為AMHR-Ⅱ陽性, AMH陽性率及AMHR-Ⅱ陽性率分別為93.7%和86.7%。中分化腺癌(Ⅱ級)AMH陽性率則為76.7%, 陽AMHR-Ⅱ性率為73.3%, 遠(yuǎn)低于高分化組患者,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。低分化組患者AMH陽性率和AMHR-Ⅱ陽性率則分別為26.7%和20.0%, 低于中分化組患者, 差異有統(tǒng)計意義(P＜0.05)?？梢夾MH和AMHR-Ⅱ表達(dá)率隨著病理分化程度的升高而增高。

2.2AMH和AMHR-Ⅱ在自宮內(nèi)膜樣腺癌中的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系 AMH和AMHR-Ⅱ在子宮內(nèi)膜樣腺癌中的表達(dá)陽性率與年齡、臨床分期等因素?zé)o關(guān)(P＞0.05), 但與子宮內(nèi)膜樣腺癌病理分級、肌層浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P＜0.05)。見表1。

表1 AMH和AMHR-Ⅱ表達(dá)與子宮內(nèi)膜樣腺癌臨床病理特征的關(guān)系［n(%)］

3 討論

抗苗勒管激素, 即AMH是轉(zhuǎn)化生長因子超家族的一種,在一定程度上可調(diào)控細(xì)胞的生長發(fā)育, 研究發(fā)現(xiàn)顆粒細(xì)胞腫瘤患者AMH表達(dá)水平隨著腫瘤的發(fā)生而升高, 隨著腫瘤切除而降低, 且早于癥狀的發(fā)生, 因而部分研究和臨床中將AMH作為顆粒細(xì)胞瘤敏感性指標(biāo)之一［3］。研究顯示, AMH通過與其受體AMHR-Ⅱ的結(jié)合在體外試驗中看能有效抑制顆粒細(xì)胞腫瘤的增長, 還與其他腫瘤尤其是女性生殖系統(tǒng)腫瘤密切相關(guān)。

本文中, 為探討AMH對子宮內(nèi)膜樣腺癌發(fā)生機(jī)理的影響, 采用免疫組化法對不同病理分級的患者該兩種因子與腺癌組織中的表達(dá)情況進(jìn)行檢測, 檢測結(jié)果顯示, 該兩種因子的表達(dá)水平隨著病例分化程度的升高呈現(xiàn)上升趨勢, 高分化程度患者的AMH和AMHR-Ⅱ陽性率明顯高于中低分化程度的患者, 可見差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。說明AMH在子宮內(nèi)膜癌進(jìn)展過程中起到重要作用, 由于AMH的抗增殖作用, 隨著病理分化程度的降低, AMH表達(dá)量也呈現(xiàn)下降趨勢［4］。一般認(rèn)為其作用途徑在于與受體結(jié)合后起到了細(xì)胞的凋亡基因, 或認(rèn)為其競爭性減少了EGF, 抑制了其細(xì)胞膜蛋白質(zhì)磷酸化作用而抑制增殖。

綜上所述, 子宮內(nèi)膜樣腺癌患者組織中均見AMH表達(dá),說明該因子及其受體與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系, 但具體作用機(jī)理和途徑仍需進(jìn)一步研究。

［1］ 余慧敏, 劉彥.抗苗勒管激素在女性生殖領(lǐng)域的研究進(jìn)展.中國計劃生育學(xué)雜志, 2009, 17(12):759-761.

［2］ 胡蓉, 田春花, 田進(jìn)石, 等.抗苗勒管激素及其2型受體基因多態(tài)性在多囊卵巢綜合征患者表達(dá)的研究.實用婦產(chǎn)科雜志, 2012, 28(9):739-742.

［3］ 賀淑芳, 萬小云, 謝幸.微管相關(guān)蛋自LC3 和組織蛋白酶D 在子宮內(nèi)膜樣腺癌中的表達(dá)及意義.現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展, 2007, 16(2): 100-102.

［4］ 李鍵, 閆麗盈, 唐榮欣, 等.抗苗勒氏管激素及其Ⅱ型受體的基因多態(tài)性與多囊卵巢綜合征發(fā)病的關(guān)系.中國婦產(chǎn)科臨床雜志, 2008, 9(3):206-210.

2014-06-20］

215600 江蘇省張家港市第一人民醫(yī)院病理科