頂空-氣相色譜法測定托芬那酸中有機溶劑殘留

孫培鋒 盧小逸 張啟明

（浙江啟明藥業(yè)有限公司，浙江 上虞 312369）

托芬那酸是一種非甾體抗炎藥，與其他的非甾體抗炎藥類似，托芬那酸具有抗炎、鎮(zhèn)痛及解熱作用。在生產過程中，常用甲苯和DMF作為溶劑，導致托芬那酸中存在甲苯和DMF的有機殘留，而有收錄該產品的歐洲藥典（EP7.5）均未對溶劑殘留做相應的規(guī)定，鑒于其毒性，因此很有必要建立一種可以測定甲苯和DMF殘留量的檢測方法。本文根據2010版中國藥典的要求，特制定了用頂空氣相色譜法測定托芬那酸中有機溶劑殘留量的方法。該法靈明度高，定量準確，分離度好。

1 儀器

1.1 儀器：Agilent 6890N氣相色譜儀；Agilent7694E頂空進樣器。

1.2 色譜條件：氣相色譜柱：DB-624；柱溫：初始柱溫為60℃，保持3min后以20℃/min的速率升溫至200℃，保持4min；檢測器：FID；載氣流量：N2，50ml/min；空氣400ml/min，氫氣40ml/min；溫度：檢測器250℃，進樣口220℃，分流比：20：1。

1.3 頂空進樣器條件：平衡溫度：100℃；進樣溫度110℃；傳輸管溫度120℃；樣品平衡時間：30min。

2 試液

2.1 試藥：托芬那酸（浙江啟明藥業(yè)有限公司，批號為：140501、140502、140503）；甲苯（分析純）；二甲基甲酰胺（DMF）（分析純）；二甲基亞砜（DMSO）（色譜純）。

2.2 空白溶液的制備：取10ml頂空瓶3個，分別加入1ml的甲苯、DMF和DMSO。

2.3 供試品溶液的制備：精密稱取3批托芬那酸各1.0g，分別置于3個10ml頂空瓶中，加DMSO1ml，搖勻，即得。

2.4 對照品儲備溶液的制備：用微量注射器精密稱取0.088gDMF和0.089g甲苯，分別置于有適量DMSO的100ml量瓶中，加DMSO至刻度，搖勻。

2.5 對照品溶液的制備：精密量取對照儲備溶液各1.0ml，置同一個10ml量瓶中，加DMSO稀釋至刻度，搖勻，即得。

3 方法與結果

3.1 系統(tǒng)適應性試驗

取各空白溶液至頂空進樣器內，經頂空進樣色譜分析表明：R甲苯=4.169min，RDMF=5.054min，RDMSO=6.403min； 各 溶 劑峰分離度良好，符合要求。

3.2 系統(tǒng)精密度

將對照品溶液經頂空連續(xù)進樣6次，記錄色譜圖。根據實驗結果計算表明：RSD甲苯=0.84%；RSDDMF=0.31%， 甲 苯 和DMF的精密度滿足要求。

3.3 線性及范圍

線性溶液的配制：精密量取對照儲備溶液 0.2ml、0.5ml、0.8ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml分別置于6個10ml量瓶中，用DMSO稀釋至刻度，搖勻。分別移取1ml至6個10ml頂空瓶中。

將上述6種線性溶液及DMSO的空白溶液分別經頂空進樣色譜分析，記錄甲苯、DMF的峰面積。以檢測物的峰面積（Y）為縱坐標，濃度（X）為橫坐標進行線性回歸?；貧w方程分別為： 甲苯：Y =1.1643X-4.9325，r=0.9995；DMF Y=0.3326X-18.019 r=0.9992。根據試驗結果計算表明：在17.6～176μg /ml的范圍內甲苯和DMF的線性關系良好。

3.4 檢測限試驗

分別取甲苯和DMF對照品儲備溶液采用逐步稀釋法，調節(jié)檢測限試夜?jié)舛?，使峰高為基線噪音的3倍左右。結果最小檢測濃度甲苯為0.3731μg/ml，DMF為2.3326μg /ml 。

3.5 回收率試驗

精密稱取140501批托芬那酸1.0g置于10ml頂空瓶中，平行操作10份，向瓶中分別加入1ml空白溶劑DMSO（1份），線性試驗下對照0.8ml、1.0ml、1.5ml溶液各1ml平行3份（共9份），加蓋搖勻溶解后經頂空進樣分析，甲苯的平均回收率=97.5% RSD=0.4%（n=9），DMF的平均回收率=98.8% RSD=0.8% （n=9）。根據試驗結果表明：此方法檢測甲苯和DMF的回收率都在規(guī)定的范圍內，證明本法具有較好的準確性。

3.6 樣品檢測

取DMSO空白溶液、對照品溶液和3批供試品溶液，經頂空進樣分析，按外標法計算樣品中甲苯和DMF的殘留量。140501、140502和140503的3批托芬那酸產品殘留溶劑均符合要求（甲苯均未檢出；DMF140501=0.0242%；DMF140502=0.0186%；DMF140501=0.0215%）。

結語

托芬那酸中殘留溶劑是指在合成和精制過程中使用的揮發(fā)性有機化學物質，在實際的生產中未能完全被清除。根據中國藥典2010版二部殘留溶劑測定法附表1的要求，甲苯的殘留限度0.089%，DMF的殘留限度為0.088%。本方法用頂空進樣技術分析托芬那酸中殘留的甲苯和DMF，要求精密度RSD≤10%，相關物質的分離度＞1.5，本法連續(xù)進樣6針，各溶劑峰的RSD均小于2%，分離度均大于2%，最低檢測限小于3μg /ml，回收率在98%左右，各項指標均符合中國藥典的要求。故本方法適用于托芬那酸中殘留溶劑的定量分析。

[1]European Pharmacopoeia， 7.5. 1238.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）[M].中國醫(yī)藥科技出版社，2010.