馬偉
摘要:螺旋藻的正常生長必需一個穩(wěn)定且適合的pH環(huán)境,溶液中各離子濃度、離子的解離度、總鹽度、溫度和CO2都影響著溶液pH值,本文將著重說明NaHCO3、NH4HCO3、KH2PO4對營養(yǎng)液pH的影響。 關(guān)鍵詞:螺旋藻;pH值;營養(yǎng)液 中圖分類號 : S 969 文獻標(biāo)識碼:A1材料與方法
1.1材料螺旋藻取自青海油田誠信公司時代生物制品廠螺旋藻生產(chǎn)大池。
1.2 試驗方法分別以NaHCO3、NH4HCO3、KH2PO4作為添加劑控制pH值所做的實驗。
2結(jié)果與分析
2.1以NaHCO3為添加劑
NaHCO3在溶液中解離成CO2、HCO3-、CO32-。在培養(yǎng)液中相互轉(zhuǎn)化見以下方程:
H2O+CO2=H++HCO3- (1) HCO3-=H++CO32- (2)
當(dāng)反應(yīng)處于平衡狀態(tài)時,CO2、HCO3-、CO32-三者的濃度分別以[CO2]、[HCO3-]、[CO32-]表示滿足下列數(shù)量關(guān)系。
K1=[H+][HCO3-]/[CO2]K2=[H+][CO32-]/[HCO3-]
隨著細(xì)胞光合作用,CO2和HCO3-被吸收,未被利用的HCO3-解離成H+和CO2。CO32-與H+結(jié)合生成CO2和H2O。方程式都會發(fā)生移動,平衡向左移動使H+減少pH升高。
試驗方法:原營養(yǎng)液為NaHCO3:5.0g/L、NaNO3:0.8g/L、MgSO4:0.15g/L、KH2PO4:0.3g/L、NH4HCO3:0.2g/L、FeSO4:0.02g/L、 EDTA:0.04g/L。
其中每天加入A:NaHCO3:0.5g/L、B:NaHCO30.3g/L、C:NaHCO3:0.1g/L、D(對照):NaHCO3:0g/L。
2.2以NH4HCO3為添加劑
NH4HCO3在溶液中解離為NH3、NH4+、HCO3-、CO32-、CO2。
其中NH4+=NH3+H+(1)為主要控制機理,以NH4HCO3為控制pH值的添加劑可額外向溶液中提供N源和HCO3-,補充被吸收的碳源同時調(diào)控pH值。
試驗方法:原營養(yǎng)液為NaHCO3:5.0g/L、NaNO3:0.8g/L、MgSO4:0.15g/L、KH2PO4:0.3g/L、NH4HCO3:0.2g/L、FeSO4:0.02g/L、EDTA:0.04g/L。
其中每天向A中加入0.2g/L 的NH4HCO3;B中加入0.4g/L 的NH4HCO3;C中加入0.6g/L 的NH4HCO3;D中加入0.8g/L 的NH4HCO3;E(對照)中加入0 g/L 的NH4HCO3培養(yǎng)一周,其pH的變化情況如圖1所示。
NH4HCO3對pH值的影響由圖1可以得出:
a 隨時間的推移,pH值不斷增加。從pH 9.11逐漸增加至第三天的pH9.86,超出最適pH值,并繼續(xù)升高,到第八天達(dá)最大值pH 11.09。
b加入不同劑量的pH值曲線在三天后都在對照組之下,說明添加NH4HCO3能降低營養(yǎng)液pH值。加入量越大則pH值越低,A、B和C的加入劑量低所以pH在第六天開始超出螺旋藻所需最適pH值,D則從開始進入直至結(jié)束都未超出最適范圍。
2.3分析
綜上,幾種控制pH的方法中,適量添加NaHCO3是最好的辦法。
首先,KH2PO4雖然能夠控制營養(yǎng)液pH值,但是由于KH2PO4的生物利用率低,所以造成磷酸的集結(jié)造成絡(luò)合物形成,使螺旋藻藻粉灰分增加。所以KH2PO4不能被利用為pH值控制劑。
其次,NH4HCO3中的NH4+和HCO3-都能被螺旋藻所利用,都能降低pH值,缺點是NH4+濃度不能太大,高濃度NH4+會使藻體中毒死亡,應(yīng)分批次添補少量NH4HCO3。
對于NaHCO3,需要控制營養(yǎng)液pH值,加大NaHCO3補充量,或加大NaHCO3用量。表1為未添補小料,NaHCO3的起始量為10g/L的pH-d圖。
加大培養(yǎng)基中NaHCO3的量同樣能夠控制pH值。同時高濃度的NaHCO3不會形成絡(luò)合物影響螺旋藻藻粉的灰分,且對螺旋藻無毒害作用。
所以適量添加或者加大配方中NaHCO的含量是最好的控制pH值得辦法。
結(jié)語
在螺旋藻的養(yǎng)殖過程中,控制pH值至關(guān)重要。因為pH同諸多因素有關(guān),我們只能大概計算,再通過試驗來測定并指導(dǎo)我們把營養(yǎng)液的pH控制在某個范圍內(nèi)。
這是一個復(fù)雜的長期的實踐過程,所以本文只能簡單的談?wù)勛约旱膶嵙?xí)經(jīng)驗總結(jié)。
參考文獻
[1]胡鴻鈞.螺旋藻生物學(xué)及生物技術(shù)原理[M].北京:科學(xué)出版社,2003.