馬光

乙型肝炎表面抗原膠體金免疫層析法血清快速測定的性能評估

馬光

目的 對膠體金免疫層析法血清快速測定乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的性能研究, 并對此作出評價。方法 對每年9月的室間調查的反饋結果進行描述性分析。結果 通過對490例臨床標本分析, 膠體金免疫層析法檢測靈敏度為5.0 IU/ml, 陽性漏檢是實驗過程中存在的最嚴重的問題。進行膠體金免疫層析法檢測結果和兩種ELISA試劑檢測的結果比較, 一致性較高。結論 采取膠體金免疫層析法和ELISA法對HBsAg檢測的結果一致性都較高, 臨床應用范圍廣, 但膠體金免疫層析法不適用于大批量檢測HBsAg, 因此在進行HBsAg篩選時, 檢測醫(yī)療機構應選擇敏感性較強的試劑。

乙型肝炎表面抗原；膠體金免疫層析法；性能評估

免疫膠體金標記技術做為免疫檢測等領域的一項重要檢測手段, 最大特點是操作方便［1,2］。作者采用膠體金免疫層析法對HBsAg的分析性能進行評價, 比較該方法對乙肝病毒表面抗原的檢測質量。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取市臨床檢驗中心日常檢測標本及本院2009年1月～2013年12月門診和住院患者標本總計490例。通過ELISA對收集到的臨床標本進行HBsAg檢測后, 放-2℃保存待測。

1.2 檢測方法 按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版進行臨床標本處理。

1.3 指標評估 將已知濃度的10 IU/ml HBsAg定值血清,稀釋成 9、8、7、6、5、4、3 IU/ml等不同濃度, 通過20份試紙條檢測出的最高稀釋比例濃度確定檢測靈敏度。通過靈敏度(真陽性率)和特異度(真陰性率), 將實際患病的患者和實際無病的人正確的判為患者和非患者的能力;通過假陰性率(漏診率)和假陽性率(誤診率), 確定患者中檢查為陰性或正常的人數(shù)所占的比例和非患者中檢查為陽性或異常的人數(shù)所占的比例。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用Microsoft Excel軟件對所得靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值等數(shù)據進行處理。

2 結果

2.1 臨床標本檢測評價 490例臨床標本一般特征描述分析后, 進行膠體金免疫層析法檢測結果和兩種ELISA試劑檢測的結果一致性比較, 一致性較高。結果不一致的樣本有14例, 見表1。

表1 膠體金免疫層析法檢測結果和兩種ELISA試劑檢測的結果一致性比較

2.2 中和確認試驗 對14例檢測結果不一致的標本繼續(xù)做中和確認試驗。從14個標本中和確認實驗結果中發(fā)現(xiàn), B試劑(S/N)值均＞1.5, NEUT(%)值＞50%, 故確認試驗結果均為陽性。

3 討論

HBsAg是病毒血清學標志物, 常出現(xiàn)在在血液中［3,4］。結合我國乙肝病毒感染在人們生活中發(fā)病率與感染率都非常高的現(xiàn)狀, 在對患者進行檢測時, 使用靈敏度和特異度均高但又成本低的檢測方法, 可以減小對患者造成的傷害。本研究對膠體金免疫層析法考核系統(tǒng)作進一步評價, 考核試劑的實際靈敏度為5 IU/ml , 膠體金免疫層析法檢測的最大長處是快速、方便, 但由于膠體金顯色需要較高濃度的標記物, 故其靈敏度會受到一定限制［5］。

綜上所述, 膠體金免疫層析法在臨床的推廣應用具有簡便、快速、特異性高, 試劑穩(wěn)定, 隨到隨測, 儀器設備簡便等優(yōu)點, 通過實驗發(fā)現(xiàn)陰性結果的基數(shù)較大, 兩種檢測結果的一致性會隨標本的檢測量增大而增大, 高濃度膠體金試紙的檢測會因為特異性和單一性的出現(xiàn)使檢測結果出現(xiàn)差異。ELISA檢測的一致性高于膠體金免疫層析法, 膠體金免疫層析法測試紙的特異性較強, 但其HBV-M試劑靈敏度明顯低于酶聯(lián)免疫吸附法。在快速檢測的情況下, 對敏感度的要求也較高。臨床應用證明, 膠體金免疫層析法測試能夠為乙型流感病毒感染引起疾病的臨床早期檢測、診斷和治療提供重要依據。但膠體金免疫層析法不適用于大批量檢測HBsAg,因此在進行HBsAg篩選時, 檢測醫(yī)療機構應選擇敏感性較強的試劑。

［1］ 張茂海, 吳建業(yè), 陸玲娜, 等.膠體金與酶聯(lián)免疫法檢測乙肝表面抗原結果分析.中國醫(yī)學創(chuàng)新, 2011, 9(32):14.

［2］ 李伶俐, 孫俊聰.400例乙肝表面抗原膠體金試紙條與ELISA法檢測結果分析.中國醫(yī)學創(chuàng)新, 2011, 9(28):35-36.

［3］ 康鳳芝.測定乙肝表面抗原(HBs-Ag)酶聯(lián)免疫法與膠體金免疫層析法的臨床比較分析.中國民族民間醫(yī)藥, 2011(16):106-107.

［4］ 殷飛.ELISA法與GICA法檢測HBSAg方法學評價.醫(yī)藥前沿, 2013(35):44-46.

［5］ 王力達.不同方法檢測乙肝表面抗原的結果分析.臨床輸血與檢驗, 2013(15):42-44.

2014-06-09］

111300 燈塔市中心醫(yī)院檢驗科