陳春麗+李雪+謝湘云+李宏宇+熱娜•卡斯木

摘要:采用乙腈超聲提取,GC-MS法測(cè)定別克參(Erythronium sibiricum)中10種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量?結(jié)果表明,各農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)線(xiàn)性關(guān)系良好,分析結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.79%~4.30%,加樣回收率為75.7%~123.3%?所測(cè)10種有機(jī)氯農(nóng)藥在3批別克參藥材中的含量均在檢測(cè)限以下?該方法前處理方法簡(jiǎn)單?靈敏度高?穩(wěn)定性好,能夠滿(mǎn)足別克參藥材中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)的要求?

關(guān)鍵詞:別克參(Erythronium sibiricum);有機(jī)氯農(nóng)藥殘留;GC-MS

中圖分類(lèi)號(hào):O657.63文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):0439-8114(2014)11-2647-03

Rapid Determination of Organochlorine Pesticide Residues in Erythronium sibiricum

by GC-MS

CHEN Chun-li1,LI-Xue2,XIE Xiang-yun1,LI Hong-yu2,Renakasimu1

(1.Pharmacy College of Xinjiang Medical University,Urumqi 830011,China;

2.Xinjiang Agricultural Product Quality Safety Supervision and Inspection Center, Urumqi 830049, China)

Abstract:To establish a method for rapid determination of organochlorine pesticide residues in Erythronium sibiricum, the samples were ultrasonically extracted with acetonitrile and determined by GC-MS. Satisfactory linearities for 10 pesticides were obtained with the precision of measurement ranging from 1.79% to 4.30%. The recoveries of detection were ranged from 75.7% to 123.3%. Erythronium sibiricum samples did not contain any organochlorine pesticide residues. The established method was simple, stable and sensitive, which could satisfy the need for rapidly determing of organochlorine pesticide residues.

Key words:Erythronium sibiricum;organochlorine pesticide residues;GC-MS

基金項(xiàng)目:新疆維吾爾自治區(qū)科技重大專(zhuān)項(xiàng)(201130105-2)

以六六六(BHC)?滴滴涕(DDT)為代表的有機(jī)氯農(nóng)藥因其高效,廣譜的殺蟲(chóng)特點(diǎn),曾廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn),雖已被世界各國(guó)禁用,但由于其具有半衰期長(zhǎng)?不易降解的特點(diǎn),目前在土壤?農(nóng)產(chǎn)品?中藥材中仍能檢出BHC?DDT?中藥材是我國(guó)醫(yī)藥發(fā)展的物質(zhì)基礎(chǔ),農(nóng)藥殘留是制約中草藥質(zhì)量的因素之一,為了保障中藥材用藥安全,《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》對(duì)有機(jī)氯農(nóng)藥的殘留限量有明確規(guī)定,相關(guān)的檢測(cè)方法研究報(bào)道較多[1-4],但對(duì)別克參中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留研究尚未見(jiàn)報(bào)道?

別克參(Erythronium sibiricum)為百合科豬牙花屬植物新疆豬牙花的干燥肉質(zhì)鱗莖[5,6],產(chǎn)自新疆北部(天山至阿爾泰?福海),生于陰坡?葉緣草叢?林下?灌叢下和亞高山草地上,海拔1 100~2 500 m?藥用部位為鱗莖,性干?微苦,具有滋補(bǔ)?強(qiáng)身?壯體等功效,主治體虛多病,腰膝酸軟?無(wú)力,是新疆哈薩克民族歷史悠久的藥食兩用植物之一?國(guó)內(nèi)外針對(duì)別克參的研究處于起步階段[7-10]?本研究采用GC-MS法分析了別克參中10種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的含量?

1材料與方法

1.1儀器

QP2010型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(日本島津公司),配Rtx-5MS毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);BS-110S型分析天平(北京賽多利斯天平有限公司);KQ-500DE型超聲波提取儀(昆山市超聲儀器有限公司);TDL-5型離心機(jī)(上海隆拓儀器設(shè)備有限公司)?

1.2藥材

別克參藥材3批(2011-2013年藥材各1批),均產(chǎn)于新疆阿勒泰,經(jīng)新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院熱娜?卡斯木教授鑒定為百合科豬牙花屬植物新疆豬牙花的鱗莖?

1.3試劑與標(biāo)準(zhǔn)品

農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品:六六六(α-BHC??茁-BHC?γ-BHC?δ-BHC);DDT(p,p′-DDE?o,p′-DDE?p,p′-DDD?o,p′-DDD?p,p′-DDT);五氯硝基苯(Quitozene),購(gòu)自農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心,濃度均為1 000 mg/L?

乙腈?無(wú)水硫酸鈉?氯化鈉均購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)(分析純);吸附劑C18(50 μm,60 ?魡),PSA(40-60 μm)購(gòu)自天津博納艾杰爾科技有限公司,環(huán)己烷?丙酮購(gòu)自韓國(guó)DUKSAN公司(色譜純)?

2結(jié)果與分析

2.1混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配置

精密量取10種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)溶液各1 mL,置于25 mL容量瓶中,加入環(huán)己烷∶丙酮(7∶3,V/V)混合溶液稀釋,定容至刻度,即得濃度為40 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液?

2.2樣品前處理方法

精確稱(chēng)取別克參藥材粉末2 g,加10 mL乙腈,超聲提取30 min,加入約1.0 g NaCl和0.5 g無(wú)水MgSO4,振搖后4 000 r/min離心,離心后取上清液2 mL,加入MgSO4?C18?PSA各0.5 g,振蕩2 min,離心后取上清液,過(guò)0.2 μm濾膜,待測(cè)?

2.3GC-MS工作條件

離子源EI 200 ℃;檢測(cè)器電壓1 kV;接口溫度300 ℃;載氣為He;柱流量1.5 mL/min;進(jìn)樣口溫度120 ℃保持4.5 min,以80 ℃/min升溫至250 ℃保留27.87 min;柱溫為82 ℃保持5 min,以8 ℃/min升溫至300 ℃保持8 min;進(jìn)樣量為1 μL?

2.4標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)與檢出限

精密吸取一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,加入環(huán)己烷∶丙酮(7∶3,V/V)混合溶液逐級(jí)稀釋,配制成濃度為0.00?0.01?0.05?0.10?0.50?1.00 μg/mL的一系列梯度溶液,按“2.3”條件進(jìn)樣,測(cè)定峰面積,繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn),結(jié)果如表1所示,典型色譜圖如圖1所示?

2.5精密度試驗(yàn)

精密吸取同一濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液,連續(xù)進(jìn)樣6次,以峰面積為指標(biāo)計(jì)算RSD值,結(jié)果見(jiàn)表2? 2.6重復(fù)性試驗(yàn)

精確稱(chēng)取同一批別克參藥材粉末6份,按照“2.2”樣品前處理方法進(jìn)行,考察方法的重復(fù)性?結(jié)果表明,6次測(cè)試結(jié)果完全一致,重復(fù)性良好?

2.7加標(biāo)回收率試驗(yàn)

精密稱(chēng)取同一批別克參藥材粉末9份(表2),加入高?中?低3種濃度的標(biāo)準(zhǔn)混合溶液,每水平各3份,按照“2.2”樣品前處理方法進(jìn)行提取,測(cè)定,計(jì)算各農(nóng)藥的回收率?

2.8含量測(cè)定

精密稱(chēng)取別克參2011-2013年份3批藥材粉末,按照“2.2”樣品前處理方法制備供試品溶液,按“2.3”條件測(cè)定10種農(nóng)藥殘留量?結(jié)果表明,3批別克參藥材中均未檢出有機(jī)氯農(nóng)藥殘留?

3小結(jié)與討論

目前中草藥中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留檢測(cè)中普遍存在的問(wèn)題是前處理步驟繁瑣,本試驗(yàn)采用乙腈超聲提取,GC-MS法測(cè)定別克參中10種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留,前處理簡(jiǎn)單,測(cè)試時(shí)間短,滿(mǎn)足別克參藥材中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留快速測(cè)定的要求?

3批藥材測(cè)試結(jié)果表明,別克參中未檢出待測(cè)農(nóng)藥殘留,這可能與該藥材的生長(zhǎng)環(huán)境有關(guān),別克參主要生長(zhǎng)于海拔1 100~2 500 m的阿勒泰山,人工栽培的較少,多為純天然的野生植物?

參考文獻(xiàn):

[1] 徐曉琴,胡廣林,王小如,等.氣相色譜法在中草藥及其制劑中痕量有機(jī)氯類(lèi)農(nóng)藥殘留分析上的應(yīng)用進(jìn)展[J].分析測(cè)試學(xué)報(bào), 2004,23(7):112-117.

[2] 李慶,鄒巧根.毛細(xì)管氣相色譜法分析西洋參中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量[J].中草藥,2001,32(5):415-416.

[3] 張瀟瀟,陳曉輝,董婷霞,等.固相萃取-毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定黨參?龍膽中15種有機(jī)氯農(nóng)藥的殘留量[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2006,23(13):776-780.

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[5] 中國(guó)科學(xué)院《中國(guó)植物志》編輯委員會(huì).中國(guó)植物志[M].北京: 科學(xué)出版社,2010.

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[7] 古麗江?賈曼拜,何春霞,古麗西拉,等.新疆豬牙花生物學(xué)特征研究[J].新疆林業(yè),2012,29(2):17-19.

[8] 馬智,馬淼,趙紅艷.類(lèi)短命植物新疆豬牙花解剖結(jié)構(gòu)及其生態(tài)適應(yīng)性的研究[J].廣西植物,2012,32(3):304-309.

[9] 古麗江?賈曼拜,古麗西拉?沙菩西,張永帥,等.新疆豬牙花種子生物學(xué)特征研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,44(9):1444-1447.

[10] 古麗江?賈曼拜,古麗西拉?沙菩西.不同光照條件對(duì)新疆豬牙花花粉生活力及柱頭可授性的影響[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2013, 40(36):17543-17546.

2.7加標(biāo)回收率試驗(yàn)

精密稱(chēng)取同一批別克參藥材粉末9份(表2),加入高?中?低3種濃度的標(biāo)準(zhǔn)混合溶液,每水平各3份,按照“2.2”樣品前處理方法進(jìn)行提取,測(cè)定,計(jì)算各農(nóng)藥的回收率?

2.8含量測(cè)定

精密稱(chēng)取別克參2011-2013年份3批藥材粉末,按照“2.2”樣品前處理方法制備供試品溶液,按“2.3”條件測(cè)定10種農(nóng)藥殘留量?結(jié)果表明,3批別克參藥材中均未檢出有機(jī)氯農(nóng)藥殘留?

3小結(jié)與討論

目前中草藥中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留檢測(cè)中普遍存在的問(wèn)題是前處理步驟繁瑣,本試驗(yàn)采用乙腈超聲提取,GC-MS法測(cè)定別克參中10種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留,前處理簡(jiǎn)單,測(cè)試時(shí)間短,滿(mǎn)足別克參藥材中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留快速測(cè)定的要求?

3批藥材測(cè)試結(jié)果表明,別克參中未檢出待測(cè)農(nóng)藥殘留,這可能與該藥材的生長(zhǎng)環(huán)境有關(guān),別克參主要生長(zhǎng)于海拔1 100~2 500 m的阿勒泰山,人工栽培的較少,多為純天然的野生植物?

參考文獻(xiàn):

[1] 徐曉琴,胡廣林,王小如,等.氣相色譜法在中草藥及其制劑中痕量有機(jī)氯類(lèi)農(nóng)藥殘留分析上的應(yīng)用進(jìn)展[J].分析測(cè)試學(xué)報(bào), 2004,23(7):112-117.

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[10] 古麗江?賈曼拜,古麗西拉?沙菩西.不同光照條件對(duì)新疆豬牙花花粉生活力及柱頭可授性的影響[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2013, 40(36):17543-17546.

2.7加標(biāo)回收率試驗(yàn)

精密稱(chēng)取同一批別克參藥材粉末9份(表2),加入高?中?低3種濃度的標(biāo)準(zhǔn)混合溶液,每水平各3份,按照“2.2”樣品前處理方法進(jìn)行提取,測(cè)定,計(jì)算各農(nóng)藥的回收率?

2.8含量測(cè)定

精密稱(chēng)取別克參2011-2013年份3批藥材粉末,按照“2.2”樣品前處理方法制備供試品溶液,按“2.3”條件測(cè)定10種農(nóng)藥殘留量?結(jié)果表明,3批別克參藥材中均未檢出有機(jī)氯農(nóng)藥殘留?

3小結(jié)與討論

目前中草藥中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留檢測(cè)中普遍存在的問(wèn)題是前處理步驟繁瑣,本試驗(yàn)采用乙腈超聲提取,GC-MS法測(cè)定別克參中10種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留,前處理簡(jiǎn)單,測(cè)試時(shí)間短,滿(mǎn)足別克參藥材中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留快速測(cè)定的要求?

3批藥材測(cè)試結(jié)果表明,別克參中未檢出待測(cè)農(nóng)藥殘留,這可能與該藥材的生長(zhǎng)環(huán)境有關(guān),別克參主要生長(zhǎng)于海拔1 100~2 500 m的阿勒泰山,人工栽培的較少,多為純天然的野生植物?

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[4] 封棣,閻正,趙亞奎,等.固相萃取-毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定中草藥及其土壤中多種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量[J].分析實(shí)驗(yàn)室, 2005,24(10):8-12.

[5] 中國(guó)科學(xué)院《中國(guó)植物志》編輯委員會(huì).中國(guó)植物志[M].北京: 科學(xué)出版社,2010.

[6] 蒲瑜.阿爾泰山豬牙花[J].新疆林業(yè),1986,7(8):6.

[7] 古麗江?賈曼拜,何春霞,古麗西拉,等.新疆豬牙花生物學(xué)特征研究[J].新疆林業(yè),2012,29(2):17-19.

[8] 馬智,馬淼,趙紅艷.類(lèi)短命植物新疆豬牙花解剖結(jié)構(gòu)及其生態(tài)適應(yīng)性的研究[J].廣西植物,2012,32(3):304-309.

[9] 古麗江?賈曼拜,古麗西拉?沙菩西,張永帥,等.新疆豬牙花種子生物學(xué)特征研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,44(9):1444-1447.

[10] 古麗江?賈曼拜,古麗西拉?沙菩西.不同光照條件對(duì)新疆豬牙花花粉生活力及柱頭可授性的影響[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2013, 40(36):17543-17546.