賀治洲+尹明+謝振宇+沈建凱+王悅

摘 要 水稻葉色突變體是開(kāi)展光合作用機(jī)理研究的理想材料，還可以作為標(biāo)記性狀在雜交水稻種子生產(chǎn)中發(fā)揮重要作用。轉(zhuǎn)綠型葉色突變體是一種葉色突變后在一定條件下可恢復(fù)綠色的葉色突變類(lèi)型，目前在水稻中已定位了至少36個(gè)轉(zhuǎn)綠型葉色突變基因，其中有8個(gè)基因已被成功克隆。本文綜述轉(zhuǎn)綠型葉色突變體的主要類(lèi)型和特征特性、基因定位與克隆、分子機(jī)理及其作為標(biāo)記性狀在育種上的應(yīng)用情況，以期為水稻轉(zhuǎn)綠型葉色突變體的研究與應(yīng)用提供參考。

關(guān)鍵詞 水稻 ；葉色突變 ；轉(zhuǎn)綠 ；分子機(jī)理 ；育種應(yīng)用

分類(lèi)號(hào) S511

Research Advances on Green Revertible Leaf-color Mutants in Rice

HE Zhizhou1） YIN Ming1） XIE Zhenyu1） SHEN Jiankai1） WANG Yue2）

（1 Tropical Crops Genetic Resources Institute， CATAS， Danzhou， Hainan 571737， China

2 College of Agronomy， Hunan Agricultural University， Changsha， Hunan， 410128， China）

Abstract Rice leaf color mutants are ideal materials for studying the mechanism of photosynthesis； it also can be used as the marker trait plays an important role in hybrid rice seed production and purity identification. Green revertible leaf-color mutant is a kind of mutant that leaves could turn green under certain conditions. At present， at least 36 green revertible leaf-color mutant genes have been mapped to chromosomes； including 8 genes of them have been cloned successfully. Here， we review the types and characteristics， gene mapping and cloning， molecular mechanism of green revertible leaf-color mutants， and its breeding application as a marker trait， in order to provide reference for the future research and application of green revertible leaf-color mutants in rice.

Keywords rice ； leaf-color mutant ； green revertible ； molecular mechanism； breeding application

水稻是最重要的糧食作物之一，其產(chǎn)量的90%～95%來(lái)自葉片葉綠體的光合作用，提高光能利用率是提高水稻產(chǎn)量潛力的重要途徑之一[1-2]。葉色從表型上直接反映了光合作用過(guò)程中光合色素含量與組成的變化情況，利用葉色突變體是開(kāi)展光合作用研究的理想材料，它在植物的光合色素合成、葉綠體結(jié)構(gòu)、功能、分化與發(fā)育等基礎(chǔ)研究中具有重要作用。在水稻育種與生產(chǎn)實(shí)踐中，由于葉色突變具有明顯易于識(shí)別的優(yōu)勢(shì)，作為一種標(biāo)記性狀，在雜交水稻繁殖制種和F1種子純度鑒定中的利用價(jià)值受到廣泛關(guān)注。葉色突變是自然界中比較常見(jiàn)、突變頻率高的突變形式，類(lèi)型非常豐富。1942年Gustaffsson[3]將葉色突變體分為白化、黃化、淺綠、條紋、斑點(diǎn)5大主要類(lèi)型。隨著葉色突變體發(fā)現(xiàn)類(lèi)型的增多，1980年Awan[4]等進(jìn)一步將葉色突變體細(xì)分為白化、黃化、淺綠、條紋、綠白、白翠、黃綠、綠黃8種類(lèi)型。這兩種分類(lèi)方法都是依據(jù)苗期葉色進(jìn)行的靜態(tài)分類(lèi)法，然而很多葉色突變體隨著生長(zhǎng)發(fā)育或者在光溫等環(huán)境因素調(diào)控可出現(xiàn)葉色動(dòng)態(tài)變化的過(guò)程，其中最為常見(jiàn)的是葉色變異后在一定條件下可恢復(fù)綠色的轉(zhuǎn)綠型葉色突變。此類(lèi)葉色突變體特有的葉色變化特征，對(duì)于深入研究水稻葉色變異的分子機(jī)制和應(yīng)用于標(biāo)記性狀水稻新品種選育方面都具有很好的利用價(jià)值。本文綜述水稻轉(zhuǎn)綠型葉色突變體的主要類(lèi)型和特征特性、基因定位與克隆、分子機(jī)理及其作為標(biāo)記性狀在育種上的應(yīng)用情況，以期為水稻轉(zhuǎn)綠型葉色突變體的基礎(chǔ)研究與實(shí)踐應(yīng)用提供參考。

1 水稻轉(zhuǎn)綠型葉色突變體的主要類(lèi)型和特征特性

1.1 水稻轉(zhuǎn)綠型葉色突變體的主要類(lèi)型

從葉色轉(zhuǎn)綠表型來(lái)看，目前發(fā)現(xiàn)并有報(bào)道的主要有白化轉(zhuǎn)綠、黃化轉(zhuǎn)綠、條紋轉(zhuǎn)綠等類(lèi)型；從轉(zhuǎn)綠過(guò)程的調(diào)控類(lèi)型來(lái)看，有生育進(jìn)程調(diào)控型，溫度調(diào)控型，也有的轉(zhuǎn)綠型突變體同時(shí)受到生育進(jìn)程和溫度共同調(diào)控。受生育進(jìn)程調(diào)控的大部分轉(zhuǎn)綠突變體只在生長(zhǎng)發(fā)育的某一時(shí)期表現(xiàn)突變?nèi)~色，主要在苗期（或者生育前期），隨后逐漸轉(zhuǎn)綠，如郭士偉等[5]在水稻品種宜香 B 中發(fā)現(xiàn)的白化轉(zhuǎn)綠自然突變體gra，其在4 葉期前葉片呈黃綠色白化，隨后逐漸變綠，后期葉色與野生型相似。幼苗白化突變體ysa在3葉期以前葉片白化，之后葉片逐漸變綠，到6葉期完全恢復(fù)成綠色[6]。水稻黃綠葉突變體ygl1前期葉片為黃色，中期慢慢轉(zhuǎn)綠，后期葉色接近野生型[7]。也有的轉(zhuǎn)綠突變體前期表現(xiàn)正常、隨后出現(xiàn)階段性的突變?nèi)~色，后期又轉(zhuǎn)綠，如白化轉(zhuǎn)綠突變體gra75，該突變體葉片1～3葉表現(xiàn)綠色，從第4葉開(kāi)始表現(xiàn)白化，到第8葉開(kāi)始轉(zhuǎn)為正常綠色[8]。張向前等[9]也報(bào)道了一個(gè)類(lèi)似的葉色突變體sgra，該突變體幼苗期葉色正常，而6～8葉期以后新生葉白化，隨后白化葉轉(zhuǎn)綠。李育紅等[10]則發(fā)現(xiàn)一個(gè)由移栽等機(jī)械損傷引起的轉(zhuǎn)綠突變體白淮稻7號(hào)，其葉色表型為苗期綠色，移栽后7 d左右突變體葉片呈現(xiàn)白化，移栽后15 d左右，葉片表現(xiàn)正常綠色。Dong等[11]和賀治洲等[12]近期報(bào)道的黃化轉(zhuǎn)綠型葉色突變體則表現(xiàn)為每一個(gè)新生葉片表現(xiàn)黃化，隨后由葉尖向葉基部逐漸轉(zhuǎn)綠，所有葉片都表現(xiàn)為這樣一種黃化轉(zhuǎn)綠的動(dòng)態(tài)發(fā)育過(guò)程。endprint

1.2 水稻轉(zhuǎn)綠型葉色突變體對(duì)溫度的反應(yīng)特性

多數(shù)轉(zhuǎn)綠型葉色突變體的轉(zhuǎn)綠現(xiàn)象與溫度密切相關(guān)，水稻葉色突變體v1[13]和v2[14-15]突變體在20℃條件下出現(xiàn)白化葉片，而在30℃條件下葉片轉(zhuǎn)綠。突變體 W1 在溫度低于20℃時(shí)，葉片均表現(xiàn)白化，在 23℃下呈淡黃色，隨著溫度的升高葉色由淡黃到淡綠，30℃條件下完全轉(zhuǎn)為正常綠色[16]。W17、W25突變體在25 ℃以下，幼葉完全白化，而在30℃以上時(shí)轉(zhuǎn)為淺綠色和正常綠色[17-18]。tsc-1在 23.1、26.1和 30.1℃的梯度下，葉片分別呈現(xiàn)白色、淺綠、綠色的變化過(guò)程[19]。白色條斑葉突變體tws，在28℃條件下，苗期5葉期之前表現(xiàn)為白色條斑葉色，到第5 葉開(kāi)始轉(zhuǎn)為正常。而在28℃以上，葉色均表現(xiàn)綠色[20]。黃化轉(zhuǎn)綠突變體mr21，其在較低溫度（<25.0℃）條件下，幼苗葉色呈黃色，隨著溫度逐漸升高，葉色由黃轉(zhuǎn)綠，其臨界溫度約為27.5℃[21]。還有一種變溫條件下轉(zhuǎn)綠的突變類(lèi)型如v3和st1突變體在恒定20或30℃的條件下出現(xiàn)白葉表型，而30和20℃交替的條件下則轉(zhuǎn)為全綠[22]。

1.3 轉(zhuǎn)綠型葉色突變體的光合特性

葉色變異往往導(dǎo)致光合色素各成分的含量及比例以及葉綠體的超微結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，在轉(zhuǎn)綠突變體中，光合色素含量變化規(guī)律及葉綠體結(jié)構(gòu)通常與葉色表型變化一致。突變體tsl11在20℃下的葉綠素a、b及類(lèi)胡蘿卜素含量與野生型相比下降80%以上，電鏡觀察發(fā)現(xiàn)其葉綠體發(fā)育嚴(yán)重不良，看不到完整的類(lèi)囊體結(jié)構(gòu)，而在32℃下，突變體的葉綠a、葉綠素b和類(lèi)胡蘿卜素含量及葉綠體數(shù)量、 大小，類(lèi)囊體片層結(jié)構(gòu)與野生型無(wú)明顯區(qū)別[23]。白化轉(zhuǎn)綠突變體gra75苗期白化葉的光合色素含量顯著下降，葉肉細(xì)胞發(fā)育不完善，葉綠體數(shù)目減少、形態(tài)發(fā)育不飽滿(mǎn)，類(lèi)囊體片層、基粒極顯著減少，轉(zhuǎn)綠后，葉綠素和類(lèi)胡蘿卜素的含量與野生型差異均不顯著，說(shuō)明轉(zhuǎn)綠葉片的色素合成也隨之恢復(fù)正常[8]。白化轉(zhuǎn)綠突變體hfa-1，二葉期突變體的葉綠素含量和凈光合速率明顯低于野生型，而葉綠素a/葉綠素b比值顯著高于野生型，苗期突變體凈光合速率比野生型減少35.3%，突變體轉(zhuǎn)綠后，二者的葉綠素含量和凈光合速率無(wú)顯著差異[24]。

2 水稻轉(zhuǎn)綠型葉色突變基因的定位與克隆

水稻葉色突變體大都由一對(duì)隱性核基因控制，遺傳行為簡(jiǎn)單，表型容易識(shí)別。近年來(lái)，隨著分子生物學(xué)的快速發(fā)展和分子標(biāo)記技術(shù)的廣泛應(yīng)用，迄今為止有超過(guò)130個(gè)水稻葉色突變基因被定位[25]，其中包括有36個(gè)轉(zhuǎn)綠型葉色突變基因（表1），遍及水稻基因組12 條染色體，白化轉(zhuǎn)綠基因最多，有31個(gè)，黃化轉(zhuǎn)綠基因有5個(gè)，轉(zhuǎn)綠過(guò)程受溫度調(diào)控的有15個(gè)，轉(zhuǎn)綠過(guò)程受生育進(jìn)程調(diào)控的有12個(gè)，轉(zhuǎn)綠過(guò)程受溫度和生育進(jìn)程共同調(diào)控的有9個(gè)；從轉(zhuǎn)綠型葉色突變基因在染色體上的分布情況來(lái)看，第3號(hào)染色體和第11號(hào)染色體上最多，分別有8個(gè)基因。目前已被克隆的36個(gè)水稻葉色突變基因中有8個(gè)轉(zhuǎn)綠型葉色突變基因，主要是與葉綠素生物合成降解和葉綠體發(fā)育相關(guān)的基因，包括6個(gè)白化轉(zhuǎn)綠基因：V1[13]、V2[15]、V3和St1[22]、YSA[6]、hw-1（t）[26]以及2個(gè)黃化轉(zhuǎn)綠基因YGL1[27]、VYL[11]。這些已被克隆的基因及其功能研究，對(duì)于闡明水稻葉色變異的分子機(jī)制、光合色素的生物合成與降解，葉綠體的發(fā)育過(guò)程具有重要意義。

3 水稻轉(zhuǎn)綠型葉色突變的分子機(jī)理

3.1 光合色素的生物合成與降解途徑

植物葉綠素生物合成是一個(gè)非常復(fù)雜的酶促生化反應(yīng)過(guò)程，由20多個(gè)基因編碼的15種酶完成，由于大多數(shù)葉色突變體直接或間接影響葉綠素的合成或降解，導(dǎo)致葉綠素含量和組分發(fā)生變化，從而引起葉色變異。水稻 W1葉色突變體低溫條件下，由于葉綠素合成卟啉原形成部位受阻從而導(dǎo)致白化，當(dāng)溫度高于23℃時(shí)葉綠素合成正常，葉色逐漸轉(zhuǎn)綠[16]。黃化轉(zhuǎn)綠型葉色突變體ygl1中苗期葉綠素合酶的活性下降明顯，葉綠素合成途徑中的ALA和四吡咯化合物中間體積累均有明顯增加，導(dǎo)致葉綠素合成量明顯下降。YGL1基因編碼葉綠素合成酶，催化葉綠素合成過(guò)程中最后一步葉綠素a 的形成，核苷酸序列分析發(fā)現(xiàn)，ygl1與野生型在葉綠素合成酶基因的編碼區(qū)上有單個(gè)堿基差異，由胸腺嘧啶（T）突變?yōu)榘奏ぃ–），造成所編碼的脯氨酸到絲氨酸的改變，導(dǎo)致葉綠素合成酶的活性下降，延遲了葉綠素的合成[27]。類(lèi)胡蘿卜素是植物三大色素之一，主要分為胡蘿卜素和葉黃素，類(lèi)胡蘿卜素既可以吸收光能用于光合作用，又可以保護(hù)葉綠素不受光氧化損害。白化轉(zhuǎn)綠葉色突變基因hw-1（t）編碼含線(xiàn)粒體交替氧化酶 AOX 結(jié)構(gòu)的葉綠體蛋白，通過(guò)參與葉綠體呼吸電子傳遞鏈，調(diào)控類(lèi)胡蘿卜素生物合成途經(jīng)及其次生代謝途徑；hw-1（t）基因的突變抑制了苗期類(lèi)胡蘿卜素合成，類(lèi)胡蘿卜素、植物激素生物合成相關(guān)基因在白化期葉片中表達(dá)量減低[49]。

3.2 葉綠體的形成與發(fā)育途徑

葉綠體是存在于綠色植物葉肉細(xì)胞中進(jìn)行光合作用的一種細(xì)胞器，葉綠體的正常發(fā)育需要編碼葉綠體蛋白的細(xì)胞核基因與編碼自身蛋白的葉綠體基因間的相互協(xié)調(diào)，任何一方基因的突變都可能影響到葉綠體的正常發(fā)育，從而產(chǎn)生葉色變異。白化轉(zhuǎn)綠突變體v1是受溫度調(diào)控的突變體，苗期葉片因葉綠體合成受到抑制而表現(xiàn)白化，V1編碼一個(gè)定位在葉綠體上的蛋白質(zhì)NUS1，NUS1參與了葉綠體RNA 的代謝調(diào)控過(guò)程并促進(jìn)早期葉綠體發(fā)育低溫脅迫下質(zhì)體遺傳系統(tǒng)的建立，在NUS1 缺失的突變體葉片中，葉片發(fā)育早期的葉綠體rRNA積累減少，且低溫下葉綠體的翻譯和轉(zhuǎn)錄能力受到嚴(yán)重抑制[13]。水稻v3和st1突變體的白化轉(zhuǎn)綠表型呈現(xiàn)生長(zhǎng)時(shí)期和溫度特異性，V3和St1分別編碼核糖核酸還原酶RNR的大亞基RNRL1和小亞基RNRS1，RNR調(diào)節(jié)DNA合成和修復(fù)過(guò)程中脫氧核糖核苷酸的形成速率，RNRL1和RNRS1是葉綠素合成過(guò)程中葉綠體DNA復(fù)制所必需。v3和st1突變導(dǎo)致核糖核酸還原酶活性降低后抑制了葉片發(fā)育早期葉綠體的合成，參與葉綠體轉(zhuǎn)錄和翻譯以及光合作用的基因其表達(dá)都發(fā)生了改變，從而出現(xiàn)白化表型[22]。幼苗白化突變體ysa轉(zhuǎn)綠過(guò)程受生育進(jìn)程調(diào)控，YSA編碼一個(gè)含有16個(gè)串聯(lián)PPR基序的三角狀五肽重復(fù)蛋白，PPR蛋白對(duì)調(diào)控植物細(xì)胞器基因的表達(dá)發(fā)揮著重要作用，YSA在水稻幼葉和莖稈中高表達(dá)，并且其表達(dá)受光調(diào)節(jié)，ysa葉色的改變是和葉綠素含量以及葉綠體發(fā)育的變化相關(guān)聯(lián)[6]。全生育期表現(xiàn)黃化轉(zhuǎn)綠的葉色突變體vyl，其新生葉片為萎黃表型，之后自頂端向下逐漸轉(zhuǎn)綠，并伴隨葉綠素含量和葉綠體超微結(jié)構(gòu)的變化，以及葉綠體發(fā)育和光合相關(guān)基因表達(dá)的改變，VYL基因編碼一個(gè)與擬南芥ClpP6亞基同源的蛋白，是葉綠體Clp蛋白酶的亞基之一，在水稻葉綠體生物合成中起重要作用，vyl突變引起預(yù)測(cè)基因產(chǎn)物早期終止、保守催化三分子（絲氨酸-組氨酸-天冬氨酸）和多肽結(jié)合位點(diǎn)的丟失，VYL基因的表達(dá)量與光介導(dǎo)的葉綠體發(fā)育進(jìn)程相關(guān)[11]。endprint

3.3 質(zhì)-核信號(hào)傳導(dǎo)途徑

葉綠體和細(xì)胞核基因組之間的協(xié)調(diào)表達(dá)關(guān)系到葉綠素和葉綠體正常的生物合成，通過(guò)二者之間存在的質(zhì)-核信號(hào)傳導(dǎo)途徑，質(zhì)體的代謝狀態(tài)能影響編碼質(zhì)體蛋白類(lèi)核基因的表達(dá)，核基因產(chǎn)物也可以調(diào)控質(zhì)體基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，葉色變異的產(chǎn)生與質(zhì)-核信號(hào)傳導(dǎo)途徑受阻密切相關(guān)。v2突變體是溫度依賴(lài)型的突變體，在一定的溫度范圍內(nèi)葉片中不含有葉綠體而表現(xiàn)白化，V2編碼一個(gè)定位在質(zhì)體和線(xiàn)粒體上的新型鳥(niǎo)苷酸激酶（GK），GK是鳥(niǎo)嘌呤代謝通路中的關(guān)鍵酶，V2基因在葉片發(fā)育和葉綠體發(fā)育早期行使功能，參與調(diào)節(jié)葉綠體發(fā)育時(shí)期的信號(hào)向細(xì)胞核傳輸，V2突變后喪失質(zhì)體基因的時(shí)期特異表達(dá)性，核基因組編碼的質(zhì)體蛋白表達(dá)被抑制，同時(shí)喪失質(zhì)體蛋白翻譯機(jī)制功能，影響到葉綠體分化，最終使葉綠體發(fā)育不能正常進(jìn)行，導(dǎo)致葉片白化[14-15]。

4 水稻轉(zhuǎn)綠型葉色突變體作為標(biāo)記性狀在育種上的應(yīng)用

葉色突變體由于表型明顯易于識(shí)別，是一種理想的形態(tài)學(xué)標(biāo)記。在雜交水稻育種和生產(chǎn)實(shí)踐中，利用隱性核基因控制的葉色突變材料，可通過(guò)育種手段將葉色標(biāo)記基因?qū)胨救祷騼上挡挥?。在不育系親本繁殖時(shí)，識(shí)別并去除田間非標(biāo)記葉色苗，可確保原種純度；雜交制種時(shí)，識(shí)別并去除母本中非標(biāo)記葉色苗，可有效提高雜交種子純度；對(duì)雜交種子進(jìn)行純度鑒定時(shí)，可將收獲的雜交種子在當(dāng)?shù)匮硖锘驅(qū)嶒?yàn)室播種，因育性波動(dòng)導(dǎo)致不育系自交結(jié)實(shí)的假種子將表現(xiàn)為標(biāo)記性狀葉色，從而可以快速、準(zhǔn)確的鑒定出種子純度，避免種子質(zhì)量問(wèn)題對(duì)大田生產(chǎn)造成損失。目前在水稻育種上得以利用的葉色標(biāo)記不育系主要有標(biāo)記性狀在某一階段表達(dá)和全生育期表達(dá)2種類(lèi)型[12，50-52]。轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記材料大部分都是屬于某一階段表達(dá)型，一般在苗期表達(dá)，后期轉(zhuǎn)綠；由于轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記材料對(duì)不育系的主要農(nóng)藝性狀和產(chǎn)量無(wú)顯著負(fù)效應(yīng)，因此作為標(biāo)記性狀用于解決雜交種子純度問(wèn)題上更具優(yōu)勢(shì)，從而更為育種者所重視和利用。

近年來(lái)，育種家已經(jīng)選育出多個(gè)三系和兩系轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記不育系。舒慶堯等[53]、沈圣泉等[54]和李小林等[55-56]利用300Gy60Co-γ射線(xiàn)輻照保持系龍?zhí)馗、Ⅱ-32B和岡46B干種子、誘發(fā)產(chǎn)生葉色突變株，以獲得的突變株為親本分別與龍?zhí)馗、Ⅱ-32A和岡46A雜交并連續(xù)回交育成帶白化轉(zhuǎn)綠型標(biāo)記三系不育系全龍A和白豐 A，云豐66A和云豐88A，這些三系不育系均表現(xiàn)為苗期第 1～3 葉白化，從第4 葉開(kāi)始逐漸轉(zhuǎn)綠，后期植株完全轉(zhuǎn)為綠色。趙海軍等[42]和盧華金等[57]采用300Gy60Co-γ射線(xiàn)輻照培矮64S，吳偉等[58]利用5Gy60Co-γ射線(xiàn)離體誘變廣占 63S干種子，誘變后代選擇葉色突變株結(jié)合多代系統(tǒng)選育，分別育成攜帶白化轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記的兩系不育系玉兔S、楠豐8S和NHR111S。玉兔S和NHR111S的第1～3 幼葉白化，第4葉開(kāi)始轉(zhuǎn)綠，第6 葉恢復(fù)至正常綠色；楠豐8S幼苗期第1～4葉邊緣帶白化轉(zhuǎn)綠葉色標(biāo)記，第5葉后轉(zhuǎn)為正常。這些不育系轉(zhuǎn)綠前由于葉片白化，生長(zhǎng)勢(shì)弱小，但轉(zhuǎn)綠后的主要農(nóng)藝性狀、育性特征和配合力與原不育系相似，攜帶的白化轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記應(yīng)用于雜交稻生產(chǎn)可實(shí)現(xiàn)高效排假，在提高不育系繁制種純度，苗期快速鑒別雜交種子純度方面具有很好的效果。

上述選育成的轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記不育系具有的共同特點(diǎn)是幼苗期白化，4葉期左右開(kāi)始轉(zhuǎn)綠，隨后整個(gè)植株逐漸恢復(fù)至正常綠色，由于其標(biāo)記葉色只在苗期表達(dá)，對(duì)于繁殖制種田塊中的落粒谷等后期出現(xiàn)的雜株無(wú)標(biāo)記效用，因此具有一定的應(yīng)用局限性。賀治洲等[12]利用秈稻保持系材料選育后代中獲得一個(gè)轉(zhuǎn)綠型新葉黃化自然突變體為標(biāo)記基因來(lái)源，首次育成一個(gè)全生育期表達(dá)轉(zhuǎn)綠特性的葉色標(biāo)記三系不育系熱農(nóng)1A，與上述轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記不育系不同，更具特色和利用價(jià)值，該不育系全生育期每一片葉都經(jīng)歷幼葉黃化，隨后從葉尖向葉基部由黃轉(zhuǎn)綠的動(dòng)態(tài)發(fā)育過(guò)程，前期葉片完全轉(zhuǎn)綠后，后期的新生葉片依然表現(xiàn)由黃轉(zhuǎn)綠的葉色變化，有趣的是綠葉和黃葉可在同一植株上同時(shí)出現(xiàn)，有利于前后期都有效發(fā)揮其標(biāo)記作用；此外由于熱農(nóng)1A單個(gè)葉片都只在其發(fā)育前期（未展開(kāi)葉和幼葉）表現(xiàn)黃化，隨后轉(zhuǎn)綠，對(duì)整個(gè)植株的光合作用影響小，植株能夠完全正常生長(zhǎng)發(fā)育，因此是一種新的理想型水稻葉色標(biāo)記不育系。

5 問(wèn)題與展望

水稻葉色突變體由于相關(guān)基因的突變使光合色素代謝系統(tǒng)中某種酶活性改變或葉綠體發(fā)育受阻，以及相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯水平降低，導(dǎo)致光合色素形成受阻或降解緩慢，從而產(chǎn)生豐富多樣的葉色變異。近年來(lái)，隨著水稻功能基因組學(xué)的快速發(fā)展，多個(gè)葉色突變基因被克隆和功能鑒定，并已從葉綠素代謝和葉綠體發(fā)育以及核-質(zhì)信號(hào)傳導(dǎo)等途徑初步闡述了相關(guān)的分子機(jī)理，但對(duì)于轉(zhuǎn)綠型葉色突變基因目前還只有少數(shù)幾個(gè)被克隆，其特有的葉色變化過(guò)程和調(diào)控機(jī)制還遠(yuǎn)未闡明。在雜交水稻的生產(chǎn)與應(yīng)用中普遍存在不育系育性受環(huán)境影響表達(dá)不穩(wěn)定的問(wèn)題，嚴(yán)重影響種子生產(chǎn)的安全性，給制種和大田生產(chǎn)帶來(lái)重大損失[50，56，59]。利用葉色標(biāo)記可有效提高種子生產(chǎn)過(guò)程中的除雜效率，快速準(zhǔn)確鑒定雜交種子的純度，但由于葉色突變基因直接或間接影響葉綠素的代謝和葉綠體的發(fā)育，導(dǎo)致光合效率下降，影響農(nóng)藝性狀和產(chǎn)量性狀，嚴(yán)重時(shí)甚至導(dǎo)致植株死亡[60-61]，大部分葉色突變體難以在育種上直接利用。轉(zhuǎn)綠型葉色突變性狀具有階段性特異表達(dá)、葉色轉(zhuǎn)綠后對(duì)主要農(nóng)藝性狀影響小等優(yōu)點(diǎn)，因此作為標(biāo)記性狀應(yīng)用于雜交育種和種子生產(chǎn)等方面尤具優(yōu)勢(shì)。進(jìn)一步發(fā)掘和鑒定新的轉(zhuǎn)綠型葉色突變基因，加強(qiáng)實(shí)用轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記不育系的選育，有助于深入揭示水稻葉色變異的分子機(jī)理和促進(jìn)轉(zhuǎn)綠型葉色突變體更加有效的應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐。

參考文獻(xiàn)

[1] Von Caemmerer S， Quick W P， Furbank R T， et al. The development of C4 rice： current progress and future challenges[J]. Science， 2012， 336（6089）： 1 671-1 672.endprint

[2] Khush G S. Strategies for increasing the yield potential of cereals： case of rice as an example [J]. Plant Breeding， 2013， 132： 433-436.

[3] Gustafssona. The plastid development in various types of chlorophyll mutations [J]. Hereditas， 1942， 28： 483-492.

[4] Awan M A， Konzak C F， Rutger J N， et al. Mutagenic effect of sodium azide in rice[J]. Crop Science， 1980， 20： 663-668.

[5] 郭士偉，王永飛，馬三梅，等. 一個(gè)水稻葉片白化轉(zhuǎn)綠葉突變體的遺傳分析和基因定位[J]. 中國(guó)水稻科學(xué)，2011，25（1）：95-98.

[6] Su N， Hu M L， Wu D X， et al. Disruption of a rice pentatricopeptide repeat protein causes a seedling-specific albino phenotype and its utilization to enhance seed purity in hybrid rice production[J]. Plant Physiology， 2012， 159（1）： 227-238.

[7] 吳自明，張 欣，萬(wàn)建民. 水稻黃綠葉基因的克隆及應(yīng)用[J]. 生命科學(xué)，2007，19（6）：614-615.

[8] 王平榮，王 兵，孫小秋，等. 水稻白化轉(zhuǎn)綠基因gra75的精細(xì)定位和生理特性分析[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，46（2）：225-232.

[9] 張向前，李曉燕，朱海濤，等. 水稻階段性返白突變體的鑒定和候選基因分析[J]. 科學(xué)通報(bào)，2010，55（23）：2 296-2 301.

[10] 李育紅，王寶和，戴正元，等. 一個(gè)水稻新型葉色突變體的形態(tài)結(jié)構(gòu)和遺傳定位[J]. 中國(guó)水稻科學(xué)，2011，25（6）：587-593.

[11] Dong H， Fei G L， Wu C Y， et al. A rice virescent-yellow leaf mutant reveals new insights into the role and assembly of plastid caseinolytic protease in higher plants [J]. Plant Physiology， 2013， 162（4）： 1 867-1 880.

[12] 賀治洲，尹 明，謝振宇，等. 水稻新型黃化轉(zhuǎn)綠葉色突變體的遺傳分析與育種利用[J]. 熱帶作物學(xué)報(bào)， 2013， 34（11）：2 145-2 149.

[13] Kusumi K， Sakata C， Nakamura T， et al. A plastid protein NUS1is essential for build-up of the genetic system for early chloroplast development under cold stress conditions [J]. Plant Journal， 2011， 68（6）： 1 039-1 050.

[14] Sugimoto H， Kusumi K， Tozawa Y， et al. The virescent-2 mutation inhibits translation of plastid transcripts for the plastid genetic system at an early stage of chloroplast differentiation [J]. Plant and Cell Physiology， 2004， 45（8）： 985-996.

[15] Sugimoto H， Kusumi K， Noguchi K， et al. The rice nuclear gene， VIRESCENT 2， is essential for chloroplast development and encodes a novel type of guanylate kinase targeted to plastids and mitochondria [J]. Plant Journal， 2007， 52（3）： 512-527.

[16] 崔海瑞，夏英武，高明尉. 溫度對(duì)水稻突變體W1葉色及葉綠素生物合成的影響[J]. 核農(nóng)學(xué)報(bào)，2001（3）：269-273.

[17] 舒慶堯，劉貴付，夏英武. 溫敏水稻葉色突變體的研究[J]. 核農(nóng)學(xué)報(bào)，1996，10（1）：6-10.

[18] 吳殿星，舒慶堯，夏英武，等. 一個(gè)新的水稻轉(zhuǎn)綠型白化突變系W25的葉色特征及遺傳[J]. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，1996，8（6）：372-374.

[19] Dong Y， Dong W， Shi S， et al. Identification and genetic analysis of a thermo-sensitive seedling-colour mutant in rice（Oryza sativa L.）[J]. Breeding Science， 2001， 51（1）： 1-4.endprint

[20] 李 超，林冬枝，董彥君，等. 一個(gè)水稻苗期溫敏感白色條斑葉突變體的遺傳分析及基因定位[J]. 中國(guó)水稻科學(xué)，2010，24（3）：223-227.

[21] 陳佳穎，趙 劍，劉 曉，等. 一個(gè)新水稻溫敏感葉色突變體的遺傳分析及其基因分子定位[J]. 植物學(xué)報(bào)， 2010，45（4）：419-425.

[22] Yoo S C， Cho S H， Sugimoto H， et al. Rice virescent3 and stripe1 encoding the large and small subunits of ribonucleotide reductase are required for chloroplast biogenesis during early leaf development[J]. Plant Physiology， 2009， 150（1）： 388-401.

[23] 江少華，周 華，林冬枝，等. 水稻幼苗葉色溫敏感突變體的鑒定及其基因定位[J]. 中國(guó)水稻科學(xué)，2013，27（4）：359-364.

[24] 郭 濤，黃永相，黃 宜，等. 一個(gè)控制水稻葉色白化轉(zhuǎn)綠及多分蘗矮稈基因hw-1（t）的鑒定[J]. 作物學(xué)報(bào)，2012，38（1）：23-25.

[25] 鄧曉娟，張海清，王 悅，等. 水稻葉色突變基因研究進(jìn)展[J]. 雜交水稻，2012，25（5）：9-14.

[26] 郭 濤，黃永相，黃 宜，等. 水稻葉色白化轉(zhuǎn)綠及多分蘗矮稈基因hw-1（t）的圖位克隆[J]. 作物學(xué)報(bào)2012，38（8）：1 397-1 406.

[27] Wu Z M， Zhang X， He B， et al. A chlorophyll-deficient rice mutant with impaired chlorophyllide esterification in chlorophyll biosynthesis [J]. Plant Physiology， 2007， 145（1）： 29-40.

[28] Gan S， Amasino R M. Inhibition of leaf senescence by autoregulated production of cytokinin[J]. Science，1995， 270（5244）： 1 986-1 988.

[29] Chen T， Zhang Y D， Zhao L， et al. Fine mapping and candidate gene analysis of a green-revertible albino gene gra（t） in rice[J]. Journal of Genetics and Genomics， 2009， 36（2）： 117-123.

[30] Nagata N， Tanaka R， Satoh S， et al. Identification of a vinyl reductase gene for chlorophyll synthesis in Arabidopsis thaliana and implications for the evolution of Prochlorococcus species[J]. Plant Cell， 2005， 17（1）： 233-240.

[31] Jeon J S， Lee S， Jung K H， et al. T-DNA insertional mutagenesis for functional genomics in rice[J]. Plant Journal. 2000， 22（6）： 561-570.

[32] Sang X C， Fang L K， Vanichpakorn Y， et al. Physiological character and molecular mapping of leaf-color mutant wyv1 in rice （Oryza sativa L.） [J]. Genes and Genomics， 2010， 32（2）： 123-128.

[33] 楊 潔. 一個(gè)水稻白苗復(fù)綠性狀的遺傳特性和基因定位研究[D]. 武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2008.

[34] Ryu C H， You J H， Kang H G， et al. Generation of T-DNA tagging lines with a bidirectional gene trap vector and the establishment of an insertion-site database[J]. Plant Mol Biol， 2004， 54（4）： 489-502.

[35] 王 軍，楊 杰，陳志德，等. 水稻白化轉(zhuǎn)綠突變體v13（t）的生理特性和基因定位[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，44（10）：1 973-1 979.

[36] 王培培. 一個(gè)水稻白化轉(zhuǎn)綠突變體的遺傳特性和基因定位[D]. 南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2010.

[37] Parks B M， Quail P H. Phytochrome-deficient hy1 and hy2 long hypocotyl mutants of Arabidopsis are defective in phytochrome chromophore biosynthesis [J]. Plant Cell， 1991， 3（11）： 1 177-1 186.endprint

[38] 夏九成，王玉平，馬炳田，等. 水稻（Oryza sativa L.）苗期低溫白化突變體al12的超微結(jié)構(gòu)與基因定位[J]. 遺傳學(xué)報(bào)， 2006（12）：1 112-1 119.

[39] 郭 鵬，邵健豐，劉洪家，等. 水稻溫敏黃轉(zhuǎn)綠突變體v5的鑒定和基因定位[J]. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，23（5）：857-861.

[40] 蘭 濤，梁康逕，陳志偉，等. 水稻苗期低溫失綠的遺傳分析及基因定位[J]. 遺傳，2007，29（9）：1 121-1 125.

[41] 鄭加興，覃保祥，邱永福，等. 水稻低溫白化轉(zhuǎn)綠突變系ds93的形態(tài)生理特性及基因定位[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)， 2013，26（3）：843-849.

[42] 趙海軍，吳殿星，舒慶堯，等. 攜帶白化轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記光溫敏核不育系玉兔S的選育及其特征特性[J]. 中國(guó)水稻科學(xué)，2004，18（6）：515-521.

[43] Sallaud C， Gay C， Larmande P， et al. High throughput T-DNA insertion mutagenesis in rice： a first step towards in silico reverse genetics [J]. Plant Journal， 2004， 39（3）： 450-464.

[44] Kim S R， Lee J， Jun S H， et al. Transgene structures in T-DNA-inserted rice plants [J]. Plant Mol Biol. 2003， 52（4）： 761-773.

[45] 張 毅，呂 俊，李云峰，等. 水稻白化轉(zhuǎn)綠基因?qū)r(nóng)藝性狀和外觀米質(zhì)的影響[J]. 作物學(xué)報(bào)，2008，34（2）： 284-289.

[46] 鄭 靜. 一份水稻白化突變體的遺傳分析與基因定位[D]. 成都：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2008.

[47] 李瑞清. 水稻白化轉(zhuǎn)綠突變體G9的特性分析和基因定位研究[D]. 合肥：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2010.

[48] 董彥君，林冬枝，梅 杰，等. 一個(gè)水稻溫度敏感失綠突變體的遺傳分析及分子定位[J]. 分子植物育種，2013，11（1）：1-7.

[49] 郭 濤，黃永相，羅文龍，等. 水稻葉色白化轉(zhuǎn)綠及多分蘗矮稈基因hfa-1的基因表達(dá)譜分析[J]. 作物學(xué)報(bào)，2013，39（12）：2 123-2 134.

[50] 宋克堡，宋澤觀. 水稻淡黃葉突變體安農(nóng)標(biāo)810S的發(fā)現(xiàn)及初步研究[J]. 雜交水稻，2007，22（6）：71-73.

[51] 劉國(guó)民，高必軍，文紹山，等. 具有黃綠葉標(biāo)記的香型秈稻不育系選育研究[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，43（4）：855-861.

[52] 羅治靖，沈衛(wèi)平，陳明姣，等. 淡黃葉優(yōu)質(zhì)粳稻不育系金匯A的選育[J]. 雜交水稻，2013，28（3）：12-14.

[53] 舒慶堯，陳善福，吳殿星，等. 新型不育系全龍A的選育與研究[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2001，34（4）：349-354.

[54] 沈圣泉，舒慶堯，吳殿星，等. 白化轉(zhuǎn)綠型水稻三系不育系白豐A的選育[J]. 雜交水稻，2005，20（5）：10-11.

[55] 李小林，鄧安鳳，鄧君浪，等. 水稻苗期白化轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記秈型不育系“云豐66A”的選育[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，24（2）：410-413.

[56] 李小林，鄧安鳳，徐雨然，等. 水稻葉緣白化葉色標(biāo)記三系不育系云豐88A的選育[J]. 種子，2011，30（12）：109-111.

[57] 盧華金，楊文清，樓 玨，等. 幼苗期帶白化轉(zhuǎn)綠葉色標(biāo)記的水稻光溫敏核不育系楠豐8S的選育[J]. 雜交水稻，2012，27（1）：16-18.

[58] 吳 偉，劉 鑫，舒小麗，等. 攜帶白化轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記兩系雜交水稻不育系NHR111S[J]. 核農(nóng)學(xué)報(bào)，2006，20（2）：103-105.

[59] 陳立云. 兩系法雜交水稻研究[M]. 上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2012.

[60] Jung K H， Hur J， Ryu C H， et al. Characterization of a rice chlorophyll-deficient mutant using the T-DNA gene-trap system[J]. Plant Cell Physiol， 2003， 44（5）： 463-472.

[61] Gu C， Yu R B， Ning L. EGY1 encodes a membrane-associated and ATP-independent metalloprotease that is required for chloroplast development [J]. Plant Journal， 2005， 41（3）： 364-375.endprint

[38] 夏九成，王玉平，馬炳田，等. 水稻（Oryza sativa L.）苗期低溫白化突變體al12的超微結(jié)構(gòu)與基因定位[J]. 遺傳學(xué)報(bào)， 2006（12）：1 112-1 119.

[39] 郭 鵬，邵健豐，劉洪家，等. 水稻溫敏黃轉(zhuǎn)綠突變體v5的鑒定和基因定位[J]. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，23（5）：857-861.

[40] 蘭 濤，梁康逕，陳志偉，等. 水稻苗期低溫失綠的遺傳分析及基因定位[J]. 遺傳，2007，29（9）：1 121-1 125.

[41] 鄭加興，覃保祥，邱永福，等. 水稻低溫白化轉(zhuǎn)綠突變系ds93的形態(tài)生理特性及基因定位[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)， 2013，26（3）：843-849.

[42] 趙海軍，吳殿星，舒慶堯，等. 攜帶白化轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記光溫敏核不育系玉兔S的選育及其特征特性[J]. 中國(guó)水稻科學(xué)，2004，18（6）：515-521.

[43] Sallaud C， Gay C， Larmande P， et al. High throughput T-DNA insertion mutagenesis in rice： a first step towards in silico reverse genetics [J]. Plant Journal， 2004， 39（3）： 450-464.

[44] Kim S R， Lee J， Jun S H， et al. Transgene structures in T-DNA-inserted rice plants [J]. Plant Mol Biol. 2003， 52（4）： 761-773.

[45] 張 毅，呂 俊，李云峰，等. 水稻白化轉(zhuǎn)綠基因?qū)r(nóng)藝性狀和外觀米質(zhì)的影響[J]. 作物學(xué)報(bào)，2008，34（2）： 284-289.

[46] 鄭 靜. 一份水稻白化突變體的遺傳分析與基因定位[D]. 成都：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2008.

[47] 李瑞清. 水稻白化轉(zhuǎn)綠突變體G9的特性分析和基因定位研究[D]. 合肥：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2010.

[48] 董彥君，林冬枝，梅 杰，等. 一個(gè)水稻溫度敏感失綠突變體的遺傳分析及分子定位[J]. 分子植物育種，2013，11（1）：1-7.

[49] 郭 濤，黃永相，羅文龍，等. 水稻葉色白化轉(zhuǎn)綠及多分蘗矮稈基因hfa-1的基因表達(dá)譜分析[J]. 作物學(xué)報(bào)，2013，39（12）：2 123-2 134.

[50] 宋克堡，宋澤觀. 水稻淡黃葉突變體安農(nóng)標(biāo)810S的發(fā)現(xiàn)及初步研究[J]. 雜交水稻，2007，22（6）：71-73.

[51] 劉國(guó)民，高必軍，文紹山，等. 具有黃綠葉標(biāo)記的香型秈稻不育系選育研究[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，43（4）：855-861.

[52] 羅治靖，沈衛(wèi)平，陳明姣，等. 淡黃葉優(yōu)質(zhì)粳稻不育系金匯A的選育[J]. 雜交水稻，2013，28（3）：12-14.

[53] 舒慶堯，陳善福，吳殿星，等. 新型不育系全龍A的選育與研究[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2001，34（4）：349-354.

[54] 沈圣泉，舒慶堯，吳殿星，等. 白化轉(zhuǎn)綠型水稻三系不育系白豐A的選育[J]. 雜交水稻，2005，20（5）：10-11.

[55] 李小林，鄧安鳳，鄧君浪，等. 水稻苗期白化轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記秈型不育系“云豐66A”的選育[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，24（2）：410-413.

[56] 李小林，鄧安鳳，徐雨然，等. 水稻葉緣白化葉色標(biāo)記三系不育系云豐88A的選育[J]. 種子，2011，30（12）：109-111.

[57] 盧華金，楊文清，樓 玨，等. 幼苗期帶白化轉(zhuǎn)綠葉色標(biāo)記的水稻光溫敏核不育系楠豐8S的選育[J]. 雜交水稻，2012，27（1）：16-18.

[58] 吳 偉，劉 鑫，舒小麗，等. 攜帶白化轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記兩系雜交水稻不育系NHR111S[J]. 核農(nóng)學(xué)報(bào)，2006，20（2）：103-105.

[59] 陳立云. 兩系法雜交水稻研究[M]. 上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2012.

[60] Jung K H， Hur J， Ryu C H， et al. Characterization of a rice chlorophyll-deficient mutant using the T-DNA gene-trap system[J]. Plant Cell Physiol， 2003， 44（5）： 463-472.

[61] Gu C， Yu R B， Ning L. EGY1 encodes a membrane-associated and ATP-independent metalloprotease that is required for chloroplast development [J]. Plant Journal， 2005， 41（3）： 364-375.endprint

[38] 夏九成，王玉平，馬炳田，等. 水稻（Oryza sativa L.）苗期低溫白化突變體al12的超微結(jié)構(gòu)與基因定位[J]. 遺傳學(xué)報(bào)， 2006（12）：1 112-1 119.

[39] 郭 鵬，邵健豐，劉洪家，等. 水稻溫敏黃轉(zhuǎn)綠突變體v5的鑒定和基因定位[J]. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，23（5）：857-861.

[40] 蘭 濤，梁康逕，陳志偉，等. 水稻苗期低溫失綠的遺傳分析及基因定位[J]. 遺傳，2007，29（9）：1 121-1 125.

[41] 鄭加興，覃保祥，邱永福，等. 水稻低溫白化轉(zhuǎn)綠突變系ds93的形態(tài)生理特性及基因定位[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)， 2013，26（3）：843-849.

[42] 趙海軍，吳殿星，舒慶堯，等. 攜帶白化轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記光溫敏核不育系玉兔S的選育及其特征特性[J]. 中國(guó)水稻科學(xué)，2004，18（6）：515-521.

[43] Sallaud C， Gay C， Larmande P， et al. High throughput T-DNA insertion mutagenesis in rice： a first step towards in silico reverse genetics [J]. Plant Journal， 2004， 39（3）： 450-464.

[44] Kim S R， Lee J， Jun S H， et al. Transgene structures in T-DNA-inserted rice plants [J]. Plant Mol Biol. 2003， 52（4）： 761-773.

[45] 張 毅，呂 俊，李云峰，等. 水稻白化轉(zhuǎn)綠基因?qū)r(nóng)藝性狀和外觀米質(zhì)的影響[J]. 作物學(xué)報(bào)，2008，34（2）： 284-289.

[46] 鄭 靜. 一份水稻白化突變體的遺傳分析與基因定位[D]. 成都：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2008.

[47] 李瑞清. 水稻白化轉(zhuǎn)綠突變體G9的特性分析和基因定位研究[D]. 合肥：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2010.

[48] 董彥君，林冬枝，梅 杰，等. 一個(gè)水稻溫度敏感失綠突變體的遺傳分析及分子定位[J]. 分子植物育種，2013，11（1）：1-7.

[49] 郭 濤，黃永相，羅文龍，等. 水稻葉色白化轉(zhuǎn)綠及多分蘗矮稈基因hfa-1的基因表達(dá)譜分析[J]. 作物學(xué)報(bào)，2013，39（12）：2 123-2 134.

[50] 宋克堡，宋澤觀. 水稻淡黃葉突變體安農(nóng)標(biāo)810S的發(fā)現(xiàn)及初步研究[J]. 雜交水稻，2007，22（6）：71-73.

[51] 劉國(guó)民，高必軍，文紹山，等. 具有黃綠葉標(biāo)記的香型秈稻不育系選育研究[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，43（4）：855-861.

[52] 羅治靖，沈衛(wèi)平，陳明姣，等. 淡黃葉優(yōu)質(zhì)粳稻不育系金匯A的選育[J]. 雜交水稻，2013，28（3）：12-14.

[53] 舒慶堯，陳善福，吳殿星，等. 新型不育系全龍A的選育與研究[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2001，34（4）：349-354.

[54] 沈圣泉，舒慶堯，吳殿星，等. 白化轉(zhuǎn)綠型水稻三系不育系白豐A的選育[J]. 雜交水稻，2005，20（5）：10-11.

[55] 李小林，鄧安鳳，鄧君浪，等. 水稻苗期白化轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記秈型不育系“云豐66A”的選育[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，24（2）：410-413.

[56] 李小林，鄧安鳳，徐雨然，等. 水稻葉緣白化葉色標(biāo)記三系不育系云豐88A的選育[J]. 種子，2011，30（12）：109-111.

[57] 盧華金，楊文清，樓 玨，等. 幼苗期帶白化轉(zhuǎn)綠葉色標(biāo)記的水稻光溫敏核不育系楠豐8S的選育[J]. 雜交水稻，2012，27（1）：16-18.

[58] 吳 偉，劉 鑫，舒小麗，等. 攜帶白化轉(zhuǎn)綠型葉色標(biāo)記兩系雜交水稻不育系NHR111S[J]. 核農(nóng)學(xué)報(bào)，2006，20（2）：103-105.

[59] 陳立云. 兩系法雜交水稻研究[M]. 上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2012.

[60] Jung K H， Hur J， Ryu C H， et al. Characterization of a rice chlorophyll-deficient mutant using the T-DNA gene-trap system[J]. Plant Cell Physiol， 2003， 44（5）： 463-472.

[61] Gu C， Yu R B， Ning L. EGY1 encodes a membrane-associated and ATP-independent metalloprotease that is required for chloroplast development [J]. Plant Journal， 2005， 41（3）： 364-375.endprint