驅(qū)蚊香草組培快繁技術(shù)

摘 要：用帶頂芽的幼嫩莖段作外植體，采用組織培養(yǎng)技術(shù)，篩選驅(qū)蚊香草的最佳快繁方案。試驗表明：誘導(dǎo)分化的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L，繼代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L，成苗的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L，生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方為1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L。

關(guān)鍵詞：驅(qū)蚊香草；組織培養(yǎng)；繁殖

中圖分類號 S567.9 文獻標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731（2014）18-25-02

驅(qū)蚊香草，又名凈蚊香草，屬牻牛兒苗科天竺葵屬的多年生常綠草本植物。最早是荷蘭、法國的生物學(xué)家運用細胞融合技術(shù)，將香茅草中所產(chǎn)生香茅醛的基因轉(zhuǎn)移到天竺葵中培育而成的新型植物，在自然條件下可散發(fā)驅(qū)蚊物質(zhì)香茅醛，達到驅(qū)蚊效果，且具有檸檬香味，由此而得名。驅(qū)蚊香草株型優(yōu)美，氣味芳香，具有生態(tài)驅(qū)蚊、凈化空氣、提神醒腦、抗菌消毒等功效，在歐洲深受歡迎。近幾年來，我國許多大中城市開始引進栽培驅(qū)蚊香草，需求量逐漸增大，但因其花不育，不能結(jié)實，傳統(tǒng)的扦插繁殖方法已遠遠不能滿足市場的需求，而組織培養(yǎng)方法可短期內(nèi)獲得大量的再生植株，解決種苗的供求矛盾。為此，筆者采用組織培養(yǎng)技術(shù)，篩選驅(qū)蚊香草的最佳快繁方案。

1 材料與方法

1.1 取材與處理 從植株上切下帶頂芽的幼嫩莖段，用0.1%的洗衣粉水?dāng)噭悠?0min，自來水沖洗20min，以除去外植體表面附著的灰塵和絕大部分雜菌。無菌條件下用70%的酒精溶液浸泡20s左右，再用0.1%的HgCl2消毒8～10min，無菌水沖洗4次。將消毒好的外植體切段，以帶2個節(jié)間為宜，接種到制備好的培養(yǎng)基上。

1.2 試驗方法 外植體接種在附加不同濃度的6-BA、NAA和IAA等生長調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基中（食用糖3%、瓊脂0.6%、pH值5.5～5.8），溫度25±2℃，連續(xù)14h/d光照條件下培養(yǎng)，30d左右形成芽叢；將芽叢分別分割成含2～3個小芽的小塊進行繼代培養(yǎng)，20d左右形成新的芽叢，再繼代；當(dāng)群體達到所需要的數(shù)量時，將芽叢轉(zhuǎn)接到成苗培養(yǎng)基上；20d左右，當(dāng)苗高長1～2cm時，將無根苗接種到附加不同濃度NAA、IAA和IBA的1/2MS培養(yǎng)基上，15～20d，苗高達2～3cm，且根系發(fā)達時，即可進行煉苗定植。

2 結(jié)果與分析

2.1 叢生芽的誘導(dǎo) 以MS作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，激素濃度配比見表1。外植體接種7d后，3、4、5、6號培養(yǎng)基上的莖段腋芽處出現(xiàn)許多綠點；1、2號培養(yǎng)基上的莖段切口處形成大量愈傷組織，腋芽膨大伸長；7號培養(yǎng)基上的莖段僅腋芽伸長。15d后，3、4、5、6號培養(yǎng)基上的外植體莖節(jié)處分化出大量小芽，形成芽叢；3號培養(yǎng)基上形成的幼芽最多（20個左右），其次為5號；1、2號培養(yǎng)基上外植體形成的愈傷組織逐漸老化，無幼芽分化，膨大伸長的腋芽也逐漸枯死；7號培養(yǎng)基上莖段的腋芽繼續(xù)伸長，無新的幼芽產(chǎn)生。因此，3號培養(yǎng)基，即MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L為誘導(dǎo)分化的最佳培養(yǎng)基。

2.2 繼代培養(yǎng) 將誘導(dǎo)分化20d左右的芽叢分割成含2～3個幼芽的小塊，接種到表1所示的各培養(yǎng)基上，20d后，3、4、5、6、7號培養(yǎng)基上均分化出新的芽叢，其中以5號培養(yǎng)基，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L的配比最佳，繁殖系數(shù)高，且芽體健壯；6、7號培養(yǎng)基上的芽叢繁殖系數(shù)偏低；3、4號培養(yǎng)基雖然也能分出大量芽叢，但芽體多為畸形，逐漸形成水漬狀的玻璃化苗；1、2號培養(yǎng)基上的幼苗基部形成大量愈傷組織，并逐漸枯死。因此，繼代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為5號，即MS+9-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。

2.3 成苗培養(yǎng) 當(dāng)幼芽群體達到需要的數(shù)量時，將芽叢轉(zhuǎn)接到仍以MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成苗培養(yǎng)基（下轉(zhuǎn)34頁）（上接25頁）上進行壯苗培養(yǎng)，激素配比見表2。7d以后，接種到各培養(yǎng)基上的幼芽均有不同程度的伸長生長，其中以10號培養(yǎng)基，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L的配比最為適宜，幼苗生長快而健壯，20d左右苗高達1～2cm，莖部有少量白根產(chǎn)生，并伴有新的幼芽分化，逐漸成苗。因此，成苗培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為10號，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L。

表2 成苗培養(yǎng)基的激素配比（mg/L）

[編號＼&6-BA＼&NAA＼&8

9

10

11

12＼&0.1

0.05

0.05

0.01

0.01＼&0.2

0.1

0.2

0.1

0.2＼&]

2.4 生根培養(yǎng) 將2cm左右高，具有3～4片葉的無根苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)，以1/2MS作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，附加不同濃度的生長素（見表3）。7d后，17號即1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L培養(yǎng)基上的幼苗長出大量白根，15d左右，每棵幼苗基部產(chǎn)生7～10條3cm左右長的根系；而其它激素配比的培養(yǎng)基上，雖幼苗也能長出根系，但發(fā)根慢，數(shù)量少，苗和根的長勢均不如17號培養(yǎng)基上的幼苗。因此，生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為17號，即1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L。

表3 生根培養(yǎng)的激素配比（mg/L）

[編號＼&NAA＼&IBA＼&IAA＼&13

14

15

16

17

18＼&0

0.2

0

0.2

0

0.2＼&0

0

0.2

0.2

0.2

0＼&0

0

0

0

0.2

0.2＼&]

3 煉苗及定植技術(shù)

3.1 煉苗 將2～3cm高、根系發(fā)達的瓶苗取出，沖洗凈根部瓊脂，栽植于以純蛭石為基質(zhì)的煉苗盤中，澆透水后，用800～1 000倍的百菌清藥液澆灌，放在遮光50%的陰棚內(nèi)，加蓋塑料薄膜保濕，溫度控制在15～25℃，7d后逐漸去掉薄膜，成活率達90%以上，15d后即可定植。

3.2 定植 驅(qū)蚊香草為多年生常綠草本植物，只要溫度適宜，一年四季均可定植，以春、秋兩季最適。由于煉苗后的瓶苗仍較弱，應(yīng)先定植于疏松透氣、排水良好的基質(zhì)中。本試驗采用1∶1的腐殖土和蛭石作基質(zhì)，生長過程中，定期噴施適量的尿素和磷酸二氫鉀溶液，苗長至20cm左右高時，再次換盒移栽，并作摘心整形處理。驅(qū)蚊香草最適生長溫度15～25℃，0℃以上的可安全越冬，喜富含有機質(zhì)、排水良好、疏松肥沃、pH值中性的土壤，喜光、喜溫、怕積水。15℃以上即可正常散發(fā)檸檬香味，適當(dāng)向植株噴霧，可使香芽醛物質(zhì)源源不斷地釋放，30片葉以上的植株驅(qū)蚊效果明顯。

4 討論

（1）由于受時間和材料的限制，本試驗的設(shè)計帶有很強的經(jīng)驗性，范圍窄，其結(jié)果可能具有一定的局限性，有待于進一步優(yōu)化、完善。

（2）誘導(dǎo)分化過程中，一些斷裂的葉柄處也能分化出幼芽，說明外植體的取材范圍可擴大，應(yīng)作更深入的試驗研究。

（3）繼代培養(yǎng)基中的6-BA濃度須低于誘導(dǎo)分化的6-BA濃度，可能與材料體內(nèi)6-BA的積累有關(guān)。

（4）誘導(dǎo)分化培養(yǎng)及繼代培養(yǎng)超過25d后，瓶苗葉片開始黃化；生根培養(yǎng)超過20d后，根尖開始變黑，可能與瓶口密閉、材料散發(fā)的醛類物質(zhì)積累濃度過高有關(guān)。

（5）生根培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)，幼苗的發(fā)根對溫度非常敏感，同一培養(yǎng)架的上下層之間差異很大，應(yīng)做更細的試驗，探索其生根的最佳溫度。

（6）對驅(qū)蚊香草的驅(qū)蚊效果還應(yīng)進行更科學(xué)、深入的試驗研究，以便對其價值作更客觀的評價。

（責(zé)編：張宏民）endprint

摘 要：用帶頂芽的幼嫩莖段作外植體，采用組織培養(yǎng)技術(shù)，篩選驅(qū)蚊香草的最佳快繁方案。試驗表明：誘導(dǎo)分化的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L，繼代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L，成苗的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L，生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方為1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L。

關(guān)鍵詞：驅(qū)蚊香草；組織培養(yǎng)；繁殖

中圖分類號 S567.9 文獻標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731（2014）18-25-02

驅(qū)蚊香草，又名凈蚊香草，屬牻牛兒苗科天竺葵屬的多年生常綠草本植物。最早是荷蘭、法國的生物學(xué)家運用細胞融合技術(shù)，將香茅草中所產(chǎn)生香茅醛的基因轉(zhuǎn)移到天竺葵中培育而成的新型植物，在自然條件下可散發(fā)驅(qū)蚊物質(zhì)香茅醛，達到驅(qū)蚊效果，且具有檸檬香味，由此而得名。驅(qū)蚊香草株型優(yōu)美，氣味芳香，具有生態(tài)驅(qū)蚊、凈化空氣、提神醒腦、抗菌消毒等功效，在歐洲深受歡迎。近幾年來，我國許多大中城市開始引進栽培驅(qū)蚊香草，需求量逐漸增大，但因其花不育，不能結(jié)實，傳統(tǒng)的扦插繁殖方法已遠遠不能滿足市場的需求，而組織培養(yǎng)方法可短期內(nèi)獲得大量的再生植株，解決種苗的供求矛盾。為此，筆者采用組織培養(yǎng)技術(shù)，篩選驅(qū)蚊香草的最佳快繁方案。

1 材料與方法

1.1 取材與處理 從植株上切下帶頂芽的幼嫩莖段，用0.1%的洗衣粉水?dāng)噭悠?0min，自來水沖洗20min，以除去外植體表面附著的灰塵和絕大部分雜菌。無菌條件下用70%的酒精溶液浸泡20s左右，再用0.1%的HgCl2消毒8～10min，無菌水沖洗4次。將消毒好的外植體切段，以帶2個節(jié)間為宜，接種到制備好的培養(yǎng)基上。

1.2 試驗方法 外植體接種在附加不同濃度的6-BA、NAA和IAA等生長調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基中（食用糖3%、瓊脂0.6%、pH值5.5～5.8），溫度25±2℃，連續(xù)14h/d光照條件下培養(yǎng)，30d左右形成芽叢；將芽叢分別分割成含2～3個小芽的小塊進行繼代培養(yǎng)，20d左右形成新的芽叢，再繼代；當(dāng)群體達到所需要的數(shù)量時，將芽叢轉(zhuǎn)接到成苗培養(yǎng)基上；20d左右，當(dāng)苗高長1～2cm時，將無根苗接種到附加不同濃度NAA、IAA和IBA的1/2MS培養(yǎng)基上，15～20d，苗高達2～3cm，且根系發(fā)達時，即可進行煉苗定植。

2 結(jié)果與分析

2.1 叢生芽的誘導(dǎo) 以MS作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，激素濃度配比見表1。外植體接種7d后，3、4、5、6號培養(yǎng)基上的莖段腋芽處出現(xiàn)許多綠點；1、2號培養(yǎng)基上的莖段切口處形成大量愈傷組織，腋芽膨大伸長；7號培養(yǎng)基上的莖段僅腋芽伸長。15d后，3、4、5、6號培養(yǎng)基上的外植體莖節(jié)處分化出大量小芽，形成芽叢；3號培養(yǎng)基上形成的幼芽最多（20個左右），其次為5號；1、2號培養(yǎng)基上外植體形成的愈傷組織逐漸老化，無幼芽分化，膨大伸長的腋芽也逐漸枯死；7號培養(yǎng)基上莖段的腋芽繼續(xù)伸長，無新的幼芽產(chǎn)生。因此，3號培養(yǎng)基，即MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L為誘導(dǎo)分化的最佳培養(yǎng)基。

2.2 繼代培養(yǎng) 將誘導(dǎo)分化20d左右的芽叢分割成含2～3個幼芽的小塊，接種到表1所示的各培養(yǎng)基上，20d后，3、4、5、6、7號培養(yǎng)基上均分化出新的芽叢，其中以5號培養(yǎng)基，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L的配比最佳，繁殖系數(shù)高，且芽體健壯；6、7號培養(yǎng)基上的芽叢繁殖系數(shù)偏低；3、4號培養(yǎng)基雖然也能分出大量芽叢，但芽體多為畸形，逐漸形成水漬狀的玻璃化苗；1、2號培養(yǎng)基上的幼苗基部形成大量愈傷組織，并逐漸枯死。因此，繼代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為5號，即MS+9-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。

2.3 成苗培養(yǎng) 當(dāng)幼芽群體達到需要的數(shù)量時，將芽叢轉(zhuǎn)接到仍以MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成苗培養(yǎng)基（下轉(zhuǎn)34頁）（上接25頁）上進行壯苗培養(yǎng)，激素配比見表2。7d以后，接種到各培養(yǎng)基上的幼芽均有不同程度的伸長生長，其中以10號培養(yǎng)基，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L的配比最為適宜，幼苗生長快而健壯，20d左右苗高達1～2cm，莖部有少量白根產(chǎn)生，并伴有新的幼芽分化，逐漸成苗。因此，成苗培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為10號，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L。

表2 成苗培養(yǎng)基的激素配比（mg/L）

[編號＼&6-BA＼&NAA＼&8

9

10

11

12＼&0.1

0.05

0.05

0.01

0.01＼&0.2

0.1

0.2

0.1

0.2＼&]

2.4 生根培養(yǎng) 將2cm左右高，具有3～4片葉的無根苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)，以1/2MS作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，附加不同濃度的生長素（見表3）。7d后，17號即1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L培養(yǎng)基上的幼苗長出大量白根，15d左右，每棵幼苗基部產(chǎn)生7～10條3cm左右長的根系；而其它激素配比的培養(yǎng)基上，雖幼苗也能長出根系，但發(fā)根慢，數(shù)量少，苗和根的長勢均不如17號培養(yǎng)基上的幼苗。因此，生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為17號，即1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L。

表3 生根培養(yǎng)的激素配比（mg/L）

[編號＼&NAA＼&IBA＼&IAA＼&13

14

15

16

17

18＼&0

0.2

0

0.2

0

0.2＼&0

0

0.2

0.2

0.2

0＼&0

0

0

0

0.2

0.2＼&]

3 煉苗及定植技術(shù)

3.1 煉苗 將2～3cm高、根系發(fā)達的瓶苗取出，沖洗凈根部瓊脂，栽植于以純蛭石為基質(zhì)的煉苗盤中，澆透水后，用800～1 000倍的百菌清藥液澆灌，放在遮光50%的陰棚內(nèi)，加蓋塑料薄膜保濕，溫度控制在15～25℃，7d后逐漸去掉薄膜，成活率達90%以上，15d后即可定植。

3.2 定植 驅(qū)蚊香草為多年生常綠草本植物，只要溫度適宜，一年四季均可定植，以春、秋兩季最適。由于煉苗后的瓶苗仍較弱，應(yīng)先定植于疏松透氣、排水良好的基質(zhì)中。本試驗采用1∶1的腐殖土和蛭石作基質(zhì)，生長過程中，定期噴施適量的尿素和磷酸二氫鉀溶液，苗長至20cm左右高時，再次換盒移栽，并作摘心整形處理。驅(qū)蚊香草最適生長溫度15～25℃，0℃以上的可安全越冬，喜富含有機質(zhì)、排水良好、疏松肥沃、pH值中性的土壤，喜光、喜溫、怕積水。15℃以上即可正常散發(fā)檸檬香味，適當(dāng)向植株噴霧，可使香芽醛物質(zhì)源源不斷地釋放，30片葉以上的植株驅(qū)蚊效果明顯。

4 討論

（1）由于受時間和材料的限制，本試驗的設(shè)計帶有很強的經(jīng)驗性，范圍窄，其結(jié)果可能具有一定的局限性，有待于進一步優(yōu)化、完善。

（2）誘導(dǎo)分化過程中，一些斷裂的葉柄處也能分化出幼芽，說明外植體的取材范圍可擴大，應(yīng)作更深入的試驗研究。

（3）繼代培養(yǎng)基中的6-BA濃度須低于誘導(dǎo)分化的6-BA濃度，可能與材料體內(nèi)6-BA的積累有關(guān)。

（4）誘導(dǎo)分化培養(yǎng)及繼代培養(yǎng)超過25d后，瓶苗葉片開始黃化；生根培養(yǎng)超過20d后，根尖開始變黑，可能與瓶口密閉、材料散發(fā)的醛類物質(zhì)積累濃度過高有關(guān)。

（5）生根培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)，幼苗的發(fā)根對溫度非常敏感，同一培養(yǎng)架的上下層之間差異很大，應(yīng)做更細的試驗，探索其生根的最佳溫度。

（6）對驅(qū)蚊香草的驅(qū)蚊效果還應(yīng)進行更科學(xué)、深入的試驗研究，以便對其價值作更客觀的評價。

（責(zé)編：張宏民）endprint

摘 要：用帶頂芽的幼嫩莖段作外植體，采用組織培養(yǎng)技術(shù)，篩選驅(qū)蚊香草的最佳快繁方案。試驗表明：誘導(dǎo)分化的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L，繼代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L，成苗的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L，生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方為1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L。

關(guān)鍵詞：驅(qū)蚊香草；組織培養(yǎng)；繁殖

中圖分類號 S567.9 文獻標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731（2014）18-25-02

驅(qū)蚊香草，又名凈蚊香草，屬牻牛兒苗科天竺葵屬的多年生常綠草本植物。最早是荷蘭、法國的生物學(xué)家運用細胞融合技術(shù)，將香茅草中所產(chǎn)生香茅醛的基因轉(zhuǎn)移到天竺葵中培育而成的新型植物，在自然條件下可散發(fā)驅(qū)蚊物質(zhì)香茅醛，達到驅(qū)蚊效果，且具有檸檬香味，由此而得名。驅(qū)蚊香草株型優(yōu)美，氣味芳香，具有生態(tài)驅(qū)蚊、凈化空氣、提神醒腦、抗菌消毒等功效，在歐洲深受歡迎。近幾年來，我國許多大中城市開始引進栽培驅(qū)蚊香草，需求量逐漸增大，但因其花不育，不能結(jié)實，傳統(tǒng)的扦插繁殖方法已遠遠不能滿足市場的需求，而組織培養(yǎng)方法可短期內(nèi)獲得大量的再生植株，解決種苗的供求矛盾。為此，筆者采用組織培養(yǎng)技術(shù)，篩選驅(qū)蚊香草的最佳快繁方案。

1 材料與方法

1.1 取材與處理 從植株上切下帶頂芽的幼嫩莖段，用0.1%的洗衣粉水?dāng)噭悠?0min，自來水沖洗20min，以除去外植體表面附著的灰塵和絕大部分雜菌。無菌條件下用70%的酒精溶液浸泡20s左右，再用0.1%的HgCl2消毒8～10min，無菌水沖洗4次。將消毒好的外植體切段，以帶2個節(jié)間為宜，接種到制備好的培養(yǎng)基上。

1.2 試驗方法 外植體接種在附加不同濃度的6-BA、NAA和IAA等生長調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基中（食用糖3%、瓊脂0.6%、pH值5.5～5.8），溫度25±2℃，連續(xù)14h/d光照條件下培養(yǎng)，30d左右形成芽叢；將芽叢分別分割成含2～3個小芽的小塊進行繼代培養(yǎng)，20d左右形成新的芽叢，再繼代；當(dāng)群體達到所需要的數(shù)量時，將芽叢轉(zhuǎn)接到成苗培養(yǎng)基上；20d左右，當(dāng)苗高長1～2cm時，將無根苗接種到附加不同濃度NAA、IAA和IBA的1/2MS培養(yǎng)基上，15～20d，苗高達2～3cm，且根系發(fā)達時，即可進行煉苗定植。

2 結(jié)果與分析

2.1 叢生芽的誘導(dǎo) 以MS作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，激素濃度配比見表1。外植體接種7d后，3、4、5、6號培養(yǎng)基上的莖段腋芽處出現(xiàn)許多綠點；1、2號培養(yǎng)基上的莖段切口處形成大量愈傷組織，腋芽膨大伸長；7號培養(yǎng)基上的莖段僅腋芽伸長。15d后，3、4、5、6號培養(yǎng)基上的外植體莖節(jié)處分化出大量小芽，形成芽叢；3號培養(yǎng)基上形成的幼芽最多（20個左右），其次為5號；1、2號培養(yǎng)基上外植體形成的愈傷組織逐漸老化，無幼芽分化，膨大伸長的腋芽也逐漸枯死；7號培養(yǎng)基上莖段的腋芽繼續(xù)伸長，無新的幼芽產(chǎn)生。因此，3號培養(yǎng)基，即MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L為誘導(dǎo)分化的最佳培養(yǎng)基。

2.2 繼代培養(yǎng) 將誘導(dǎo)分化20d左右的芽叢分割成含2～3個幼芽的小塊，接種到表1所示的各培養(yǎng)基上，20d后，3、4、5、6、7號培養(yǎng)基上均分化出新的芽叢，其中以5號培養(yǎng)基，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L的配比最佳，繁殖系數(shù)高，且芽體健壯；6、7號培養(yǎng)基上的芽叢繁殖系數(shù)偏低；3、4號培養(yǎng)基雖然也能分出大量芽叢，但芽體多為畸形，逐漸形成水漬狀的玻璃化苗；1、2號培養(yǎng)基上的幼苗基部形成大量愈傷組織，并逐漸枯死。因此，繼代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為5號，即MS+9-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。

2.3 成苗培養(yǎng) 當(dāng)幼芽群體達到需要的數(shù)量時，將芽叢轉(zhuǎn)接到仍以MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成苗培養(yǎng)基（下轉(zhuǎn)34頁）（上接25頁）上進行壯苗培養(yǎng)，激素配比見表2。7d以后，接種到各培養(yǎng)基上的幼芽均有不同程度的伸長生長，其中以10號培養(yǎng)基，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L的配比最為適宜，幼苗生長快而健壯，20d左右苗高達1～2cm，莖部有少量白根產(chǎn)生，并伴有新的幼芽分化，逐漸成苗。因此，成苗培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為10號，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L。

表2 成苗培養(yǎng)基的激素配比（mg/L）

[編號＼&6-BA＼&NAA＼&8

9

10

11

12＼&0.1

0.05

0.05

0.01

0.01＼&0.2

0.1

0.2

0.1

0.2＼&]

2.4 生根培養(yǎng) 將2cm左右高，具有3～4片葉的無根苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)，以1/2MS作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，附加不同濃度的生長素（見表3）。7d后，17號即1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L培養(yǎng)基上的幼苗長出大量白根，15d左右，每棵幼苗基部產(chǎn)生7～10條3cm左右長的根系；而其它激素配比的培養(yǎng)基上，雖幼苗也能長出根系，但發(fā)根慢，數(shù)量少，苗和根的長勢均不如17號培養(yǎng)基上的幼苗。因此，生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為17號，即1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L。

表3 生根培養(yǎng)的激素配比（mg/L）

[編號＼&NAA＼&IBA＼&IAA＼&13

14

15

16

17

18＼&0

0.2

0

0.2

0

0.2＼&0

0

0.2

0.2

0.2

0＼&0

0

0

0

0.2

0.2＼&]

3 煉苗及定植技術(shù)

3.1 煉苗 將2～3cm高、根系發(fā)達的瓶苗取出，沖洗凈根部瓊脂，栽植于以純蛭石為基質(zhì)的煉苗盤中，澆透水后，用800～1 000倍的百菌清藥液澆灌，放在遮光50%的陰棚內(nèi)，加蓋塑料薄膜保濕，溫度控制在15～25℃，7d后逐漸去掉薄膜，成活率達90%以上，15d后即可定植。

3.2 定植 驅(qū)蚊香草為多年生常綠草本植物，只要溫度適宜，一年四季均可定植，以春、秋兩季最適。由于煉苗后的瓶苗仍較弱，應(yīng)先定植于疏松透氣、排水良好的基質(zhì)中。本試驗采用1∶1的腐殖土和蛭石作基質(zhì)，生長過程中，定期噴施適量的尿素和磷酸二氫鉀溶液，苗長至20cm左右高時，再次換盒移栽，并作摘心整形處理。驅(qū)蚊香草最適生長溫度15～25℃，0℃以上的可安全越冬，喜富含有機質(zhì)、排水良好、疏松肥沃、pH值中性的土壤，喜光、喜溫、怕積水。15℃以上即可正常散發(fā)檸檬香味，適當(dāng)向植株噴霧，可使香芽醛物質(zhì)源源不斷地釋放，30片葉以上的植株驅(qū)蚊效果明顯。

4 討論

（1）由于受時間和材料的限制，本試驗的設(shè)計帶有很強的經(jīng)驗性，范圍窄，其結(jié)果可能具有一定的局限性，有待于進一步優(yōu)化、完善。

（2）誘導(dǎo)分化過程中，一些斷裂的葉柄處也能分化出幼芽，說明外植體的取材范圍可擴大，應(yīng)作更深入的試驗研究。

（3）繼代培養(yǎng)基中的6-BA濃度須低于誘導(dǎo)分化的6-BA濃度，可能與材料體內(nèi)6-BA的積累有關(guān)。

（4）誘導(dǎo)分化培養(yǎng)及繼代培養(yǎng)超過25d后，瓶苗葉片開始黃化；生根培養(yǎng)超過20d后，根尖開始變黑，可能與瓶口密閉、材料散發(fā)的醛類物質(zhì)積累濃度過高有關(guān)。

（5）生根培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)，幼苗的發(fā)根對溫度非常敏感，同一培養(yǎng)架的上下層之間差異很大，應(yīng)做更細的試驗，探索其生根的最佳溫度。

（6）對驅(qū)蚊香草的驅(qū)蚊效果還應(yīng)進行更科學(xué)、深入的試驗研究，以便對其價值作更客觀的評價。

（責(zé)編：張宏民）endprint