蔬菜農(nóng)殘速測(cè)技術(shù)及常見異常結(jié)果分析

馬天文+王妙星+金文萍+常翔

摘 要：該文從試樣的制備、處理、檢測(cè)、結(jié)果分析及注意事項(xiàng)等方面介紹了酶抑制法快速檢測(cè)蔬菜農(nóng)藥殘留技術(shù)，并分析了檢測(cè)常見異常結(jié)果出現(xiàn)的原因，提出了有效的避免措施。

關(guān)鍵詞：蔬菜；農(nóng)殘速測(cè)；異常結(jié)果分析

中圖分類號(hào) S481.8 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2014）19-92-02

蔬菜是人們?nèi)粘ｏ嬍持斜夭豢缮俚氖澄镏唬S著社會(huì)的發(fā)展，人民生活水平日益提高，蔬菜質(zhì)量安全問題已成為當(dāng)前人們普遍關(guān)注的一個(gè)熱點(diǎn)問題。有專家學(xué)者認(rèn)為，蔬菜質(zhì)量安全問題主要存在于生產(chǎn)管理環(huán)節(jié)，由于當(dāng)前農(nóng)民的安全生產(chǎn)意識(shí)不強(qiáng)，農(nóng)藥的不合理、不科學(xué)使用，造成蔬菜農(nóng)藥殘留問題。目前，農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)作為控制蔬菜農(nóng)藥殘留量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，能及時(shí)地為農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管提供充分的依據(jù)，杜絕農(nóng)藥殘留超標(biāo)農(nóng)產(chǎn)品的上市銷售。酶抑制快速檢測(cè)法因其操作簡(jiǎn)單、快速、成本低、比較實(shí)用等優(yōu)點(diǎn)，成為目前農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)機(jī)構(gòu)廣泛使用的農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法。

新疆兵團(tuán)第十三師農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心承擔(dān)蔬菜質(zhì)量安全檢測(cè)工作，本中心采用吉大小天鵝牌農(nóng)殘速測(cè)儀，對(duì)全師各農(nóng)場(chǎng)生產(chǎn)及銷售環(huán)節(jié)的蔬菜進(jìn)行例行監(jiān)測(cè)和監(jiān)督抽檢，從而有效地保障了農(nóng)產(chǎn)品安全生產(chǎn)。然而，農(nóng)殘速測(cè)在實(shí)際應(yīng)用中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一些結(jié)果異?，F(xiàn)象，以至于造成有些檢測(cè)人員對(duì)農(nóng)殘速測(cè)方法的科學(xué)性和可靠性提出了質(zhì)疑。本文主要介紹了蔬菜農(nóng)殘速測(cè)技術(shù)，并針對(duì)常見的檢測(cè)異常結(jié)果及可能引起的原因進(jìn)行分析，以供參考。

1 蔬菜農(nóng)殘速測(cè)技術(shù)

1.1 檢測(cè)前準(zhǔn)備

1.1.1 儀器和工具 農(nóng)藥殘留速測(cè)儀（吉大小天鵝）、振蕩器、電子天平、比色皿、提取瓶、移液槍、刀子、剪刀、菜板、鑷子、玻璃棒。

1.1.2 試劑準(zhǔn)備 試劑共有4種，包括緩沖液、乙酰膽堿酯酶液、顯色劑和底物，通常購(gòu)于市場(chǎng)中成品的試劑盒，也可以根據(jù)試劑說明書進(jìn)行自行配制，試劑應(yīng)在0～4℃的冰箱中保存，使用時(shí)需搖勻，放置到常溫再使用，用完后立刻放進(jìn)冰箱。

1.1.3 儀器自檢與預(yù)熱 接通儀器電源，打開主機(jī)開關(guān)，自檢時(shí)間大約為10s左右。為確保測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性，儀器開機(jī)后需要30min的預(yù)熱時(shí)間。

1.2 樣品處理與檢測(cè)報(bào)告

1.2.1 空白處理 取其一比色瓶，加入1.25mL緩沖液和50μL酶液，搖勻，在30℃下靜置10min，加入顯色劑50μL和底物50μL，搖勻（時(shí)間控制在1min內(nèi)），立刻放入比色池內(nèi)，按下空白檢測(cè)鍵。按照試劑盒使用指南，空白對(duì)照溶液檢測(cè)值變化應(yīng)在0.15～0.3，如果小于0.15或大于0.3，需重新設(shè)置顯色時(shí)間，必須保證空白檢測(cè)值有效。

1.2.2 樣品處理 蔬菜樣品經(jīng)切碎（控制在1cm左右）、混勻后，準(zhǔn)確稱取2.0g于提取瓶中，每個(gè)樣品做3次平行，加入10mL緩沖溶液，振蕩3min，吸取浸提液上清液1.25mL于比色瓶中，加入50μL酶液，搖勻在30℃下靜置10min后，加入50μL顯色劑和50μL底物，搖勻后上機(jī)檢測(cè)。需注意樣品處理與空白對(duì)照檢測(cè)過程的時(shí)間、溫度保持一致。以上空白和樣品的處理方法均參考國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.199-2003，蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)[1]。

1.2.3 檢測(cè)報(bào)告 檢測(cè)完成后，需填寫檢測(cè)報(bào)告單，主要參數(shù)包括被檢單位、檢測(cè)日期、檢測(cè)人和審核人等信息[2]。經(jīng)檢測(cè)，對(duì)于顯陽(yáng)性的樣品，必須使用氣相色譜法和高效液相色譜法進(jìn)行復(fù)檢，才能判定最終結(jié)果。

1.3 注意事項(xiàng) 首先，檢測(cè)用水必須為蒸餾水；其次，科學(xué)使用移液槍，使用時(shí)緩吸緩放，小心濺出，第一次吸入的液體須作為廢液處理掉，使用完后恢復(fù)最大量程；再次，做好完整的檢測(cè)原始記錄，原始記錄是對(duì)整個(gè)檢測(cè)過程的再現(xiàn)，因此要做好該項(xiàng)工作，做到有據(jù)可查，使檢測(cè)結(jié)果清晰可靠[3]；最后，比色杯需擦干凈，不能受到污染。

2 異常結(jié)果分析及對(duì)策

2.1 產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果 同批次樣品檢測(cè)結(jié)果有一半或更多個(gè)大于50%，根據(jù)這一現(xiàn)象即可判定出現(xiàn)了假陽(yáng)性。當(dāng)假陽(yáng)性結(jié)果出現(xiàn)時(shí)，首先，應(yīng)檢查對(duì)照樣品檢測(cè)值是否合乎要求；其次，檢查酶反應(yīng)過程中溫度變化，這一過程必須在30℃恒溫條件下進(jìn)行；再次，有些蔬菜（如生姜、蔥、蒜、韭菜、香菜、西紅柿、青椒、胡蘿卜等）的汁液中本身就含有對(duì)酶產(chǎn)生影響的次生物質(zhì)，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果呈現(xiàn)一定的假陽(yáng)性。因此，對(duì)以上樣品應(yīng)使用整株浸泡法，避免次生物質(zhì)干擾。

2.2 檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)多個(gè)0.01%或負(fù)值 這一現(xiàn)象屬于系統(tǒng)錯(cuò)誤，主要是由于對(duì)照檢測(cè)值小于實(shí)際值造成的。抑制率是樣品值于對(duì)照值比較而得到的，在作對(duì)照檢測(cè)時(shí)，加入的試劑量不準(zhǔn)確，導(dǎo)致測(cè)出的對(duì)照值小于實(shí)際值，就會(huì)出現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果中有多個(gè)0.01%的異?，F(xiàn)象。一旦出現(xiàn)這種情況，必須要重做對(duì)照[4]。因此，在實(shí)際操作中，要正確掌握移液槍等工具的使用方法，避免因操作不當(dāng)導(dǎo)致兩驅(qū)試劑不準(zhǔn)，最終造成檢測(cè)值出現(xiàn)偏差的問題。

2.3 平行檢測(cè)值差異大 3個(gè)平行樣品檢測(cè)結(jié)果可能顯示有很大的差異，比如出現(xiàn)2個(gè)顯陰性，1個(gè)顯陽(yáng)性，或者2個(gè)顯陽(yáng)性，1個(gè)顯陰性的情況。這就需從原始記錄入手檢查操作是否規(guī)范，檢查所用試劑是否受到污染或已失效，檢查空白對(duì)照檢測(cè)值是否準(zhǔn)確，此外還應(yīng)該考慮比色皿是否受污染、稱量樣品前是否混勻、儀器各通道的透光程度是否達(dá)到100%[5]。對(duì)于檢測(cè)結(jié)果異常的樣品，根據(jù)上述分析的情況，重新進(jìn)行一次快速檢測(cè)。

參考文獻(xiàn)

[1]國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.199-2003，蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè).

[2]李春煥.酶抑制率法農(nóng)殘速測(cè)操作技術(shù)[J].陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013（3）：274-275.

[3]李華，黃劍飛，曹海燕，等.蔬菜農(nóng)殘速測(cè)儀檢測(cè)技術(shù)及注意事項(xiàng)[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2011（10）：363-364.

[4]李衛(wèi)東，梁海林，高麗琴.RP 410型農(nóng)殘速測(cè)儀快速檢測(cè)果品方法及注意事項(xiàng)[J].河北果樹，2013（3）：56-57.

[5]韓康農(nóng).農(nóng)殘速測(cè)中常見結(jié)果異常分析[J].農(nóng)業(yè)與技術(shù)，2003（1）：113-114. （責(zé)編：張宏民）endprint